ラボアッセイ(TM) ALP LabAssay (TM) ALP

アルカリホスファターゼ(ALP)は肝臓をはじめ、骨、小腸などに広く分布している酵素です。特に骨代謝の研究分野では骨形成マーカーの１つとして用いられています。
本品はp-ニトロフェニルりん酸を基質としたアルカリフォスファターゼ活性測定キットで、マイクロプレートリーダーによる多検体測定に有用です。

測定原理

p-ニトロフェニルりん酸を含む炭酸塩緩衝液(pH 9.8)中で検体を作用させると、検体中のアルカリホスファターゼによりp-ニトロフェニルりん酸はp-ニトロフェノールとりん酸に分解され、生成したp-ニトロフェノールはアルカリ性側で黄色を呈します。この405 nmの吸光度を測定することにより検体中のアルカリホスファターゼ活性値を求めます。

性能

・測定範囲 : >0.06 mmol/l
・標準曲線範囲 : 0～0.5 mmol/l
・再現性 : C.V.<10%

標準曲線例

測定操作法

下記に従って、反応させてください。

添加回収試験

• ヒト血清検体

  添加量	測定値	回収量	回収率(%)
  －	0.429	－	－
  0.097	0.527	0.098	101.0
  0.197	0.587	0.158	80.2
  0.297	0.672	0.243	81.8
  0.507	0.866	0.437	86.2

• マウス血清検体

  添加量	測定値	回収量	回収率(%)
  －	0.284	－	－
  0.060	0.343	0.059	98.3
  0.127	0.399	0.115	90.6
  0.251	0.507	0.223	88.8
  0.500	0.753	0.469	93.8

• ラット血清検体

  添加量	測定値	回収量	回収率(%)
  －	0.374	－	－
  0.060	0.439	0.065	108.3
  0.127	0.483	0.109	85.8
  0.251	0.598	0.224	89.2
  0.500	0.855	0.481	96.2

  単位：mmol/L, n=2

希釈直線性試験

測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。

検体測定例

ヒト検体

※抗凝固剤のEDTAは負誤差を与えますので使用しないでください。

• マウス検体：CD-1(ICR)、オス、血清

  検体	測定値 (mean)	SD	CV (%)
  No.1	0.310	0.013	4.2
  No.2	0.453	0.001	0.2
  No.3	0.495	0.015	3.0
  No.4	0.442	0.013	2.9
  No.5	0.373	0.002	0.5

  単位：mmol/L, n=2

• ラット検体：SD、オス、血清

  検体	測定値 (mean)	SD	CV (%)
  No.1	0.538	0.005	1.0
  No.2	0.441	0.010	2.2
  No.3	0.357	0.000	0.0
  No.4	0.460	0.002	0.5
  No.5	0.301	0.011	3.6

• Ito, S. et al. : J. Pharmacol. Exp. Ther., 333, 341 (2010).　※マウス腎臓組織抽出液
• Matsuyama, A. et al. : Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 45, 75 (2018).　※MC3T3-E1細胞, C2C12細胞
• Chiba, T. et al. : J. Atheroscler. Thromb., 23, 1099 (2016).　※マウス血漿
• Kohno, Y. et al. : Stem Cell Res. Ther., 8, 115 (2017).　※骨膜間葉系幹細胞
• Iwakura, T. et al. : J. Orthop. Res., 27, 208 (2009).　※ヒト培養細胞抽出液
• Furuya, Y. et al. : J. Biol. Chem., 286, 37023 (2011).　※マウス血清
• Itoh, T. et al. : J. Biol. Chem., 284, 19272 (2009).　※マウス培養細胞抽出液