レビス® Human IL-6 ELISA Kit Human IL-6 ELISA Kit

IL- 6 は 189 アミノ酸の分泌性の糖タンパク質で、B 細胞を抗体産生細胞に分化させるサイトカインとして見出されましたが、免疫応答、炎症反応をはじめ、造血、神経系細胞の増殖・分化など多彩な生理作用において重要な役割を果たしていることが知られています。T 細胞、単球、線維芽細胞、血管内皮細胞、ケラチノサイトなどにより産生された後、IL-6Rα と gp130 の 2 本鎖からなる IL-6 受容体と結合し、シグナルが伝達されます。IL-6 は、関節リウマチの病態の活動性と相関するという報告もあり、関節リウマチなど自己免疫疾患、炎症疾患の分野でも注目されています。

本製品は、ヒト IL-6 を定量的に測定するためのサンドイッチ酵素免疫測定法試薬で、ヒト血清(血漿)中のIL-6 を特異的かつ高感度に測定することができます。

• 
  

• 特長

  • カルタヘナ法非該当(バキュロウイルス不含)
  • 短時間(総反応時間3時間50分)
  • 高感度測定(1.16 pg/mL～)
  • 微量検体(～100 μL)

• 製品情報

  検体

  ・ヒト血清
  ・ヒト血漿(EDTA/ヘパリン)
  ・培養上清

  標準曲線範囲

  　1.16～500 pg/mL

• 操作法

  抗体固相化96ウェルプレート 　↓ 洗浄 4 回 　↓ 希釈検体または標準溶液 　↓ 攪拌、室温、2 時間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ ビオチン結合抗IL-6抗体 　↓ 攪拌、室温、1 時間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ ペルオキシダーゼ・アビジン結合物 　↓ 攪拌、室温、30 分間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ 発色液(TMB) 　↓ 攪拌、室温、20 分間静置反応 　↓ 反応停止液(1M H2SO4) 　↓ 攪拌 　↓ 吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)	100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL
  室温：20～25 ℃

• 標準曲線(例)

  

• 精度試験(アッセイ内変動)

  正常血清に異なる濃度のIL-6を添加した2検体を5重測定し精度を確認した。

  n/ID	Sample1(pg/mL)	Sample2(pg/mL)
  1	170	36.1
  2	169	35.8
  3	175	35.6
  4	171	36.2
  5	173	36.4
  mean	172	36.0
  SD	2.4	0.32
  CV(%)	1.4	0.89

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  正常血清に異なる濃度のIL-6を添加した3検体を4日間3重測定し精度を確認した。

  Day/ID	Sample1(pg/mL)	Sample2(pg/mL)	Sample3(pg/mL)
  0日目	186	73.9	20.7
  1日目	207	80.6	23.1
  2日目	184	71.9	20.8
  3日目	192	78.5	22.9
  mean	192	76.2	21.9
  SD	10	4.0	1.3
  CV(%)	5.2	5.2	5.9

添加回収試験

正常血清または血漿検体に異なる 3 濃度の IL-6 を添加し測定した。

• 血清検体

  添加量(pg/mL)	実測値(pg/mL)	回収量(pg/mL)	回収率(％)
  0	6.84	-	-
  40	46.4	39.6	99.0
  160	157	150	93.8
  400	388	381	95.3
  平均　96.0

• 血漿(EDTA)検体

  添加量(pg/mL)	実測値(pg/mL)	回収量(pg/mL)	回収率(％)
  0	33.9	-	-
  40	75.1	41.2	103
  160	193	159	99.4
  400	443	409	102
  平均　102

• 血漿(ヘパリン)検体

  添加量(pg/mL)	実測値(pg/mL)	回収量(pg/mL)	回収率(％)
  0	38.5	-	-
  40	79.8	41.3	103
  160	169	158	98.8
  400	435	397	99.3
  平均　100

検体測定(例)

ヒト正常検体(血清、EDTA血漿、ヘパリン血漿)測定結果

• 血清検体No.	LBIS	他社
  1	9.27	N.D.
  2	N.D.	N.D.
  3	N.D.	N.D.
  4	4.74	5.42
  5	7.95	4.12
  6	3.50	N.D.
  7	3.15	N.D.
  8	125	141
  9	(0.862)	N.D.
  10	35.3	5.50

  (単位：pg/mL)

• 検体条件	LBIS	他社A
  血清　10検体中	8/10 検出	4/10 検出
  EDTA血漿　10検体中	10/10 検出	5/10 検出
  ヘパリン血漿　10検体中	7/10 検出	1/10 検出

  
  

  ※EDTAを推奨します。

  検出感度が高いため、数 pg/mLのIL-6を定量検出できた。