EV-Perm(TM) エクソソーム膜透過処理用キット
EV-Perm(TM) Permeabilization Pretreatment Kit for Exosome Membrane
ドキュメント
キットコンポーネント
1キット
Reagent A (20×) | 500 μL |
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Reagent B (10×) | 5 mL |
Reagent C (100×) | 500 μL |
製品概要
EV-Perm™ エクソソーム膜透過処理用キットは、エクソソームをはじめとする細胞外小胞の膜透過性を向上させる試薬です。抗体などを用いてエクソソーム内部のタンパク質検出が可能になります。
※ 本試薬はPS Capture™ エクソソームELISAキットやPS Capture™ エクソソームフローサイトメトリーキットとご使用ください。また検出用抗体も別途ご用意ください。
特長
- キット付属の試薬(3種類)でエクソソームの膜透過性を向上
- ELISAキットやフローサイトメトリーキットとの併用で、エクソソーム内部のタンパク質を検出可能
- 精製エクソソームの他、細胞培養上清や体液サンプルにも対応
適用サンプル
- 精製したエクソソーム(細胞外小胞)
- 細胞培養上清
- 体液(血清・血漿)サンプル
原理
プロトコル
▼エクソソーム内部タンパク質の検出
EV-PermTM エクソソーム膜透過処理用キットとPS CaptureTM エクソソームELISAキット(ストレプトアビジンHRP) (製品コード 298-80601)を用いたエクソソーム内部タンパク質検出のプロトコルです。より詳細な手順は取扱説明書をご確認ください。
1. エクソソームの捕捉
①Exosome Capture 96 Well Plateの各ウェルを洗浄液(1×)で希釈する
②希釈した検体を各ウェルに分注する
③マイクロプレート振とう器を用いて2時間以上反応させる
④洗浄液(1×)で洗浄する
2. 膜透過性の向上
①透過処理液またはネガティブコントロール溶液をウェルに分注する
②マイクロプレート振とう器を用いて1時間反応させる
③洗浄液(1×)で洗浄する
3. 目的タンパク質の検出
3-1. 一次抗体反応
①目的タンパク質に対するビオチン標識抗体を各ウェルに分注する
②マイクロプレート振とう器を用いて1時間反応させる
③洗浄液(1×)で洗浄する
3-2. HRP-ストレプトアビジン反応
①<font="orange">標識ストレプトアビジン反応液(1×)を各ウェルに分注する
②マイクロプレート振とう器を用いて2時間反応させる
③洗浄液(1×)で洗浄する
3-3. 発色反応
①TMB Solutionを各ウェルに分注し、マイクロプレート振とう器を用いて約1分攪拌する
②30分間静置反応させる
③室温に戻したStop Solutionを添加する
④速やかに450 nmの吸光度と副波長620 nm (600-650 nm)の吸光度を測定する
PS CaptureTM エクソソームELISAキット(ストレプトアビジンHRP)の構成品
EV-PermTM エクソソーム膜透過処理用キットの構成品
データ
アプリケーションデータ
▼ELISAでの内部マーカー検出
HEK293T細胞培養上清から精製したエクソソーム内部のAlix、およびH4細胞培養上清から精製したエクソソーム内部のα-synucleinについて、本試薬で透過処理し、PS CaptureTM エクソソームELISAキット(ストレプトアビジンHRP)で検出した。
[結果] 透過処理によりエクソソーム内部のAlix、α-synucleinをELISAで検出できた。
▼フローサイトメトリーでの内部マーカー検出
HEK293T細胞培養上清から精製したエクソソーム内部のAlixおよびエクソソーム表面のCD63について、本試薬で透過処理し、PS CaptureTM エクソソームフローサイトメトリーキットを用いて検出した。
[結果] 透過処理によりエクソソーム内部のAlixをフローサイトメトリーで検出できることが示された。
概要・使用例
概要 | 本品はエクソソーム内部のタンパク質(抗原)検出を可能にする試薬です。エクソソーム膜の透過性を向上させることで、抗体がエクソソーム内部へアクセスできるようになります。 PS Capture™ Exosome ELISA KitやPS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kitと併せてご使用下さい。 |
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物性情報
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
製造元情報
別名一覧
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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