抗体関連サービス: モノクローナル抗体作製
腸骨リンパ節法によるモノクローナル抗体作製（マウス・ラット）
重井医学研究所の特許である「マウス腸骨リンパ節法」を標準使用して、モノクローナル抗体を作製するサービスです。初期段階から、担当研究員がお客様と密にコミュニケーションをとりながら進行してまいりますので、抗体産生ハイブリドーマの確立に際しては、お客様にも安心してご利用いただけます。
また、アイティーエムは、国内の抗体作製受託会社として、初めて公益財団法人ヒューマンサイエンス振興財団の動物実験実施施設認証を取得しており、動物実験委員会を設置した上で、適正な作業を実施しております。
特長
- マウス3匹もしくはラット2匹を使用して実施します。
- 免疫は1回を原則とし、尾根部注射で行います。
- 感作リンパ球は従来法（脾臓法）の約25倍のため、抗体産生ハイブリドーマが効率よく作製できます。
- 最短8週間でハイブリドーマを確立（納品）することができます。
- 安価なチャレンジコースを用意しております。
- 膜タンパクを認識する抗体作製に最適な「フローサイトメータースクリーニングコース」を用意しております。
各コースについて
| チャレンジコース | 標準コース | フローサイトメーター スクリーニングコース |
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|---|---|---|---|
| 内容 |
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| 対象 |
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チャレンジコースの流れと価格/納期
| ① 免疫：（最短 2 週間） | |
| ↓ ↓ ↓ |
尾根部へ免疫いたします。 ※ 免疫源がお客様から提供がなかった場合（キャリアタンパク質との結合等）の費用は別途ご請求申し上げます。 ※ 免疫中にマウスが死亡した場合は、お客様とご相談の上、対応いたします。 |
| ② 試血・抗体活性測定 | |
| ↓ ↓ ↓ ↓ |
免疫したマウスから試血し、得られた抗血清についてELISAによる抗体活性を測定いたします。 測定当日に、結果をご報告いたします。抗体活性の結果を踏まえ、細胞融合に移行するかをご相談いたします。 抗血清サンプルをお送りすることも可能でございますが、2日以内のご評価をお願い致します。 ※ オプションでのウェスタンブロット、免疫沈降、Cell-ELISA、フローサイトメーターによる評価も可能です。 |
| ③ 採血・リンパ節採取 | |
| ↓ ↓ |
抗体活性の測定結果を踏まえ、採血・リンパ節採取を行い、細胞融合を実施いたします。 リンパ節から得られたリンパ球は一時凍結保存も可能ですが、viabilityが低下して、融合効率に影響を与える可能性がございますのであらかじめご了承ください。 |
| ④ 納品・結果報告 | |
| ↓ ↓ ↓ ↓ |
作業報告書と、ご希望により血清サンプルを納品します。 注）特許上および経営上の理由により、採取した腸骨リンパ節由来のリンパ球および抗血清全てをお送りすることはできませんので、ご注意ください。 標準コースへの移行を前提とし、アイティーエム社での評価以外にお客様による評価を実施する場合に限り、必要量をお送りいたしております。 チャレンジコースは、あくまで「抗体作製の可能性」を検討するものであることを、ご理解願います。 |
| ⑤ 標準コースへの移行も可能 | |
| ↓ ↓ ↓ ↓ |
お客様のご希望により、引き続き標準コースへ移行し、細胞融合をすることが可能です。 結果のご報告から２ヶ月以内に標準コースへの移行有無をご連絡ください。 ※ 移行する場合、再度お見積もりをさせていただきます。 ※ スクリーニング用に追加抗原が必要になります。 |
| サービス内容 | 希望納入価格 | 納期 |
|---|---|---|
| チャレンジコース | 98,000円 | 最短2週間 |
■標準コースへの移行
| サービス内容 | 希望納入価格 |
|---|---|
| 細胞融合～二次スクリーニング | 552,000円 |
| クローニング～確立 | 650,000円 |
■オプション
| サービス内容 | 希望納入価格 |
|---|---|
| 1次スクリーニングでのウェルの追加（41ウェル以上選択） ※1ウェルあたり |
2,000円 |
| 2次スクリーニングで一時凍結保存（7ウェル以上選択） ※1ウェルあたり |
4,000円 |
| クローニングの追加（7クローン以上） ※1クローンあたり |
120,000円 |
| キャリアタンパク質との結合 | 78,000円 |
| ウェスタンブロットによる評価（15ウェルまで） | 100,000円 |
| 免疫沈降による評価（15ウェルまで） | 100,000円 |
| フローサイトメトリーによる評価（15ウェルまで） | 150,000円 |
※表記価格は2022年8月1日時点の価格です
標準コースの流れと価格/納期
| ① 免疫：（2 ～3 週間） | |
| ↓ ↓ ↓ |
尾根部へ免疫いたします（原則1回）。 ※免疫原がお客様から提供がなかった場合（キャリアタンパク質との結合等）の費用は別途ご請求申し上げます。 ※免疫中にマウスが死亡した場合は、お客様とご相談の上、対応いたします。 |
| ② リンパ節採取 | |
| ↓ ↓ |
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| ③ 細胞融合・HAT選択 | |
| ↓ ↓ |
採取したリンパ節を細胞融合し、96ウェルプレートを用いて培養します。 ※ 96ウェルプレートは通常4枚です。 |
| ④ 一次スクリーニング | |
| ↓ ↓ ↓ |
ELISAにより一次スクリーニングを行います。 ※ 免疫原以外のサンプルを用いてスクリーニングを行うことも可能です。ご相談ください。 ※ ELISAによるスクリーニングで陽性が得られなかった場合には、費用は請求いたしません。 |
| ⑤ 中間報告１ | |
| ↓ ↓ |
結果をお客様にご報告し、24ウェルマイクロプレートに移すウェルを選択していただきます（最大40ウェル）。 ※ 追加費用(2,000円/ウェル)で選択ウェル数を増やすことが可能です。 |
| ⑥ 二次スクリーニング | |
| ↓ ↓ ↓ |
ELISAにより二次スクリーニングを行います。 ※ 免疫原以外のサンプルを用いてスクリーニングを行うことも可能です。ご相談ください。 ※ オプションでのウェスタンブロット、免疫沈降、Cell-ELISA、フローサイトメーターによる評価も可能です。 |
| ⑦ 中間報告2 | |
| ↓ ↓ ↓ |
結果をお客様にご報告し、クローニングする陽性ウェルを選択していただきます（最大6ウェル）。 お客様でのスクリーニングをご希望される場合、培養上清をお送りすることも可能です。 この場合、細胞は凍結保存させていただきます。6ウェル以上は有償（4,000 円/ウェル）となります。 |
| ⑧ クローニング | |
| ↓ ↓ |
選択された陽性ウェルについて限界希釈法により単クローン化いたします。 ※ 追加費用でクローニング数を増やすことが可能です。 |
| ⑨ 中間報告3 | |
| ↓ | クローニング後の結果をご報告いたします。 |
| ⑩ 抗体産生ハイブリドーマ確立 | |
| ↓ | |
| ⑪ 中間報告4 | |
| ↓ | 確立できた抗体のlsotypeを測定し、その結果をご報告いたします。 |
| ⑫ 培養・凍結保存 | |
| ↓ | |
| ⑬ 納品（最短8週間） | |
| 確立されたハイブリドーマおよび培養上清サンプルと作業報告書を納品いたします。 アイティーエムより直送いたしますが、ご請求や支払い等は代理店が承ります。 ※ お客様スクリーニング期間により納期は変動いたしますので、予めご了承ください。 |
|
| サービス内容 | 希望納入価格 | 納期 |
|---|---|---|
| 標準コース | 1,300,000円 | 最短8週間 |
■オプション
| サービス内容 | 希望納入価格 |
|---|---|
| 1次スクリーニングでのウェルの追加（41ウェル以上選択） ※1ウェルあたり |
2,000円 |
| 2次スクリーニングで一時凍結保存（7ウェル以上選択） ※1ウェルあたり |
4,000円 |
| クローニングの追加（7クローン以上） ※1クローンあたり |
120,000円 |
| キャリアタンパク質との結合 | 78,000円 |
| ウェスタンブロットによる評価（15ウェルまで） | 100,000円 |
| 免疫沈降による評価（15ウェルまで） | 100,000円 |
| フローサイトメトリーによる評価（15ウェルまで） | 150,000円 |
※表記価格は2022年8月1日時点の価格です
フローサイトメータースクリーニングコースの流れと価格/納期
基本的な流れは標準コースと同様で、スクリーニングの全工程をフローサイトメーターで対応いたします。
■ ご提供いただくもの
- 外来性タンパク質を高発現させた細胞株（stable細胞）：1×106個程度（1バイアル分）
- mock細胞あるいは親株：上記と同程度
- 安定株と異なる細胞でターゲットを発現している細胞（もしお持ちであれば）：上記と同程度
・stable細胞が複数種ある場合には、お知らせください。
・お客様には、念のため遺伝子発現の確認を行っていただいております。
・細胞内タンパク質あるいは細胞外領域が極端に小さい場合には、免疫応答が低い（ない）ことがございます。 - 血清：500mL
- 培地添加剤及びその処方
- 基礎培地の情報（情報を元に作業実施元にて用意します）
- ELISA用リコンビナント：100μg程度
| サービス内容 | 希望納入価格 | 納期 |
|---|---|---|
| フローサイトメータースクリーニングコース | 1,980,000円 | 最短8週間 |
■オプション
| サービス内容 | 希望納入価格 |
|---|---|
| クローニングの追加（1ウェルにつき） | 150,000円 |
※表記価格は2020年4月1日時点の価格です
抗体作製実績
膜タンパク、核内/細胞内タンパク、病原体関係、糖鎖、低分子、分泌タンパク、抗イディオタイプ抗体,中和抗体等さまざまなターゲットで実績がございます。
※ターゲット詳細はお客様との秘密保持契約の関係上開示しかねますこと、予めご了承ください。
お見積り・ご注文について
よくある質問
腸骨リンパ節法について
- マウス腸骨リンパ節法は特許とありましたが
- はい、マウス腸骨リンパ節法を用いたモノクローナル抗体の作製は、日本において特許が成立しています。
【日本国特許（特許第4098796号）】
アイティーエムは特許取得者の重井医学研究所よりライセンスを受けていますので、腸骨リンパ節法を用いたハイブリドーマの確立、さらにその作製物を使用するにも、安心してご利用いただけます。
- 腸骨リンパ節法で抗体産生ハイブリドーマを作製するメリットは何ですか
- 腸骨リンパ節法は免疫後2 週間でリンパ節を採取し細胞融合いたしますので、従来法とは比較にならないほど短期間で抗体産生の有無を確認できます。
また、免疫が１回ですので必要な免疫原も少なくてすみます。さらに、感作リンパ球数の多いリンパ節を使用することでハイブリドーマが効率よく作製できます。
チャレンジコースについて
- 抗体作製が難しいと考えている抗原があるのですが
- 安価なチャレンジコースをご用意しております。マウス腸骨リンパ節法を用いて、細胞融合を行う前に必要な抗体が得られる可能性があるかを約1ヶ月で確認することができます。まずは、ご相談ください。
- チャレンジコースは、どのような抗原でも可能ですか
- 可溶性のタンパク質以外に、細胞での免疫も可能ですので、ご相談ください。
- チャレンジコースより標準コースへ移行した場合、費用はどうなるのでしょうか
- 総額で標準コースをご注文いただいた費用となります。詳細はご相談ください。
抗原について
- 抗原を持っていません
- ペプチド、タンパク等、特注合成で請けたまわります。まずはご相談ください。
- ペプチドはあるがキャリアタンパクと結合してないのですが
- キャリアタンパク質との結合（オプション）も行っております。詳細はご相談ください。
抗体作製について
- スクリーニングは自分で実施したいのですが。
- お客様でのスクリーニングがご希望でございましたら、二次スクリーニングの培養上清（約1 mL）をお送りいたしますので、ご相談ください。
- ELISA以外の方法でスクリーニングを行って欲しいのですが
- 標準コースではELISAでのスクリーニングとなりますが、オプションでウエスタンブロット・免疫沈降・cell ELISAをご用意しておりますので、ご利用ください。
- 抗原以外のサンプルでELISAスクリーニングを行なってほしい
- サンプルをご提供頂けましたら、スクリーニング工程に組み込みます。
- ハイブリドーマ樹立後、精製抗体も欲しいのですが
- はい、各種抗体精製いたしますので、まずはご相談ください。
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
- 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
- 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
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