レビス (TM) Mouse TNF-α ELISA Kit
LBIS (TM) Mouse TNF-α ELISA Kit
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比較
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製品コード
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容量
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価格
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在庫 / 納期目安
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96回用
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ドキュメント
キットコンポーネント
96回用
| 抗体固相化プレート | 96 wells (8×12) / 1枚 |
|---|---|
| マウスTNF-α標準品 | 1本 |
| 緩衝液 | 60 mL /1本 |
| ビオチン結合抗体 | 1本 |
| ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン溶液 | 100 μL /1本 |
| TMB溶液 | 12 mL /1本 |
| 反応停止液 | 12 mL /1本 |
| 洗浄液 (10×) | 100 mL /1本 |
| プレートシール | 4枚 |
製品概要
TNF-α (Tumor necrosis factor-α) は157のアミノ酸から構成される炎症性サイトカインで、マウスに移植した腫瘍に対して出血性壊死を誘導する因子として同定されました。また、さまざまな免疫機能の賦活化やアポトーシス誘導による感染防御・抗腫瘍作用があることが明らかにされており、関節リウマチ、炎症、糖尿病などさまざまな疾患にも関与します。 本製品は、マウスTNF-αを定量的に測定するためのサンドイッチELISAキットです。マウス血清・血漿中のTNF-αを高感度に測定することができます。キットに含まれる標準品は大腸菌由来のリコンビナントタンパク質であり、カルタヘナ法非該当です。
キット性能
| 測定対象 | TNF-α |
|---|---|
| 検量線範囲 | 3.58 – 700 pg/mL |
| 測定対象検体 | マウス 血清/血漿 (EDTA・ヘパリン) |
| 必要検体量 | 25 μL (2倍希釈) |
| 測定時間 | 約3時間50分 |
| 検出法 | 発色系 (主波長: 450 nm/副波長: 620 nm) |
検量線例
データ
同時再現性試験
本製品で各2濃度のマウス血清について5重測定を実施し、精度を確認した。
| n＼ID | ID1 (pg/mL) | ID2 (pg/mL) |
|---|---|---|
| 1 | 307 | 32.8 |
| 2 | 296 | 31.6 |
| 3 | 300 | 31.1 |
| 4 | 292 | 32.2 |
| 5 | 282 | 31.3 |
| mean | 295 | 31.8 |
| SD | 9.3 | 0.70 |
| CV(%) | 3.2 | 2.2 |
[結果]
マウス血清のCV(%)は2.2-3.2%と良好であった。
日差再現性試験
本製品で各3濃度のマウス血清について、4日間3重測定を実施し、精度を確認した。
| Day＼ID | ID3 (pg/mL) | ID4 (pg/mL) | ID5 (pg/mL) |
|---|---|---|---|
| 1 | 276 | 45.3 | 6.88 |
| 2 | 292 | 43.9 | 7.05 |
| 3 | 274 | 47.0 | 7.22 |
| 4 | 279 | 45.3 | 6.95 |
| mean | 280 | 45.4 | 7.03 |
| SD | 8.3 | 1.2 | 0.13 |
| CV(%) | 2.9 | 2.8 | 1.8 |
[結果]
マウス血清のCV(%)は1.8-2.9%と良好であった。
希釈直線性試験
製品添付の緩衝液を用いて、標準品を添加したマウス血清/血漿 (EDTA・ヘパリン) および細胞培養上清を倍々希釈後、2重測定を実施し、直線性を確認した。
マウス血清
マウス血漿(EDTA)
マウス血漿(ヘパリン)
[結果]
いずれも測定範囲内で良好な直線性を示した。
添加回収試験
マウス血清/血漿 (EDTA・ヘパリン) に3濃度のスタンダードを添加し、2重測定を実施した。
マウス血清
| 添加量 (pg/mL) | 実測値 (pg/mL) | 回収量 (pg/mL) | 回収率 (%) |
|---|---|---|---|
| - | 4.47 | - | - |
| 18.0 | 22.5 | 18.0 | 100 |
| 72.0 | 72.7 | 68.2 | 94.7 |
| 180 | 176 | 172 | 95.6 |
| 平均 | 96.8 | ||
マウス血漿(EDTA)
| 添加量 (pg/mL) | 実測値 (pg/mL) | 回収量 (pg/mL) | 回収率 (%) |
|---|---|---|---|
| - | 5.04 | - | - |
| 15.0 | 18.7 | 13.7 | 91.3 |
| 55.0 | 61.0 | 56.0 | 102 |
| 150 | 148 | 143 | 95.3 |
| 平均 | 96.2 | ||
マウス血漿(ヘパリン)
| 添加量 (pg/mL) | 実測値 (pg/mL) | 回収量 (pg/mL) | 回収率 (%) |
|---|---|---|---|
| - | 4.78 | - | - |
| 15.0 | 18.7 | 13.9 | 92.7 |
| 55.0 | 60.3 | 55.5 | 101 |
| 150 | 154 | 149 | 99.3 |
| 平均 | 97.7 | ||
[結果]
いずれも良好な回収率であった。
検体測定例
本製品を用いて、マウス血清/血漿 (EDTA・ヘパリン) 検体を測定し、その検出有無を確認した。
マウス血清
| ID＼n | 本製品 (pg/mL) | 他社製品 (pg/mL) |
|---|---|---|
| 6 | 5.10 | ND |
| 7 | 3.72 | ND |
| 8 | 4.49 | ND |
| 9 | 3.84 | ND |
| 10 | 4.20 | ND |
マウス血漿(EDTA)
| ID＼n | 本製品 (pg/mL) | 他社製品 (pg/mL) |
|---|---|---|
| 6 | 3.20 | ND |
| 7 | 3.61 | ND |
| 8 | 3.66 | ND |
| 9 | 1.47* | ND |
| 10 | 5.04 | ND |
マウス血漿(ヘパリン)
| ID＼n | 本製品 (pg/mL) | 他社製品 (pg/mL) |
|---|---|---|
| 6 | 4.66 | ND |
| 7 | 3.39 | 3.56* |
| 8 | 4.24 | ND |
| 9 | 3.25 | ND |
| 10 | 2.77 | 4.08* |
ND:検量線下限値以下
*参考値
[結果]
本製品は、他社製品において検量線下限値を下回るような検体でも、TNF-αを測定することができた。
FAQ
検体について
- 血漿の抗凝固剤は何を使用すればよいでしょうか。
- 血漿採血時の抗凝固剤には、EDTAまたはヘパリンを使用してください。また血清分離剤や凝固促進剤等を使用する際は事前確認をしてください。
- 検体の保管と調製方法について教えてください。
- 検体を長期に保管する場合は、-35℃以下での凍結保管を推奨します。繰り返しの凍結融解は避けてください。凍結した検体は測定する直前に解凍し充分に攪拌してください。また、検体を希釈する場合は用時調製とし、あらかじめ試験管 (PP、PE) 等を用いて緩衝液で希釈し測定ウェルに分注してください。
なお検体は定法に従い採血、分離したマウス血清および血漿を使用してください。
キットの使用について
- 本製品で測定する際に必要な器具、装置を教えてください。
- 本製品の使用には以下の器具、装置が必要です。
- 精製水 (蒸留水)
- 試験管
- 洗浄液希釈用器具
- チップ交換型ピペット (50 μLおよび100 μL～1000 μLを正確に採取できるもの)
- 連続分注ピペット
- ペーパータオル等 (洗浄時に使用)
- 攪拌器 (Vortexタイプ)
- プレート振とう器 (約600 rpm～1200 rpm)
- プレート用洗浄機 (あれば好ましい) または噴射ビン
- プレートリーダー (450 nm±10 nm/620 nm:600 nm～650 nm)
- データ計算用ソフトウェア
- 標準品はどのように使用すればよいでしょうか。
- 本製品はロットにより添加する精製水の量が異なります。標準品に本製品ページ中の「標準品原液の調製について」で確認した量の精製水を加え溶解し、標準品原液 (7 ng/mL) を調製してください。その後室温化されたキット添付の緩衝液で調製してください。
- 各試薬の調製後の保管方法を教えてください。
- 【緩衝液、TMB溶液】
必要量より少し多めの量を別の容器に移し、残りは室温に戻さないで直ちに蓋をしっかりと閉め、2℃～10℃で保存してください。 - 【反応停⽌液】
室温化後そのままの状態で使⽤できますが、使⽤残りを保存する場合は、蓋をしっかりと閉め、2℃〜10℃で保存してください。 - 【標準品、ビオチン結合抗体】
精製⽔を加え溶液化した標準品およびビオチン結合抗体原液は2℃〜10℃で保存し、2週間以内に使⽤してください。緩衝液で希釈調製した各溶液は直ちに使⽤し、保存はしないでください。 - 【ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン溶液】
キットを分割して使⽤する際は希釈時に冷蔵庫より取り出し希釈調製し、残りの原液は室温に戻さないで直ちに蓋をしっかりと閉め、2℃〜10℃で保存してください。使⽤残りの希釈済み液は廃棄してください。
- 【緩衝液、TMB溶液】
物性情報
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
製造元情報
別名一覧
- 634-44721（旧コード）
AKMTNFA-011（旧コード）
【本サイト掲載情報について】
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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