Tocris Janelia Fluor Dye
抗生物質耐性を引き起こすテトラサイクリンリプレッサータンパク質(緑)の拡散写像と、ヒストンH2B(紫)の超解像顕微鏡画像の重ね合わせ画像
Courtesy of www.janelia.org/archive/janelia-fluor-dyes
Janelia Fluorは、ハワード・ヒューズ医療研究所(Howard Hughes Medical Institute、HHMI)ジャネリア・リサーチキャンパス(Janelia Research Campus)のLuke Lavis研究室で開発された蛍光色素です。
本製品は、明るく、光安定性に優れた細胞透過性のテトラメチルローダミンベースの蛍光色素です。NHSエステル体で供給されるため、第一級アミンへの結合が可能であり、各種タグシステムに使用できます。また、共焦点蛍光イメージングや生細胞及び固定細胞のdSTORMのような超解像顕微鏡(SRM)技術に適しています。
特長
- 明るく、光安定性に優れている
- 細胞透過性
- ローダミンがベースである
- NHSエステル体のため、第一級アミンへ結合可能
- 一部の色素は、他の反応基の製品もラインアップ
- 光活性化可能な誘導体(PA Janelia Fluor)もラインアップ
Janelia Fluor, SE
NHSエステル体として供給されるため、第一級アミンに結合させることができます。HaloTag、SNAP-tagといったタグシステムに使用できます。
※HaloTagは、Promega Corporationの商標または登録商標です。
SNAP-tagは、New England BioLabs, Inc.の商標または登録商標です。
| JF 525 | JF 549 | JF 585 | JF 635 | JF 646 | JF 669 | |
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| メーカーコード | # 6296 | # 6147 | # 6418 | # 6419 | # 6148 | # 6420 |
| 蛍光色 | 緑/黄 | 黄 | オレンジ | 赤 | 赤 | 深赤 |
| 輝度 |  |
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| 推奨レーザーライン(nm) | 488 | 532/561 | 561 | 640 | 640 | 640 |
| 励起波長(nm) | 525 | 549 | 585 | 635 | 646 | 669 |
| 蛍光波長(nm) | 549 | 571 | 609 | 652 | 664 | 682 |
| 吸光係数 (M-1cm-1) | 122,000 | 101,000 | 156,000 | 167,000 | 152,000 | 116,000 |
| 量子収率 | 0.91 | 0.88 | 0.78 | 0.56 | 0.54 | 0.37 |
| 反応基 |
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| アプリケーション |
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光活性型蛍光色素 PA Janelia Fluor, SE
365 nmの光照射で活性化されるまでは蛍光を示さない、光活性型蛍光色素です。NHSエステル体として供給されるため、第一級アミンに結合させることができます。HaloTag、SNAP-tagといったタグシステムに使用できます。
PA Janelia Fluor 549, SEとPA Janelia Fluor 646, SEを併用した場合、405 nmで活性化することにより、生細胞で二色sptPALMを行うことができます。
※HaloTagは、Promega Corporationの商標または登録商標です。
SNAP-tagは、New England BioLabs, Inc.の商標または登録商標です。
| PA JF 549 | PA JF 646 | |
|---|---|---|
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| メーカーコード | # 6149 | # 6150 |
| 励起波長(nm) | 551 - 553 | 649 - 651 |
| 蛍光波長(nm) | 570 - 573 | 663 - 665 |
使用例
心臓組織におけるJanelia Fluor 549. SE使用例
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図１ 
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図２ 
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図３ 
図1. ブタ心臓の筋組織における広視野蛍光画像
心筋細胞間の間質腔におけるコラーゲンⅥ分布を示す。コラーゲンⅥに対する一次抗体で反応後、JF 549で標識した二次抗体を反応させた。
スケールバー：50 μm
図2. SERCA2ATPaseに対する抗体で標識したブタ心臓組織片(10 μm厚)
筋小胞体の複雑な構造を示している。
(上) JF 549の自発的な光スイッチングを利用して得られた超解像画像(dSTORM)。回折限界広視野画像(下)と比べ、より優れて細部を示している。
スケールバー：200 nm
図3. 単離されたα-アクチン染色Wistarラット心筋細胞
筋節の端に局在する周期的な構造を示している(Z-discs)。
(左) 光スイッチングを誘導するための561nm照射前のJF 549の広視野蛍光画像。
(右) dSTORM超解像画像。
スケールバー：1 μm
All images kindly provided by Prof. Christian Soeller, University of Exeter; acquired by Alex Clowsley and Anna Meletiou.
心臓組織におけるJanelia Fluor 646, SE使用例
ブタ心臓左心室筋組織の超解像画像(dSTORM)。細胞原形質膜に存在するコラーゲンⅥをJF646で標識し、励起波長642 nmでイメージングした。広視野画像(右上)と比べ、より鮮明な構造を得られた。
スケールバー：2 μm
Image kindly provided by Prof. Christian Soeller, University of Exeter; acquired by Alex Clowsley and Anna Meletiou.
ミトコンドリアにおけるJanelia Fluor 635, SE使用例
抗TOM20抗体を一次抗体としてミトコンドリアを標識し、JF 635を結合した二次抗体で検出した。
左: 最大値投影法によるZスタック画像(オリンパスFV1200共焦点顕微鏡)
右: 拡大画像
Images kindly provided by Dr Kirstin Elgass, Monash University
チューブリンにおけるJanelia Fluor 669, SE使用例
抗α-チューブリン抗体を一次抗体として微小管を標識し、JF 669を結合した二次抗体で検出した。
左: 最大値投影法によるZスタック画像(オリンパスFV1200共焦点顕微鏡、レーザーライン: 638 nm)
右: 拡大画像
Images kindly provided by Dr Kirstin Elgass, Monash University
参考文献
- Grimm, J. B. et al. : Nat. Methods, 14, 987 (2017). [JF 525] [JF 585] [JF 635] [JF 669]
- Grimm, J. B. et al. : Nat. Methods, 12, 244 (2015). [JF 549] [JF 646]
- Deng, W. et al. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 112, 11870 (2015). [JF 549] [JF 646]
- Knight, S. C. et al. : Science, 350, 823 (2015). [JF 549]
- Legant, W. R. et al. : Nat. Methods, 13, 359 (2016). [JF 549]
- Schmidt, J. C. et al. : Cell, 166, 1188 (2016). [JF 646]
- Li, L. et al. : Elife, 5, e17056 (2016). [JF 646]
- Ticau, S. et al. : Cell, 161, 513 (2015). [JF 646]
- Hong, S. W. et al. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 106, 14276 (2009). [JF 646]
使用上のご注意
本製品は光感受性です。光を避けて保存ください。
ライセンスについて
本製品は、Tocris社がHoward Hughes Medical Institute, Janelia Research Campusよりライセンスを受けて販売しています。
製品一覧
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Janelia Fluor, SE
Janelia Fluor, Azide
Janelia Fluor, free acid
Janelia Fluor, Maleimide
PA Janelia Fluor, SE
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