エクソソーム実験のポジティブコントロールに
エクソソーム, COLO201細胞由来, 精製品
COLO201細胞由来の高純度精製エクソソームです。COLO201細胞の培養上清からPS affinity法(Tim4とホスファチジルセリンのアフィニティー)を用いて、エクソソームを単離しています。
特長
- 高純度
- 高い安定性
- 凍結乾燥していません
- CD9, CD63, CD81タンパク質陽性
仕様
- 性状：溶液
- 組成：エクソソーム, TBS, EDTA, ポリマー(安定化剤)
- エクソソーム濃度：10 μg/mL*
*CD63シグナル値から補正したタンパク質濃度
ウエスタンブロットによるエクソソーム表面マーカータンパク質の検出
本製品を10 ng/Laneとなるよう非還元SDS-PAGEを行い、エクソソーム表面マーカータンパク質であるCD9, CD63, CD81を抗体で検出した。
一次抗体
- 抗CD9, モノクローナル抗体(1K) (製品コード：014-27763)
- 抗CD63, モノクローナル抗体(3-13) (製品コード：012-27063)
- 抗CD81, モノクローナル抗体(17B1) (製品コード：011-27773)
二次抗体
- 抗マウスIgG, ペルオキシダーゼ標識
各エクソソーム表面マーカータンパク質で高レベルな発現を確認できた。
また、上記と同様の方法で本製品と他社5種類のエクソソームをサンプルに、CD63シグナルが検出されるか比較した。いずれも各メーカーの濃度表記で10 ng/Laneとなるようにアプライした。
レーンNo.
① 本製品
② 他社品1: A549細胞由来エクソソーム
③ 他社品2: HEK293細胞由来エクソソーム
④ 他社品3: A549細胞由来エクソソーム
⑤ 他社品4: COLO1細胞由来エクソソーム
⑥ 他社品5: HCT116細胞由来エクソソーム
一次抗体
抗CD63, モノクローナル抗体 (3-13) (製品コード：012-27063)
二次抗体
抗マウスIgG, ペルオキシダーゼ標識
本製品のみCD63シグナルを検出できた。
NanoSightを用いたエクソソーム粒子径の解析
NanoSightにより、本製品と他社製品それぞれの粒子径解析を行った。
本製品は粒子径が均一であった。
凍結・融解を繰り返したエクソソームの構造
電子顕微鏡により、-20℃での凍結と室温での融解を15回繰り返した本製品の構造を観察した。
凍結と融解を繰り返しても構造は保たれることを確認できた。
製品一覧
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