細胞内バランスをNAD/NADHの比率で見る

同仁化学　NAD/NADH Assay Kit-WST

本キットは、96ウェルプレートによる比色反応で細胞内のNAD^＋とNADHの量及びNAD^＋とNADHの比率を測定できるキットです。本キットに含まれる抽出バッファーとタンパク質除去用チューブを用いて、簡便に培養細胞から測定サンプルを調整できます。

測定原理

細胞内のNAD^＋とNADHの量は、薬剤投与や遺伝子組み換え等により影響を受けたがん細胞やミトコンドリア機能を理解する際の、重要な代謝マーカーとして評価されています。

長寿に関わるサーチュインがNAD^＋量と深く関与していることも明らかとなっています。また、肥満や糖尿病、細胞分化などの生物学的な状態を理解するためのマーカーとしても評価されるケースが増えています。

本キットに含まれる標準液をサンプルと同時に測定することで、定量解析が行えます。

サンプル中のNAD^＋とNADHの総量が2 µmol/L より濃い濃度の場合は、サンプルを希釈することで評価できます。

下記の実験では、細胞数が2倍異なるHeLa細胞を用いて、 NAD^＋とNADHの量の比を求めました。

増殖培地にて培養したHeLa細胞（2.5 x 10⁵、5.0 x 10⁵ cells)を用い、細胞内のNAD^＋量とNADH量を検量線から求めました。

結果、 NAD^＋量とNADH量は細胞数に応じた変化がみられ、またNAD^＋とNADHの量比を細胞数に変化があっても同等の結果となりました。