薬理試験: 安全性試験
3次元培養表皮モデルによる皮膚刺激性試験
富士フイルムでは、OECDテストガイドラインTG439に収載された皮膚刺激性を評価する試験を実施します。化学物質などで誘導される紅斑や浮腫などの皮膚刺激性は、角質層への刺激性物質の浸透と、それに引き続いて起こる角質下層の表皮細胞層への一連の炎症過程の結果です。培養表皮モデルを使用した皮膚刺激性試験は、細胞毒性を指標にすることにより、皮膚刺激性発症の初期過程である表皮細胞層の障害を検出する試験法です。
使用細胞：LabCyte EPI-MODEL24
試験方法
培養表皮表面上に試験サンプルを添加し、 15 分間曝露した後、 サンプルを除去して、さらに42時間培養後、3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide（MTT）の取り込み量を測定します。試験サンプルの皮膚刺激性は、このMTT量から算出した 細胞生存率に基づいて予測されます。
細胞生存率
MTT還元性のある試験物質の確認と、陽性/陰性判定
依頼化合物が、MTT還元性を有する化合物の場合、 MTT反応に影響をおよぼずかどうかの確認を実施する。
対照として、検体が入っていない0.5mL MTT培地を使用する。
| 細胞生存率 | |
|---|---|
| 非刺激性 | ＞50% |
| 刺激性 | ≤ 50% |
基本試験系
評価検体数
・ 1～5検体／1回 （要相談）
試験回数
・ 1回（要相談）
必要な化合物量
・ 液体：約0.5 mL
・ 固体：約0.5 g （要相談）
結果例
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