Wakopak® Wakosil® / Wakosil®-Ⅱ シリーズ (C4, C8)
Wakopak® Wakosil®シリーズは、球状多孔質シリカゲルをベースにした充てん剤を充てんしたWakopakシリーズの中で定番のHPLC用カラムです。Wakopak® Wakosil®-ⅡHG、RS、ARシリーズは、高純度シリカゲルをベースに高理論段数や水系溶離液への適用といった性能を加えた充てん剤を充てんしたHPLC用カラムです。Wakopak® Wakosil®-ⅡHG、RS、ARシリーズには、分析バリデーションへの支援として「シリカゲル基材自身の諸物性」、「化学修飾後の各種充てん剤特性」それぞれの規格値と実測値を記載し、規格内の再現性を保証した"Wakopak® Certificate of Analysis"を添付しています。 (分析バリデーションサポート)
Wakopak® シリーズの情報（充てん剤、粒子径、圧力、pH範囲等）
Wakopak® Wakosil®、Wakosil®-Ⅱシリーズの概要
Wakopak® Wakosil®シリーズの特長
- 球状シリカゲルをベースとした充てん剤の使用により、破砕状シリカゲルに比べ高い再現性。
- 3タイプのエンドキャッピング処理をしたシリーズをそれぞれラインアップ。(C18のみ)
Wakosil®-Ⅱシリーズの特長
- 金属含量の少ない高純度シリカゲルを使用。
- ユニークな特長をもつシリーズ(AR、HG、RS)をラインアップ。
- カラム再充填サービスに対応。
Wakosil® / Wakosil®-Ⅱシリーズの比較
| Wakosil®シリーズ | Wakosil®-Ⅱシリーズ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Wakosil® | Wakosil® C4-200 Wakosil® C18-200 |
Wakosil®-Ⅱ HG | Wakosil®-Ⅱ RS | Wakosil®-Ⅱ AR | |
| 特長 | 最も標準的なシリーズ | 低カーボン含有率 | 高理論段数 | 水系溶離液における高分離能 | 立体選択性、カラム耐久性 |
| 用途 | 一般的な分析 | 迅速分析 | Wakosil®-Ⅱ シリーズのファーストチョイス | 高範囲な極性をもつ化合物の分析 | ペプチド類や構造異性体の分析、酸性/塩基性溶離液を用いた分析 |
| 化学修飾 | C4、C8、C18 | C4、C18 | C18、C8 | C18、C8 | C18 |
| 粒子径 | C4: 5 μm C8: 5 μm C18: 5 μm、7 μm、10 μm |
C4: 5 μm C18: 5 μm、10 μm |
3 µm、5 μm | 3 µm、5 μm | 3 µm、5 μm |
| 一次修飾 | モノメリック | モノメリック | モノメリック | モノメリック | ポリメリック |
| 分析バリテーションサポート | × | × | 〇 | 〇 | 〇 |
| 分取用サイズ(Prepシリーズ) | × | × | 〇 | 〇 | 〇 |
| 再充填サービス | C4: × C8: 〇 C18: 〇 |
C4: × C18: 〇 |
〇 | 〇 | 〇 |
エンドキャッピング
シリカゲルのシラノール基とシリル化剤の反応は、立体障害等の影響を受けるため、一部シラノール基が残存することがあります。この残存シラノール基は、塩基性化合物のピークテーリングの原因となり、分離に影響を及ぼします。残存シラノール基を除くためにさらにシリル化を行うことをエンドキャッピングといいます。エンドキャッピングには主にトリメチルモノクロルシラン(TMS)等のシラン化合物が用いられます。
＜ODSカラムのエンドキャッピング例＞
高エンドキャップタイプ
当社独自の表面処理技術でエンドキャップ処理をしています。
これにより、酸性から塩基性の化合物において、優れたピーク形状と再現性が期待できます。
エンドキャップタイプ
エンドキャップ処理がされていますが、高エンドキャップタイプと比較するとわずかにシラノール基が残存しています。配糖体や医薬品など逆相分配とわずかなシラノールへの吸着を利用し、分離させる場合に有用です。低極性化合物には高エンドキャップタイプと同等な保持特性を示します。
ノンエンドキャップタイプ
エンドキャップ処理をしていないタイプです。エンドキャップタイプよりさらにシラノール基による吸着性があります。位置異性体や構造の類似している化合物の分離分析に有用です。
モノメリックとポリメリック
モノメリックはシリル化剤とシリカゲル上のシラノール基が１対１で結合している構造を指します。
ポリメリックは、シリカゲルをODS化する際、多官能シリル化剤同士が重合したり、１つのシリル化剤がシリカゲルと複数箇所結合することによって、高密度なオクタデシル層を形成した構造を指します。
＜モノメリック＞
＜ポリメリック＞
Wakopak® Wakosil® C4、C8、C18
Wakopak® Wakosil® シリーズの中で、最も標準的なシリーズです。
カラム情報
| シリカゲル | 球状シリカゲル |
|---|---|
| 平均粒子径 | C4: 5 μm C8: 5 μm C18: 5 μm、7 μm、10 μm |
| 比表面積 | 300 m2/g |
| 細孔径 | 12 nm |
| 細孔容量 | 1.0 mL/g |
| 化学結合基 | ブチル基(C4)、オクチル基(C8)、オクタデシル基(C18) |
| 一次修飾 | モノメリック |
| エンドキャップ処理 | 〇 |
| 炭素含有量 | C4: 8% C8: 12% C18: 20% |
| USPコード | C4: L26 C8: L7 C18: L1 |
| 推奨使用pH範囲 | 2-7.5 |
| 分析バリデーション | × |
| 再充填サービス | C4: × C8: 〇 C18: 〇 |
中性化合物の分析例
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Uracil | 4 | Biphenyl | 7 | Pyrene |
| 2 | Benzene | 5 | Phenanthrene | 8 | Chrysene |
| 3 | Naphthalene | 6 | Fluoranthene | 9 | Benzo[a]pyrene |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil® 5C4 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil® 5C8 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil® 5C18 4.6 mm x 150 mm |
| Colum temperature | ： | 25℃ |
| Eluent | ： | CH3CN/H2O (v/v)=60/40 (v/v) |
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. |
| Detection | ： | UV 254 nm |
Wakopak® Wakosil® C4-200、C18-200
Wakopak® Wakosil® C4-200、C18-200は、カーボン含有率が12％と低いため、保持時間を短縮でき、迅速分析を行うことが出来ます。
分離能はWakopak® Wakosil® C4、C18タイプとほぼ同等の値を示します。
Wakopak® Wakosil® 5C4-200は、分子量数万～10万程度のタンパク質の分析、分取で高い回収率を示します。
カラム情報
| シリカゲル | 球状シリカゲル |
|---|---|
| 平均粒子径 | C4: 5 μm C18: 5 μm、10 μm |
| 比表面積 | C4: 300 m2/g C18: 200 m2/g |
| 細孔径 | C4: 12 nm C18: 20 nm |
| 細孔容量 | 1.0 mL/g |
| 化学結合基 | ブチル基(C4)、オクタデシル基(C18) |
| 一次修飾 | モノメリック |
| エンドキャップ処理 | 〇 |
| 炭素含有量 | C4: 8% C18: 12% |
| USPコード | C4: L26 C18: L1 |
| 推奨使用pH範囲 | 2-7.5 |
| 分析バリデーション | × |
| 再充填サービス | 〇 |
タンパク質標準品の分析
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Ribonuclease (MW 14,000) | 3 | Lysozyme (MW 14,400) | 5 | Myoglobin (MW 18,500) |
| 2 | Insuline (MW 6,000) | 4 | BSA (MW 60,000) | 6 | Ovalbumin (MW 45,000) |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C4-200 4.6 mm x 150 mm | ||||||
| Colum temperature | ： | R.T. | ||||||
| Eluent | ： | A)CH3CN/0.1% TFA=20/80（v/v） B)CH3CN/0.1% TFA=60/40（v/v）
|
||||||
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. | ||||||
| Detection | ： | UV 220 nm |
Wakopak® Wakosil®-Ⅱ HG
当社カラム製品の中で最も高理論段数(カラムサイズ4.6 mm × 150 mmで15,000段程度)を持つ製品です。
高理論段数
カラム情報
| シリカゲル | 金属含量の少ない高純度シリカゲル |
|---|---|
| 平均粒子径 | C8: 5 μm C18: 3.0～3.7 μm、4.2～4.7 μm |
| 比表面積 | 280~320 m2/g |
| 細孔径 | 11～13 nm |
| 細孔容量 | 0.85~1.00 mL/g |
| 化学結合基 | オクチル基(C8)、オクタデシル基(ODS、C18) |
| 一次修飾 | モノメリック |
| エンドキャップ処理 | 〇 |
| 炭素含有量 | C8: 10% C18: 13.0～17.0% |
| USPコード | C8: L7 C18: L1 |
| 推奨使用pH範囲 | 2～7.5 |
| 分析バリテーションサポート | 〇 |
| 分取用サイズ(Prepシリーズ) | C8: × C18: 〇 |
| 再充填サービス | 〇 |
中性化合物の分析例
k‘=保持係数
As=アシンメトリー係数 (10% height)
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Uracil | 2 | Benzene | 3 | Naphthalene |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 HG 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C18 HG 4.6 mm x 150 mm |
| Colum temperature | ： | 35℃ |
| Eluent | ： | CH3CN/H2O (v/v)=60/40 (v/v) |
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. |
| Detection | ： | UV 254 nm |
芳香族炭化水素の分析例
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Uracil | 4 | Biphenyl | 7 | Pyrene |
| 2 | Benzene | 5 | Phenanthrene | 8 | Chrysene |
| 3 | Naphthalene | 6 | Fluoranthene |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 HG 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C18 HG 4.6 mm x 150 mm |
| Colum temperature | ： | 35℃ |
| Eluent | ： | CH3CN/H2O (v/v)=60/40 (v/v) |
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. |
| Detection | ： | UV 254 nm |
Wakopak® Wakosil®-ⅡRS
Wakopak® Wakosil®-Ⅱ RSは徹底的なエンドキャッピングを行っており、水系溶離液でも使用することができます。その為、広範囲な極性を有する混合試料、塩基性化合物もテーリングすることなく分析することができます。
また、比表面積が390～430 m2/gと大きく、高い保持能を示します。
徹底的なエンドキャッピング
広範囲な極性化合物の保持◎
カラム情報
| シリカゲル | 金属含量の少ない高純度シリカゲル |
|---|---|
| 平均粒子径 | C8: 3、5 μm C18: 3.0～3.7、4.2～4.7 μm |
| 比表面積 | C8: 400 m2/g C18: 390～430 m2/g |
| 細孔径 | C8: 10 nm (粒子径: 3 μm)、12 nm (粒子径: 5 μm) C18: 9.5~11.5 nm (粒子径: 3 μm)、11～13 nm (粒子径: 5 μm) |
| 細孔容量 | C8: 1.0 mL/g C18: 0.95~1.10 mL/g (粒子径: 3 μm)、1.15~1.30 mL/g (粒子径: 5 μm) |
| 化学結合基 | オクチル基(C8)、オクタデシル基(ODS、C18) |
| 一次修飾 | モノメリック |
| エンドキャップ処理 | 〇 |
| 炭素含有量 | C8: 10.0% C18: 16.0~18.5% |
| USPコード | C8: L7 C18: L1 |
| 推奨使用pH範囲 | 2.0～7.5 |
| 分析バリテーションサポート | 〇 |
| 分取用サイズ(Prepシリーズ) | C8: × C18: 〇 |
| 再充填サービス | 〇 |
三環系抗うつ薬の分析例
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Protriptyline Hydrochloride | 3 | Doxepin Hydrochloride | 5 | Amitriptyline Hydrochloride |
| 2 | Nortriptyline Hydrochloride | 4 | Imipramine Hydrochloride | 6 | Trimipramine Maleate |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 RS 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C18 RS 4.6 mm x 150 mm |
| Colum temperature | ： | 40℃ |
| Eluent | ： | CH3OH/20 mM KH2PO4, K2HPO4（pH6.5)=62/38（v/v） |
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. |
| Detection | ： | UV 254 nm |
水溶性ビタミンの分析
| Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 | Peak No. | 成分名 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | L(＋)-Ascorbic Acid（V. C） | 4 | Pyridoxine Hydrochloride(V. B1) | 7 | D-Biotin(B. H) |
| 2 | Nicotinic Acid | 5 | Thiamine(V. B1) | 8 | Riboflavin(V. B2) |
| 3 | Nicotinamide | 6 | Caffein |
Analysis condition
| Column | ： | Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 RS 4.6 mm x 150 mm Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C18 RS 4.6 mm x 150 mm |
| Colum temperature | ： | 40℃ |
| Eluent | ： | CH3CN/50 mM SHS※ in 0.1% H3HPO4=8/92（v/v） |
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min. |
| Detection | ： | UV 210 nm |
製品一覧
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Wakopak® Wakosil® 5C4
Wakopak® Wakosil® 5C4-200
Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 3C8RS
Wakopak® Wakosil® 5C8
Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 HG
Wakopak® Wakosil®-Ⅱ 5C8 RS
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