SCALEVIEW-S4 SCALEVIEW-S4

SCALEVIEW-S4は、透明化技術であるScale-S法に使用される試薬「SCALEVIEW-S Trial Kit」の構成試薬です。
SCALEVIEW-S Trial Kitの一工程で使用するだけでなく、SCALEVIEW-S4に浸漬するだけで、スフェロイドやオルガノイドを透明化することができる簡易プロトコル(オプション)もあります。

SCALEVIEW-S4によるスフェロイド/オルガノイドの簡易透明化プロトコル (オプション)

以下に示すのはSCALEVIEW-S4のみで透明化を行う手法です。操作が簡便である一方で、透明化の能力はSCALEVIEW-S Trial Kitよりやや劣る可能性があります。小サイズ(目安: 数百 μm厚)のスフェロイド/オルガノイドにてご検討ください。SCALEVIEW-S Trial Kitによるスフェロイド/オルガノイドの透明化はSCALEVIEWシリーズの製品概要ページをご覧ください。またスフェロイドが浮遊してしまう場合は、SCALEVIEW-S0とSCALEVIEW-A2の併用を推奨しています。

特長

• スフェロイドやオルガノイドの透明化が可能
• 透明化にかかる時間は約1日¹⁾
• 免疫染色/蛍光色素染色が可能

透明化が可能なサンプル

スフェロイド、オルガノイド、ニューロスフェア

試薬

• deScale Solution (コード No. 041-34425)
• パラホルムアルデヒド (コードNo. 160-16061)

器具・装置

• スフェロイド形成用プレート (スリットウェルプレートが便利です)
• 観察用プレート (底面がカバーガラスのものを推奨)
• SCALEVIEW-S4 透明化標本向け蛍光顕微鏡と推奨対物レンズ^※1
  ※1 屈折率(RI=1.49)に合った対物レンズをご用意ください。データ取得前にお手持ちの顕微鏡メーカーに確認することを推奨いたします。

プロトコル

固定	透明化	観察※2
4% PFA/PBS(-)	SCALEVIEW-S4	SCALEVIEW-S4
RT 1時間	37°C 4時間	RT

※2　1.5% (wt/vol) アガロースを用いて包埋し、不動化することで観察が容易になります。

SCALEVIEW-S4によるスフェロイドの簡易透明化プロトコル (イメージ)
CC BY 4.0に基づいて、文献1)より転載

以下に示すデータはSCALEVIEW-S4のみで透明化したものです。SCALEVIEW-S Trial Kitによるスフェロイド/オルガノイドの透明化はSCALEVIEWシリーズの製品概要ページをご覧ください。

スフェロイド

T47D細胞スフェロイドの透明化

核はHoechstを用いて染色。共焦点顕微鏡を用いてZスタックで、画像を取得。
CC BY 4.0に基づいて、文献1)より転載

T47D細胞 スフェロイドのノコダゾール処理後、ヒストンH3抗体を用いた測定例。
SCALEVIEW-S4 による透明化処理により、薬剤投与下のスフェロイド表面と内部への影響を観察することが可能。
CC BY 4.0に基づいて、文献1)より転載

オルガノイド

F-PDO^® (がん組織由来培養細胞)の透明化

RLUN14 (上皮内腺がん/細気管支肺胞上皮がん)

RLUN20 (コロイド腺がん)

F-PDO^®を用いた抗がん剤等の薬効評価解析の受託も承っています。詳細は、こちらをご確認ください。

1. Molly E. B. et al.: Sci. Rep., 8, 11135(2018).
   A high-throughput imaging and nuclear segmentation analysis protocol for cleared 3D culture models