遊離脂肪酸(NEFA)測定キット

遊離脂肪酸(NEFA: Non-esterified Fatty AcidまたはFFA: Free Fatty Acid)とは、脂質(脂肪)を構成する脂肪酸のうち、体内でエネルギー源として利用される遊離状態(グリセリンとエステル結合していない)のものを指します。通常、脂肪酸はグリセリンと結合して中性脂肪(トリグリセリド、トリアシルグリセロール)として蓄積されますが、例えばエネルギーが不足する際には中性脂肪から脂肪酸に分解されます(図1)。この脂肪酸は水に溶けにくいため、アルブミンと結合した状態で血液中に存在しています。

遊離脂肪酸は、細胞膜の構成成分やエネルギー代謝に重要な役割を果たしています(図2)。筋肉や肝臓などの組織では、遊離脂肪酸がミトコンドリアでβ酸化されてアセチルCoAとなり、クエン酸回路を通じてエネルギーが産生されます。しかし、血液中の過剰な遊離脂肪酸は、末梢のインスリン抵抗性をもたらします。また、肝臓における取り込みが増大することで、非アルコール性脂肪肝疾患(NAFLD: non-alcoholic fatty liver disease)を引き起こし、血糖値が上昇することが知られています¹⁾。

血清中の遊離脂肪酸は、総脂肪酸の4-5%を占めており、末梢組織の重要なエネルギー源になっています³⁾。
ラボアッセイ^™ NEFA (FFA)は、トリンダー試薬を利用した酵素比色法(ACS・ACOD法)を採用しています。測定キットに含まれる酵素のはたらきにより、試料中の遊離脂肪酸をマイクロプレートで簡便に測定することができます。

ACS・ACOD法の原理

試料中の遊離脂肪酸はコエンザイムＡ(CoA)とアデノシン-5’-三リン酸二ナトリウム(ATP)の存在下で、アシル-CoAシンセターゼ(ACS)の作用により、アシル-CoA、AMP、およびピロリン酸(PPi)を生成します。生成したアシル-CoAは、アシル-CoAオキシダーゼ(ACOD)によって酸化され、同時に2,3-trans-エノイル-CoAと過酸化水素を生成します。生じた過酸化水素は、ペルオキシダーゼ(POD)の作用により4-アミノアンチピリンとMEHAを酸化縮合し、青紫色色素を生成します。この青紫色色素の吸光度を測定し、試料中の遊離脂肪酸濃度を求めます。

1. 石川耕, 横手幸太郎: 日本内科学会雑誌, 102(10), 2691(2013).
   脂肪組織機能異常とインスリン抵抗性
2. 兵庫県立大学 「脂肪の代謝とその調節」: https://www.sci.u-hyogo.ac.jp/life/molbio/KOKAI.pdf (2023年4月25日閲覧)
3. 奥村伸生, 戸塚実, 本田孝行, 矢冨裕 編: 「臨床検査法提要 第35版」, (金原出版) (2010).