Tocris　BromoCatch

自己標識タンパク質 (Self-labelling protein; SLP) タグの原理は、目的タンパク質 (POI) に融合して発現するタンパク質タグに特異的に結合する低分子リガンドとの結合によります。
一般的によく知られているタグは、目的遺伝子に融合することで細胞内でのタンパク質標識が可能ですが、タグのサイズにより適合性、反応性が低い等の問題があります。
一方、BromoCatchは13 kDa以下のブロモドメインを改変した求核性システインを導入し、求電子性リガンドと共有結合で結合する新規SLPプラットフォームです。選択的かつ迅速に共有結合で反応するため、生細胞、固定細胞、または細胞抽出液中のBromoCatch融合タンパク質を不可逆的に標識することが可能です。

特長

• 小分子量のため立体障害が少ない
• 選択的かつ迅速な共有結合
• さまざまなアプリケーションに適用可能：蛍光イメージング、アフィニティープルダウン、標的タンパク質分解、バイオコンジュゲーション、アッセイ系の開発

A. SLPの原理：目的タンパク質（POI）に融合されたタンパク質タグと、特異的かつ選択的に結合する低分子リガンドとの結合
B. SLPの比較：従来のタグとは異なり、BromoCatchは適合性や反応性の制約を受けることなく安定的に結合が可能

BromoCatch プラットフォームの導入効率化に向けて、BromoCatch融合タンパク質を哺乳類の細胞で発現するためにすぐにご使用いただけるプラスミドをご用意しています。これらの製品は、多様な細胞種における柔軟なクローニングと高発現に最適化されており、対象タンパク質へのN末端およびC末端融合の両方をサポートします。
各ベクターには、柔軟なglycin-serine linkers（GSL）と複数のクローニングサイトに挟まれたBromoCatchドメインが含まれているため、目的配列の挿入が可能です。アフィニティー精製用のN末端またはC末端Hisタグ付き／なしのオプション、および高発現／中程度発現用のCMVプロモーターまたはTKプロモーターをご選択いただけます。
また、ベクターは、多様な実験ワークフローに対応するためpuromycinまたはhygromycin B選択マーカー付きでご提供いたします。