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レビス (TM) Mouse IL-6 ELISA Kit LBIS (TM) Mouse IL-6 ELISA Kit

免疫化学用
for Immunochemistry
製造元 :
富士フイルム和光純薬(株)
保存条件 :
冷蔵 (氷冷輸送)
適用法令 :
特化則第3類 安衛法57条・有害物表示対象物質 労57-2 優先評価物質
GHS :
  • 構造式
  • ラベル
  • 荷姿
SDS
比較
製品コード
容量
価格
在庫 / 納期目安
販売元
299-96001
JAN
4548995099433
96回用
希望納入価格
78,000 円
西日本 :
3
東日本 :
13

ドキュメント

SDS
製品規格書
添付文書
スペクトルデータ
検査成績書
校正証明書
分析チャート

キットコンポーネント

96回用

抗体固相化プレート 96 wells (8×12) / 1枚
マウスIL-6標準品 2本
緩衝液 30 mL / 1本
ビオチン結合抗体溶液 100 μL / 1本
ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン溶液 100 μL / 1本
TMB溶液 12 mL / 1本
標準品・検体用緩衝液 30 mL / 1本
反応停止液 12 mL / 1本
洗浄液(10×) 100 mL / 1本
プレートシール 4枚

製品概要

インターロイキン-6 (IL-6 : Interleukin 6) はB細胞を抗体産生細胞に分化させる炎症性サイトカインであり、免疫応答、炎症反応、抗体産生など幅広く重要な役割を果たします。また、関節リウマチなどの自己免疫疾患や、痛風など炎症性疾患、ARDS (急性呼吸窮迫症候群) の原因となるサイトカインストームの発生機序にも関与しており、治療標的として注目されています。
本製品は、マウスIL-6を定量的に測定するためのサンドイッチELISAキットです。検体中のIL-6を高感度に測定することができます。キットに含まれる標準品は大腸菌由来のリコンビナントタンパク質であり、カルタヘナ法非該当です。

キット性能

測定対象 IL-6
検量線範囲 2.05 - 500 pg/mL
測定対象検体 マウス 血清/血漿 (EDTA)/培地 (D-MEM他)
必要検体量 25 μL (2倍希釈)
測定時間 約3時間50分
検出法 発色系 (主波長: 450 nm/副波長: 620 nm)
  • 培地に標準品を添加した検体で検証しています。
    測定可否は培地や細胞種、培養条件などによって異なります。細胞培養上清を検体として使用する場合には、あらかじめ実験前に使用する培地にて添加回収試験や希釈直線性試験を行ってください。

検量線例

グラフ:検量線例

データ

同時再現性試験

本製品で各2濃度のマウス血清について5重測定を実施し、精度を確認した。

n\ID ID1 ID2
測定値 (pg/mL) 測定値 (pg/mL)
1 281 18.7
2 285 19.1
3 281 18.7
4 282 18.7
5 291 19.6
mean 284 19.0
SD 4.24 0.40
CV(%) 1.5 2.1
[結果]
マウス血清のCV(%)は1.5-2.1%と良好であった。

日差再現性試験

本製品で各3濃度のマウス血清について、4日間3重測定を実施し、精度を確認した。

Day\ID ID3 (pg/mL) ID4 (pg/mL) ID5 (pg/mL)
1 246 84.0 15.1
2 230 78.8 13.9
3 254 86.2 15.3
4 244 84.9 14.4
mean 244 83.5 14.7
SD 10.0 3.24 0.645
CV(%) 4.1 3.9 4.4
[結果]
マウス血清のCV(%)は3.8-4.4%と良好であった。

希釈直線性試験

製品添付の緩衝液を用いて、標準品を添加したマウス血清/血漿 (EDTA) および培地を倍々希釈後、2重測定を実施し、直線性を確認した。

マウス血清
グラフ:希釈直線性試験 マウス血清
マウス血漿 (EDTA)
グラフ:希釈直線性試験 マウス血漿(EDTA)
培地 (D-MEM)
グラフ:希釈直線性試験 培地 (D-MEM)
培地 (10% FCS / D-MEM)
グラフ:希釈直線性試験 培地 (10% FCS / D-MEM)
[結果]
いずれも測定範囲内で良好な直線性を示した。

添加回収試験

マウス血清/血漿 (EDTA)、D-MEM培地、および10%FCS/D-MEM培地 に4濃度のスタンダードを添加し、2重測定を実施した。

マウス血清

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
- 4.8 - -
22.8 26.9 22.1 96.9
46.0 49.0 44.2 96.0
96.4 95 90.1 93.4
197.0 193 188.2 95.5
平均 95.5

マウス血漿(EDTA)

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
- 4.4 - -
28.1 30.6 26.2 93.0
56.0 55.0 50.5 90.2
115.6 107 102.1 88.4
227.3 206 201.8 88.8
平均 90.1

培地 (D-MEM)

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
- 0.0 - -
23.0 24.1 24.1 105.0
48.3 47.7 47.7 98.7
97.5 93 93.0 95.3
194.4 205 205.1 105.5
平均 101.1

培地 (10% FCS / D-MEM)

添加量
(pg/mL)
実測値
(pg/mL)
回収量
(pg/mL)
回収率
(%)
- 0.0 - -
28.1 27.6 27.6 98.1
56.0 60.2 60.2 107.5
115.6 121 120.7 104.4
227.3 237 237.2 104.3
平均 103.6
[結果]
いずれも良好な回収率であった。

類似タンパク質との交差性

本製品を用いて、マウスIL-6に近い物質 (他種IL-6、インターロイキン類など) について検出されるか確認した。

タンパク質 添加量
(pg/mL)
測定値
(pg/mL)
交差性
(%)
ヒトIL-6 500 0.034*1 0.01
ラットIL-6 500 0.214*1 0.04
マウスIL-4 1,000 0.01*1 0.001
マウスIL-7 1,000 -*2 -
マウスgp130 1,000 -*2 -
マウスIL-6Rα 1,000 -*2 -

*1 参考値 (検量線下限以下)
*2 検出下限以下

[結果]
本製品において、今回測定した類似タンパク質の交差性は検量線下限以下であった。

他社製品との相関

レビス™ Mouse IL-6 ELISA Kit (本製品) および他社製品を用いて、マウス血清検体を測定し、その相関を確認した。

グラフ:他社製品との相関
[結果]
本製品および他社製品の測定値には高い相関が確認できた。

検出性能の比較

マウス血清検体について、本製品と他社製品でそれぞれ測定を行い、検出の可否について比較を行った。

ID 本製品
(pg/mL)
他社製品
(pg/mL)
1 1.71* 検出不可
2 6.50 5.52*
3 6.39 9.02
4 7.01 7.67*
5 9.67 7.53*
検量線範囲内で測定できた
検体の割合
4/5検体 1/5検体

*検量線範囲外の検体は参考値を記載

[結果]
本製品は検出感度が高く、5検体中4検体を検量線範囲内で検出することができた。

FAQ

検体について

血漿の抗凝固剤は何を使用すればよいでしょうか。
血漿採血時の抗凝固剤には、EDTAを使用してください。また血清分離剤や凝固促進剤等を使用する際は事前確認をしてください。
検体の保管と調製方法について教えてください。
検体を長期に保管する場合は、-35℃以下での凍結保管を推奨します。繰り返しの凍結融解は避けてください。凍結した検体は測定する直前に解凍し充分に攪拌してください。また、検体を希釈する場合は用時調製とし、あらかじめ試験管 (PP、PE) 等を用いて緩衝液で希釈し測定ウェルに分注してください。
なお検体は定法に従い採血、分離したマウス血清および血漿を使用してください。

キットの使用について

本製品で測定する際に必要な器具、装置を教えてください。
本製品の使用には以下の器具、装置が必要です。
・精製水 (蒸留水)
・試験管
・洗浄液希釈用器具
・チップ交換型ピペット (50 μLおよび100 μL~1000 μLを正確に採取できるもの)
・連続分注ピペット
・ペーパータオル等 (洗浄時に使用)
・攪拌器 (Vortexタイプ)
・プレート振とう器 (約600 rpm ~1200 rpm)
・プレート用洗浄機 (あれば好ましい) または噴射ビン
・プレートリーダー (450 nm ± 10 nm/620 nm : 600 nm ~650 nm)
・データ計算用ソフトウェア
標準品はどのように使用すればよいでしょうか。
本製品はロットにより添加する精製水の量が異なります。標準品に本製品ページ中の「標準品原液の調製について」で確認した量の精製水を加え溶解し、標準品原液 (5 ng/mL) を調製してください。その後室温化されたキット添付の緩衝液で調製してください。
各試薬の調製後の保管方法を教えてください。
【緩衝液、TMB溶液、標準品・検体用緩衝液】
一部の溶液を使⽤する際は必要量より少し多めの量を別の容器に移し、残りは室温に戻さないで直ちに蓋をしっかり閉め、2℃~10℃で保存して下さい。
【反応停⽌液】
室温化後そのままの状態で使⽤できますが、使⽤残りを保存する場合は、蓋をしっかりと閉め、2℃〜10℃で保存してください。
【標準品】
精製⽔を加え溶液化した標準品原液は2℃〜10℃で保存し、2週間以内に使⽤してください。緩衝液で希釈調製した各標準溶液は直ちに使⽤し、保存はしないでください。
【ビオチン結合抗体溶液、ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン溶液】
キットを分割して使⽤する際は希釈時に冷蔵庫より取り出し希釈調製し、残りの原液は室温に戻さないで直ちに蓋をしっかりと閉め、2℃〜10℃で保存してください。使⽤残りの希釈済み液は廃棄してください。

各溶液については測定に必要な分だけ試薬を調製してください。

概要・使用例

概要 マウスIL-6は187アミノ酸の分泌性の糖タンパク質で、B細胞を抗体産生細胞に分化させるサイトカインとして見出されましたが、免疫応答、炎症反応をはじめ、造血、神経系細胞の増殖・分化など多彩な生理作用において重要な役割を果たしていることが知られています。IL-6 は関節リウマチの病態の活動性と相関するという報告もあり、関節リウマチなど自己免疫疾患、炎症疾患の分野でも注目されています。

■性能
検量線範囲:2.05~500pg/mL
測定対象 :マウス
測定検体 :血清、血漿、培養上清
必要検体量:25uL
反応時間 :3時間50分
検出法  :発色
原理   :サンドイッチ法

物性情報

「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。

製造元情報

別名一覧

【本サイト掲載情報について】

  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
    【医薬品原料】
    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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