同仁化学　ミトコンドリア膜電位検出キット

特徴の異なる 2 つのミトコンドリア膜電位検出キット

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JC-1 ミトコンドリア膜電位検出キット　　JC-1 MitoMP Detection Kit

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MT-1 ミトコンドリア膜電位検出キット　MT-1 MitoMP Detection Kit

従来試薬の3 つの課題を解決		お客様の声にお応えして、従来試薬の課題を解決しています
① 固定化後も観察できる		・FCM 測定までに、一時間以上かかる。 固定化してストップさせたい。
② モニタリングできる		・ミトコンドリア膜電位でアポトーシス変化を経時的に見たい。
③ 高感度検出できる		・JC-1 では僅かな膜電位の変化が見れない。

各試薬との比較

JC-1 MitoMP Detection Kitはミトコンドリア膜電位を色の変化で検出し、論文実績も豊富な製品です。TMRE もミトコンドリア膜電位を観察する際に広く使用されていますが、PFA 固定に対応できない、光退色がおこるという課題がありました。 MT-1 MitoMP Detection Kit は、これらの課題を克服したミ トコンドリア膜電位検出キットです。

	実績	固定化	感度	モニタリング	装置の対応	検出
JC-1 MitoMP Detection Kit	多	✖	△	✖		緑 Ex ：450-490 nm　Em：500-550 nm 赤 Ex ：530-560 nm　Em：570-640 nm
MT-1 MitoMP Detection Kit	少	〇	〇	〇		赤 Ex ：530-560 nm　Em：570-640 nm
TMRE	多	✖	〇	✖		赤 Ex ：530-560 nm　Em：570-640 nm

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ミトコンドリア膜電位と検出原理

初めてでも使いやすい

• 従来の課題を解決
  難溶性のJC-1色素を容易に溶解することが
  できます。

  

• 様々な装置に対応
  検出装置毎に実験例を準備しています。

  

• 解析時のバッファーを同梱
  細胞の状態をより長く維持するため、
  HEPES含有のバッファーを同梱しています。

  

代謝測定との併用例

エネルギー産生の場として重要な役割を果たしているミトコンドリアですが、下記実験ではミトコンドリアの機能阻害剤であるAntimycin (50 nmol/L) をJurkat 細胞に添加し、ミトコンドリア膜電位と解糖系の変化を確認しました。

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ミトコンドリア膜電位と検出原理

ミトコンドリア膜電位を観察する際、JC-1 やTMRE、TMRM が使用されていますが、PFA 固定不可、光退色など試薬特性により、データの再現性に課題がありました。MT-1 MitoMP Detection Kit は、これらの課題を克服したミトコンドリア膜電位検出キットです。

さらに、本キットに含まれる Imaging Buffer により、蛍光バックグラウンドと細胞へのダメージを抑えた状態で観察することができます。

①固定化後も観察できる

• 

• 僅かな細胞状態の変化によりミトコンドリア膜電位は変動するため、データの再現性取得には細心の注意が必要でした。
  汎用のミトコンドリア膜電位検出試薬(JC-1、TMRE)は、細胞を固定化処理すると蛍光が失われるため、生細胞を用いた迅速な測定が必要でした。
  MT-1は、染色後のPFA固定化操作を行っても蛍光が保持されるため、再現性の高い実験を行う事が可能です。

  検出条件
  Ex:530-560 nm, Em:570-640 nm
  スケールバー:100 μm

• ②モニタリングできる

  薬剤刺激を行っていないコントロール細胞を各試薬で染色し、蛍光強度の変化を確認しました。結果、JC-1やTMREは染色から約10分程で蛍光強度が低下し、MT-1は一定に蛍光強度を保ちました。染色後の変化を観察した動画を製品HP中に掲載しています。

• ③高感度検出できる

  わずかなミトコンドリア膜電位の変化は、JC-1では検出困難なケースがあり、その際にTMREが用いられてきました。MT-1はTMREと同等の検出感度を実現しています。

• 　　　検出条件 Ex:530-560 nm, Em:570-640nm
• 　　　検出条件 Ex:530-560 nm, Em:570-640nm