【クロマトQ&A】:HPLCカラムの保管溶媒について
本記事は、Analytical Circle No.65(2012年6月号)に掲載されたものです。
HPLCカラムの保管の際、溶媒は何に置換して保管すればいいでしょうか?
HPLCカラムの保管は、充てん剤の種類により注意が必要です。使用後に置換して保管する際の溶媒についてご紹介します。当社HPLCカラムWakopak®を出荷する際の封入溶媒を表1にまとめていますので、参考にしてください。
(1)逆相系シリカゲルカラム
使用されている溶離液のpH、添加されている緩衝液、有機溶媒の種類にもよりますが、一般的な溶離液の場合には、数日であれば、溶離液のままで保管も可能です。長期保管される場合には、洗浄後に緩衝液を含まない、50~100 %の有機溶媒を含む溶離液に置換して保管されることでカラムの劣化を防ぎます。逆相カラムの洗浄方法につきましては、前回のクロマトQ&Aをご参照ください。当社のカラムWakopak®は、出荷時CH3CN/H2O = 60/40に置換しています。
(2)NH2、CN(シアノプロピル)シリカゲルカラム(Wakosil 5NH2、Wakosil-Ⅱ 5CN、Wakosil 5CN)
逆相系および順相系で使用できるカラムです。ご使用の条件により洗浄方法が異なります。逆相系で緩衝液を使用された際には、溶離液の緩衝液を除いた有機溶媒/水の溶離液で緩衝液を洗い流した後、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、などに置換して保管します。水を含まない溶離液で保管する方が、化学修飾基がはがれてカラムが劣化することを防ぎます。水を含む溶離液をご使用の際には、数日でも水を含まない有機溶媒に置換して保管されることをおすすめします。順相系で使用された場合には、n-ヘキサン、エタノール、イソプロピルアルコール、などに置換して保管します。
(3)順相系シリカゲルカラム(Wakosil SILシリーズ)
使用されている溶離液のpH、添加されている緩衝液、有機溶媒の種類にもよりますが、一般的な溶離液の場合には、数日であれば、溶離液のまま保管も可能です。長期保管される場合には、イソプロピルアルコールなどで洗浄後、n-ヘキサンに置換して保管します。
(4)HILICシリカゲルカラム(Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ)
数日であれば、溶離液に使用されている有機溶媒(100%)に置換して保管してください。長期保管される場合には、使用されている有機溶媒に置換後、その有機溶媒からn-ヘキサンに置換して保管します。使用されている有機溶媒がn-ヘキサンと混じり合わない有機溶媒の場合には、エタノール、イソプロピルアルコールなどに置換後、n-ヘキサンに置換します。
(5)イオン交換系シリカゲルカラム(Wakosil 5SAX、Wakosil 5SCX)
数日であれば、溶離液のまま保管も可能です。長期保管される場合には、水で無機塩などをよく洗い流した後、メタノールやアセトニトリル100 %に置換してください。
(6)サイズ排除シリカゲルカラム(Wakosil 5Diol)
数日であれば、溶離液のまま保管も可能です。長期保管される場合には、水で無機塩などをよく洗い流した後、メタノールやアセトニトリルを5%程度含む水溶液に置換してください。
(7)その他1(Wakopak® Fluofix-Ⅱ 120E)
シリカゲルにポリフルオロアルキル基を化学修飾したカラムで、ODSと同様に逆相系で使用するカラムです。洗浄方法や保管の注意点はODSに準じますが、ODSよりも撥水性が高い充てん剤を使用していますので、水を含まない有機溶媒、メタノールやアセトニトリル100%で置換して保管されることを推奨します。
(8)その他2(Wakopak®専用カラム)
数日であれば、溶離液のまま保管も可能です。当社の専用カラムは、逆相系シリカゲルを充てん剤に使用していますので、注意点は(1)と同様です。
- 共通した注意点として、溶離液のpHがカラムの使用範囲を外れる条件で使用されている場合、溶離液組成にハロゲンが含まれる場合などには、保管期間に関わらず分析終了後には、各保管用の溶媒に置換することを推奨いたします。
表1.Wakopak®カラムの出荷時封入溶媒
HPLCカラムの種類 | Wakopakの種類 | 出荷時封入溶媒 |
---|---|---|
逆相系シリカゲルカラム | Wakosil C18、C8、C4シリーズ、Naviシリーズ(C18、C22、C30)、Wakosil 5C1、Wakosil 5Ph | CH3CN/H2O = 60/40 |
Wakosil 5NH2、Wakosil-Ⅱ 5CN、Wakosil 5CN | Ethanol | |
Wakopak® Fluofix-Ⅱ 120E | Methanol | |
順相系シリカゲルカラム | Wakosil SILシリーズ | n-Hexan/CH3CN = 99/1 |
HILICシリカゲルカラム | Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ | n-Hexan/CH3CN = 99/1 |
イオン交換系シリカゲル | Wakosil 5SAX、Wakosil 5SCX | Ethanol |
サイズ排除シリカゲル | Wakosil 5Diolシリーズ | 0.05 % NaN3 |
専用カラム | Wakosil-PTC、GP-N6、DNA、Cu、PAHs、DNPH、DNPH-Ⅱ、Combi ODS、ODS fast | CH3CN/H2O = 60/40 |
Wakosil-PTH | 専用溶離液 | |
Wakosil Agri-9 | 専用溶離液 | |
Combi CN | Ethanol |