レビス® Human IL-8(CXCL8) ELISA Kit Human IL-8(CXCL8) ELISA Kit

IL-8 は炎症性サイトカインの刺激により線維芽細胞や単球、血管内皮細胞で産生される 72 または 77 アミ ノ酸の 2 種類のアイソフォームからなる炎症性 CXC ケモカインで、CXCR1 や CXCR2 受容体に結合し、 シグナルが伝達されます。 IL-8 は好中球走化因子として知られ、標的細胞の感染部位への走化性を誘導し、 さらにファゴサイトーシスを誘導することで、生体における炎症形成の重要なメディエーターとして働いて います。また、 IL-8 は様々な疾患との関連性が研究されており、リウマチ性関節炎、喘息などの呼吸器疾患、 痛風、歯周炎、癌などの分野で注目されています。

本製品は、ヒト IL-8 を定量的に測定するためのサンドイッチ酵素免疫測定法試薬で、ヒト血清(血漿)中 の IL-8 を特異的かつ高感度に測定することができます。

• 
  

• 特長

  • カルタヘナ法非該当(バキュロウイルス不含)
  • 短時間(総反応時間3時間50分)
  • 高感度測定(0.686 pg/mL～)
  • 微量検体(～100 μL)

• 製品情報

  検体

  ・ヒト血清
  ・ヒト血漿(EDTA/ヘパリン)
  ・培養上清

  標準曲線範囲

  　0.686～500 pg/mL

• 操作法

  抗体固相化96ウェルプレート 　↓ 洗浄 4 回 　↓ 希釈検体または標準溶液 　↓ 攪拌、室温、2 時間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ ビオチン結合抗IL-8抗体 　↓ 攪拌、室温、1 時間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ ペルオキシダーゼ・アビジン結合物 　↓ 攪拌、室温、30 分間静置反応 　↓ 洗浄 4 回 　↓ 発色液(TMB) 　↓ 攪拌、室温、20 分間静置反応 　↓ 反応停止液(1M H2SO4) 　↓ 攪拌 　↓ 吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)	100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL
  室温：20～25 ℃

• 標準曲線(例)

  

• 精度試験(アッセイ内変動)

  正常血清に異なる濃度のIL-8を添加した2検体を5重測定し精度を確認した。

  n/ID	Sample1(pg/mL)	Sample2(pg/mL)
  1	169	42.4
  2	162	41.7
  3	165	44.9
  4	155	43.7
  5	179	45.1
  mean	166	43.6
  SD	8.9	1.5
  CV(%)	5.4	3.4

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  正常血清に異なる濃度のIL-8を添加した3検体を4日間3重測定し精度を確認した。

  Day/ID	Sample1(pg/mL)	Sample2(pg/mL)	Sample3(pg/mL)
  0日目	170	55.3	6.25
  1日目	167	55.1	6.03
  2日目	167	54.8	6.27
  3日目	160	55.2	6.41
  mean	166	55.1	6.24
  SD	4.2	0.22	0.16
  CV(%)	2.6	0.39	2.5

添加回収試験

正常血清または血漿検体に異なる 3 濃度の IL-8 を添加し測定した。

• 血清検体

  添加量(pg/mL)	実測値(pg/mL)	回収量(pg/mL)	回収率(％)
  0	18.3	-	-
  62.5	78.6	60.3	96.5
  125	145	127	101
  250	248	230	91.9

• 血漿(EDTA)検体

  添加量(pg/mL)	実測値(pg/mL)	回収量(pg/mL)	回収率(％)
  0	1.29	-	-
  9.38	11.0	9.7	104
  32.5	32.2	30.9	95.1
  130	130	129	99.0

検体測定(例)

ヒト正常検体(血清、EDTA血漿、ヘパリン血漿)測定結果

• 血清検体No.	LBIS	他社
  1	1.90	N.D.
  2	10.5	N.D.
  3	12.8	N.D.
  4	19.4	N.D.
  5	36.9	42.9
  6	0.864	N.D.
  7	16.4	5.77
  8	80.9	141
  9	9.47	N.D.
  10	7.08	N.D.

  (単位：pg/mL)

• 検体条件	LBIS	他社A
  血清　10検体中	10/10 検出	4/10 検出
  EDTA血漿　10検体中	10/10 検出	0/10 検出
  ヘパリン血漿　10検体中	10/10 検出	1/10 検出

  
  

  検出感度が高いため、数 pg/mLのIL-8を定量検出できた。