ジーンエース SYBR® qPCR ミックスα No ROX
GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX
- 製造元 :
- (株)ニッポンジーン
- 保存条件 :
- 冷凍 (ドライアイス輸送)
- 構造式
- ラベル
- 荷姿
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比較
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製品コード
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容量
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価格
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在庫
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300反応用
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20以上 |
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ドキュメント
- スペクトルデータ
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- 検査成績書
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- 校正証明書
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製品概要
GeneAce SYBR® qPCR Mix αシリーズは、リアルタイムPCR用サーマルサイクラー(プレートタイプ)に対応したSYBR® Green検出系のリアルタイムPCR用マスターミックス(2x濃度)です。
試薬が小分け分注されており、操作性に優れています。化学的な修飾を施されたホットスタートPCR用の耐熱性ポリメラーゼ「Hot-Start GeneTaq NT」と最適化されたバッファーにより、非特異的増幅を抑制し、広範囲の鋳型濃度に対し精度の高い分析ができます。
特長
- 非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度のPCRを実現
- 幅広い増幅鎖長(600 bp以下)に対するPCR増幅効率が向上
- ホットスタートPCR用酵素の採用により、特異性の高いPCRが可能
- プレミックスタイプの試薬が小分け分注済みで操作が簡便
アプリケーションデータ
プラスミドpUC19 DNAを鋳型とし、本製品の推奨PCR サイクル条件にて増幅鎖長120 bpのリアルタイムPCRを行い、他社製品と増幅効率を比較した。
また、融解曲線を描いて非特異的産物の有無を確認した。
実験例1 LightCycler® 96を用いた増幅試験
| Template 定量PCR 試薬 PCR volume サンプル数 装置 Ramp rate PCR condition |
：プラスミドpUC19 DNA(NTC, 0.1fg, 1fg, 10fg, 100fg, 1pg) ：GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX ：25 μL ：n=3 ：LightCycler® 96 ：4.4°C/sec. ：95°C 10分→（95°C 30秒→60°C 60秒） x 45サイクル |
GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROXは、鋳型DNA量が少ない場合でもバラツキが少なく、安定した低いCt値を示した。また、融解曲線解析では、それぞれの鋳型DNA量の増幅産物で、同じTm値の1本のピークが得られ、他社製品と比較し高い特異性が示された。
本製品は、非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度のPCRが可能であることが示された。
対応機種一覧と注意事項
GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX
| 構成品 | 300反応用 | 60反応用 | 形状 |
|---|---|---|---|
| 2 x GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX | 1.5 mL x 5本 | 1.5 mL x 1本 | Hot-Start GeneTaq NT, Mg2+, dNTP Mixture, SYBR® Green Ⅰ, stabilizers |
| 対象機種：LightCycler® 96/480/Nano, Rotor-Gene® 2000/3000/6000/Q, Thermal Cycler Dice®, Smart Cycler® I/II, CFX96 Touch™, iCycler iQ®, iQ5, MyiQ®, DNA Engine Opticon® 1/2, Chromo4, Mini Opticon®, Quantica® |
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注意事項
本製品は、化学修飾を施したホットスタートPCR酵素を採用しているため、酵素の活性化ステップ(95°C 10分)をPCR条件通り行わないと十分な酵素活性が得られず増幅効率が低下します。
本製品は、リアルタイムPCR用サーマルサイクラーでのランモード「Fast」の標準プロトコル(95°C 20秒 → (95°C 3秒 → 60°C 30秒) x サイクル)には対応しておりません。
本製品には、dUTPは含まれていないため、Uracil-N-Glycosylaseによるキャリーオーバー防止処理はできません。
SYBR® は、Life Technologies社の商標です。
FAQ
基礎編
- すべてのリアルタイムPCR装置で使用可能ですか？
- プレートタイプの装置に対応しております。一方、ガラスキャピラリータイプの装置（Roche社LightCycler® 1.x , LightCycler® 2.0）には対応しておりません。
- 使用期限は？
- -20℃保存で製造後2年間を使用期限とし、4°C保存の場合は約１ヶ月間の保存が可能です。
- 反応容量のスケールダウンは可能か？
- 推奨容量は25～50μlですが、装置に対応した反応容量に合わせてスケールダウンしていただくも可能です。
- 凍結融解による活性への影響はありますか？
- 凍結融解による活性への影響は認められておりません。弊社では40回凍結融解を繰り返しても、活性の低下は確認されませんでした。
トラブルシューティング編
- 増幅の立ち上がりが遅い。
- １）本品は化学修飾したホットスタートPCR酵素を用いています。そのため、酵素の活性化ステップ（95°C 10分）を条件通り行わないと十分な酵素活性が得られず増幅効率が低下します。
２）推奨PCRサイクル条件であることをご確認ください。
３）ABI リアルタイムPCR装置のランモード「Fast」における標準プロトコール（95°C 20秒→（95°C 3秒→60°C 30秒） x 40サイクル）には対応しておりません。ただし、増幅鎖長が100bp前後の場合には以下のPCRサイクル条件にて使用することができます。 95°C 10分→（95°C 15秒→60°C 30秒） x 45サイクル
４）使用するプライマーは、増幅鎖長が600bp以下となるように設計してください。
- 融解曲線解析のTm値が他社試薬での値と異なっている。
- 試薬に含まれる塩濃度, pH等の試薬組成の違いによってTm値が変動します。
- マスターミックスに粘性や泡立ちがあり分注しにくい。
- ピペッティングをリバース法にて行うことで、粘性や泡立ちによる分注誤差を緩和できます。
概要・使用例
| 概要 | SYBR Green I 検出系 リアルタイムPCR用試薬 GeneAceSYBRRqPCR Mixα シリーズ 本シリーズは、SYBR Green I 検出系のリアルタイムPCR試薬です。化学的な修飾が施されたホットスタートPCR用酵素を採用しており、非特異的増幅を抑制し、広範囲の鋳型濃度に対し精度の高い分析ができます。 特 長 ■600 bp までの鎖長も効率よく増幅可能 ■非特異的増幅が起きやすい反応系でも、高い特異性を実現 ■様々な機器に最適化されたROX 濃度の試薬をラインアップ 製品構成 （300反応用：1.5 mL×5本） ・2× GeneAce SYBRR qPCR Mix α 対応機種 LightCycler? 96/480/Nano, Rotor-Gene? 2000/3000/6000/Q, Thermal Cycler Dice? , Smart Cycler? Ⅰ/Ⅱ, CFX96 TouchTM, iCycler iQ? , iQ5, MyiQ? , DNA Engine Opticon? 1/2, Chromo4, Mini Opticon? , Quantica? (Wako BioWindow JUN. 2019 / No.160, p29) |
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物性情報
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
製造元情報
別名一覧
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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