【クロマトQ&A】：HILICカラム Wakopak Wakisil-Ⅱ5SIL-AQについて
本記事は、Analytical Circle No.54（2009年9月号）に掲載されたものです。
最近、色々なメーカーのラインアップにHILICカラムがありますが、Wakopak®のラインアップにはないのでしょうか。
HILICとはHydrophilic Interaction Chromatographyの略称で、日本語では「親水性相互作用クロマトグラフィー」と呼ばれています。HILICモードでは極性基を有する固定相と、逆相系で用いるアセトニトリル/水系移動相の組合せにより、親水性化合物を保持させ分離することが可能な分離モードです。弊社のWakopak®シリーズではWakopak® Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQがHILICカラムになります。
Wakopak® WAkosil-Ⅱ 5SIL-AQは5 µm 球状シリカゲル(未修飾シリカ)を用いており、ODSでは保持の難しかった高極性化合物、塩基性化合物も良好に分析が可能です。またイオンペア試薬を添加することなく分析できます。
下記にカラムの特長、実際のアプリケーションについてお示しいたします。
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特長
- 高極性物質の分析に適する
- 塩基性物質の分析に優れる
- 高濃度の有機溶媒を溶離液に使用
(アセトニトリル80 %以上) - イオンペア試薬不要
→LC/MSの高感度分析に最適
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使用範囲
- 有機溶媒濃度(アセトニトリル) 80 %以上
- pHの範囲 1～4
Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQの基本特性
充てん剤：Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ
基材：5 µm球状
比表面積：500 m2/g
細孔径：6 nm
細孔容量：0.7 mL/g
修飾：未修飾シリカゲル
ヌクレオシドの分析
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《Sample》
- Uridine
- Adenosine
- Guanosine
- Cytidine
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Column : Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ, 4.6 mm x 250 mm
Eluent : CH3CN/0.1M HCOONH4, pH3.0 = 85/15
Flow Rate : 1.0 mL/min. at 40℃
Detection : UV 260 nm
Injection : 0.1 mg/mL(H2O), 10 µL -
Column : Wakosil 5C18-200, 4.6 mm x 150 mm
Eluent : CH3CN/0.1M NaH2PO4 = 2/98
Flow Rate : 1.0 mL/min. at room temp.
Detection : UV 260 nm
生薬成分の分析
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《Sample》
- Qunidine
- Quinine
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Column : Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ, 4.6 mm x 250 mm
Eluent : CH3CN/0.1M HCOONH4, pH3.0 = 85/15
Frow Rate : 1.0 mL/min. at 40℃
Detection : UV 254 nm
Injection : 1 mg/mL(CH3CN), 10 µL
高極性な酸性物質(アスコルビン酸)の分析
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《Sample》
- Isoascorbic acid
- Ascorbic acid
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Column : Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ, 4.6 mm x 250 mm
Eluent : CH3CN/H2O/H3PO4 = 97/2/1
Flow Rate : 1.0 mL/min. at 40℃
Detection : UV 210 nm
Injection : 5 µL in 90 % CH3CN (each 1.0 mg/mL) -
Column : Wakosil-Ⅱ 5C18 RS, 4.6 mm x 150 mm
Eluent : 10 mM NaH2PO4, 5mM TBAOH
Flow Rate : 1.0 mL/min. at room temp.
TBAOH : Tetrabutylammonium hydroxide
ODSではイオンペア試薬の添加が必要！
生薬成分
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《Sample》
- Berberine
- Palmatine
- Coptisine
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Column : Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ, 4.6 mm x 250 mm
Eluent : CH3CN/100mM HCOONH4, pH3.0 = 95/5
Flow Rate : 1.0 mL/min. at 40℃
Detection : UV 345 nm
Injection : 5 µL in 90 % CH3CN -
Column : Wakosil 5C18, 4.6 mm x 150 mm
Eluent : CH3CN/0.1M Tartaric acid 4mM SOS = 35/65
SOS : Sodium Octane sulfonate
ODSではイオンペア試薬の添加が必要！
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