Wakopak® Wakosil® GP-N6
除タンパク・生体試料直接注入用カラム
血清などのタンパク質を多量に含む生体試料中の目的化合物をHPLCで分析する場合、時間と労力を要する除タンパク質操作が欠かせませんでした。 Wakopak® Wakosil® GP-N6はタンパク質を含む試料の 直接注入が可能なカラムです。
タンパク質などの高分子物質は修飾基の親水性構造によりカラムを素通りしますが、薬物などの比較的小さな分子は逆相分配作用などにより保持されます。
特長
- 生体試料の直接注入が可能
- 優れた耐久性
- 高回収率で再現性よく分析が可能
従来の前処理操作法との比較
カラムの耐久性評価
血中尿酸の分析
ヒト血清5 μL 注入分析を繰り返しました。500 回分析後においても尿酸のピーク形状、保持値にほとんど変化はなく、安定した結果を示します。
| 初回 ：R.T.-3.96 min., Press.23 kg/cm2 300回：R.T.-3.97 min., Press.27 kg/cm2 500回：R.T.-3.94 min., Press.33 kg/cm2 |
|
| Column Size Eluent Flow Rate Detection Sample Injection Volume Peak |
：4.6 mm x 150 mm ：CH3CN/0.2M Na2HPO4(pH 6.0)=2/98(v/v) ：0.5 mL/min. at R.T. ：UV 284 nm ：Human Serum ：5 μL ：1. Uric Acid |
直接分析例
| Column Eluent Flow Rate Detection Sample |
：Wakopak® Wakosil GP-N6(4.6 mm x 150 mm) ：CH3OH/0.1M Na2HPO4(pH 6.0)=10/90(v/v) ：1.0 mL/min. at 40℃ ：UV 254 nm ：1．Acetaminophen 5 μg/mL 2．Sulfamethoxazole 5 μg/mL 3．Ethenzamide 20 μg/mL 4．Salicylamide 25 μg/mL |
カラムスイッチング法
本製品は、生体試料前処理用カラムとして「カラムスイッチング分析」の前処理カラムとして使用できます。
血清中の薬物の分析例
| Column Eluent Flow Rate |
：Wakopak® Wakosil GP-N6(4.6 mm x 50 mm) ：CH3CN/0.2M NaH2PO4, Na2HPO4(pH 6.0)=2/98(v/v) ：1.0 mL/min. at 30℃ |
【Analytical conditions】
| Column Eluent Flow Rate Detection Column Switching Time Sample |
：Wakopak® Wakosil-Ⅱ 5C18 RS(4.6 mm x 150 mm) ：CH3CN/0.1M NaH2PO4, Na2HPO4(pH 6.0)=30/70(v/v) ：1.0 mL/min. at 30℃ ：UV 254 nm 0.032AUFS ：4.8-6 min. ：Human Serum 20μL 1．Phenobarbital 20 μg/mL 2．Carbamazepine 5 μg/mL 3．Phenytoin 40 μg/mL |
薬物の回収率
| 薬物名 | 血中濃度(μg/mL) | 回収率(%) | CV(%) |
|---|---|---|---|
| フェノバルビタール | 20 | 99.3 | 1.06 |
| カルバマゼピン | 5 | 96.5 | 1.12 |
| フェニトイン | 40 | 102.3 | 0.78 |
取り扱い注意事項
- 移動相のpHは2.5〜7.5の範囲でご使用ください。
- 移動相の有機溶媒濃度はタンパク質が変性しない濃度でご使用ください(アセトニトリルの場合、20％以下をお勧めします)。また、タンパク質を変性させる溶媒は使用しないでください。
- 試料は0.2 μmのフィルターを通してください。
- カラムフィルターの目詰まりを防ぐため、オートサンプラーとカラムの間に2 μm程度のラインフィルターを取り付けることをお勧めします。
- その他の取り扱いは逆相系カラムと同様に行ってください。
製品一覧
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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