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詳細情報
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CD9-Capture ヒトエクソソームELISAキット(ストレプトアビジンHRP) CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)

遺伝子研究用
for Genetic Research
製造元 :
富士フイルム和光純薬(株)
保存条件 :
冷蔵 (氷冷輸送)
適用法令 :
特化則第3類 安衛法57条・有害物表示対象物質 労57-2 優先評価物質
GHS :
使用論文 (2)
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SDS
比較
製品コード
容量
価格
在庫
販売元
296-83701
JAN
4548995084798
96回用
希望納入価格
100,000 円

18

ドキュメント

SDS
製品規格書
添付文書
スペクトルデータ
検査成績書
校正証明書

キットコンポーネント

96回用

Anti-CD9 Antibody-immobilized 96 Well Plate 8 well x 12 strips / 1枚
Plate Seal 4枚
Sample Reaction Buffer 50 mL x 1
Antibody Reaction Buffer 50 mL x 1
Washing Buffer (10x) 100 mL x 1
Control Biotinylated Antibody Anti-CD9 (100x) 120 μL x 1
HRP-conjugated Streptavidin (100x) 240 μL x 1
TMB Solution 12 mL x 1
Stop Solution 12 mL x 1

特長

データ

ヒト由来エクソソーム検出における特異性比較

2倍希釈した10%FBS (超遠心処理済み) 含有DMEM培地に各濃度のエクソソーム,COLO201細胞由来,精製品［製品コード：052-09301］を添加し、2種類のELISAキット付属のプレートに反応させ、ヒトとウシCD9に交差する抗CD9抗体 (Clone No. 1K) で検出した。

ヒト由来エクソソーム検出における特異性比較
検体

各濃度のCOLO201細胞由来精製エクソソーム/10%FBS含有DMEM培地 (2倍希釈品)

使用プレート

PS Capture Plate：PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)［製品コード：298-80601］
CD9-Capture Plate：CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)［製品コード：296-83701］

検出抗体

Anti CD9, Monoclonal Antibody(1K)［製品コード：014-27763］。ビオチン標識品

PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)ではウシ由来エクソソーム (超遠心処理したFBS中に残留) も捕捉する結果となった。CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) ではヒト由来エクソソームを特異的に捕捉し、高感度検出できることが示された。

COLO201細胞由来細胞外小胞の検出感度 参考データ

エクソソーム,COLO201細胞由来,精製品［製品コード：052-09301］を標準品に使用して標準曲線を作成し、その標準曲線を用いて本キットにおける検出限界値及び定量限界値を算出した。各濃度ポイントはn=6、Blankはn＝12で測定した。

COLO201細胞由来細胞外小胞の検出感度 参考データ

性能比較データ

他社ELISAキットとCD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)の性能を比較した。

表. 各ELISAキットの固相化及び検出抗体

固相化抗体 検出抗体
Wako CD9 CD9
Competitor A CD9 CD9
Competitor B CD9 CD9
Competitor C ― CD9
Competitor D Rab5b CD9

Competitor A・B・Cとの比較

■各濃度のCOLO201細胞由来精製エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較

[A社]
各濃度のCOLO201細胞由来精製エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：A社
[B社]
各濃度のCOLO201細胞由来精製エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：B社
[C社]
※PS-AffinityまたはC社製品で精製したエクソソームサンプル
各濃度のCOLO201細胞由来精製エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：C社

■段階希釈したヒト血清由来エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較

[A社]
段階希釈したヒト血清由来エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：A社
[B社]
段階希釈したヒト血清由来エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：B社

いずれも他社キットより和光キットの方が高いS/N比で測定できることが示された。

[C社]
※PS-AffinityまたはC社製品で精製したエクソソームサンプル
段階希釈したヒト血清由来エクソソームを各キットで測定し、S/N比を比較：C社

■希釈直線性の比較

C社のエクソソーム精製キットで精製したヒト血清由来エクソソームを各キットで測定し、希釈直線性を比較した。

希釈直線性の比較

C社キットでは希釈直線性が見られず、非特異反応している一方、和光キットでは良好な希釈直線性が得られた。

Competitor Dとの比較

■ヒト血清2種類をD社及び和光キットの抗体固相化プレート及び検出抗体（いずれも抗CD9抗体）で測定し、S/N比を比較

Serum①：Tennessee Blood Services Corp.
Serum②：ProteoGenex, Inc

Competitor Dとの比較

和光キットの抗体固相化プレート及び検出抗体を使用した方がD社よりも高いS/N比で測定できることが示された。

以上より、CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit（Streptavidin HRP）は、
他社ELISAキットと比較して高感度かつ特異的にCD9陽性エクソソームを検出できることが示された。

概要・使用例

概要 本キットは、細胞培養上清や体液検体中の細胞外小胞の定性解析及び定量解析に利用できる酵素免疫測定試薬です。エクソソーム表面マーカーの1つとして知られるCD9に対する抗体を固相化しており、CD9陽性細胞外小胞を特異的に捕捉できます。また、ビオチン標識抗体を一次抗体に、ストレプトアビジン,ペルオキシダーゼ結合を二次検出に用いることで、細胞培養上清や体液検体から細胞外小胞を高感度に検出することが可能です。
構成 Anti-CD9 Antibody-immobilized 96 Well Plate 1plate, Plate Seal 4sheets, Sample Reaction Buffer 50mL, Antibody Reaction Buffer 50mL, Washing Buffer (10×) 100mL, Control Biotinylated Antibody Anti CD9(100×) 120µL, HRP-conjugated Streptavidin(100×) 240µL, TMB Solution 12mL, Stop Solution 12mL
使用方法 (検体の準備)
・検体の希釈
検体は吸光度値（[450nmの吸光度値]ー[副波長620nmの吸光度値]）が0.2～2.5の範囲に入るようキット付属のSample Reaction Bufferで2倍以上に希釈してください。
ヒト血清及びヒトEDTA血漿の場合、2倍以上。ヒトヘパリン血漿の場合は5倍以上の希釈を推奨します (キット性能データ　4．参照)。
本測定を行う前に検体に最適な希釈率をご検討ください。

・マイクロベジクル・アポトーシス小胞の除去
CD9、CD63及びCD81はエクソソームのマーカーとされていますが、厳密にエクソソームをターゲットとしてELISAを行う場合、遠心分離による前処理を行ってエクソソーム以外の細胞外小胞を除去してください。

・遠心分離による前処理手順
血液検体 (Sample Reaction Bufferで希釈前)
　↓　10,000 x g、30min.、4℃
上清を回収
　↓
検体希釈へ

物性情報

「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。

製造元情報

別名一覧

  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
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    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
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