速い・簡単・高純度!前処理に最適!

DNA/RNA 用 逆相系固相抽出カラム 「Presep® DNA/RNA Type A」

Presep® DNA/RNA は核酸の分離・精製に適した固相抽出用カラムです。Type A は、シリカベースの分離剤を注射筒型のシリンジに充てんしたミニカラムで、逆相系の固相抽出にお使いいただけます。

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特長

  • 高いサンプルロード量を実現
    市販されている前処理カラムと比較して 3~5 倍量 のサンプルロードが可能
  • 優れた脱保護効率
  • 高純度かつ高回収率の精製が可能

製品写真

仕様

No. 品名 基材 カートリッジタイプ シリンジサイズ 合成スケール
Presep® DNA/RNA Type A (85 mg / 1 mL) Silica gel Syringe 5.5 φ × 57 mm 0.2-0.5 μmol
Presep® DNA/RNA Type A (255 mg / 3 mL) Silica gel Syringe 9.0 φ × 63 mm 1-1.5 μmol
Presep® DNA/RNA Type A (1.0 g / 15 mL) Silica gel Syringe 15 φ × 87 mm 4-6 μmol
Presep® DNA/RNA Type A (1.7 g / 25 mL) Silica gel Syringe 21 φ × 85 mm 6-10 μmol
Presep® DNA/RNA Type A (5.1 g / 70 mL) Silica gel Syringe 27 φ × 134 mm 20-30 μmol

【動画解説】 Presep® DNA/RNA タイプ A の使用方法

固相抽出カラムを使用した合成オリゴヌクレオチドの抽出方法を解説したオリジナル動画です。

00:15
必要な試薬類
01:47
サンプル調製
03:09
コンディショニング
04:48
サンプルロード
06:14
脱保護
07:31
溶出

使用上の注意点

Presep® DNA/RNAは、カラムの出口側を減圧・吸引する吸引方式でお使いください。自然落下方式は不向きです。多検体の取り扱いには、吸引マニホールドを使うと便利です。

固相抽出条件(推奨)

① Presep® DNA/RNA Type A (85 mg / 1 mL)

Steps Materials Amount Used
Conditioning Acetonitrile 1 mL
100 mg/mL NaCl aq. 1 mL × 2
Sample Load Sample solution 0.5 mL + 100 mg/mL NaCl aq. 0.5 mL 1mL
Washing 1 Acetonitrile/100 mg/mL NaCl aq.=5/95(v/v) 1 mL × 2
Deprotection 2% DCA*1 aq. (DCA/Water=2/98(v/v)) 1 mL
Washing 2 RNase Free Water 1 mL × 2
Elution 0.5% NH4OH in Acetonitrile/Water=50/50(v/v)*2 1 mL

② Presep® DNA/RNA Type A (255 mg / 3 mL)

Steps Materials Amount Used
Conditioning Acetonitrile 3 mL
100 mg/mL NaCl aq. 3 mL × 2
Sample Load Sample solution 1 mL + 100 mg/mL NaCl aq. 1 mL 2 mL
Washing 1 Acetonitrile/100 mg/mL NaCl aq.=5/95(v/v) 3 mL × 2
Deprotection 2% DCA*1 aq. (DCA/Water=2/98(v/v)) 3 mL
Washing 2 RNase Free Water 3 mL × 2
Elution 0.5% NH4OH in Acetonitrile/Water=50/50(v/v)*2 3 mL

③ Presep® DNA/RNA Type A (1.0 g / 15 mL)

Steps Materials Amount Used
Conditioning Acetonitrile 12 mL
100 mg/mL NaCl aq. 12 mL × 2
Sample Load Sample solution 5 mL + 100 mg/mL NaCl aq. 5 mL 10 mL
Washing 1 Acetonitrile/100 mg/mL NaCl aq.=5/95(v/v) 12 mL × 2
Deprotection 2% DCA*1 aq. (DCA/Water=2/98(v/v)) 12 mL
Washing 2 RNase Free Water 12 mL × 2
Elution 0.5% NH4OH in Acetonitrile/Water=50/50(v/v)*2 12 mL

④ Presep® DNA/RNA Type A (1.7 g / 25 mL)

Steps Materials Amount Used
Conditioning Acetonitrile 20 mL
100 mg/mL NaCl aq. 20 mL × 2
Sample Load Sample solution 10 mL + 100 mg/mL NaCl aq. 10 mL 20 mL
Washing 1 Acetonitrile/100 mg/mL NaCl aq.=5/95(v/v) 20 mL × 2
Deprotection 2% DCA*1 aq. (DCA/Water=2/98(v/v)) 20 mL
Washing 2 RNase Free Water 20 mL × 2
Elution 0.5% NH4OH in Acetonitrile/Water=50/50(v/v)*2 20 mL

➄ Presep® DNA/RNA Type A (5.1 mg / 70 mL)

Steps Materials Amount Used
Conditioning Acetonitrile 60 mL
100 mg/mL NaCl aq. 60 mL × 2
Sample Load Sample solution 20 mL + 100 mg/mL NaCl aq. 20 mL 40 mL
Washing 1 Acetonitrile/100 mg/mL NaCl aq.=5/95(v/v) 60 mL × 2
Deprotection 2% DCA*1 aq. (DCA/Water=2/98(v/v)) 60 mL
Washing 2 RNase Free Water 60 mL × 2
Elution 0.5% NH4OH in Acetonitrile/Water=50/50(v/v)*2 60 mL
*1 DCA = Dichloroacetic Acid
*2 Add 50 µL of 28% ammonium hydroxide per 10 mL of 50% acetonitrile in water.

分離能比較

1. オリゴ核酸の回収率(Recovery)

Sample of Cartridge Column

Wako
(Presep® DNA/RNA Type A)
Competitor A Competitor B Competitor C
Particle Support Silica gel Silica gel Polymer Polymer

Sample of Oligonucleotide

Sample Name Length Linkage Structure
Sample 1 14 mer PO
Sample 2 21 mer PO
Sample 3 21 mer PS
Sample 4 50 mer PO

Cartridge Column vs Recovery of oligonucleotide [%]

Presep® DNA/RNA Type A は
高回収率 を実現!
Wako ≒ B > A > C
  • 各社推奨のプロトコルでオリゴ核酸のサンプルを精製
  • オリゴ核酸の濃度は吸光度測定器で計測
  • 回収率は「溶出液のオリゴ核酸濃度 / ロード前のオリゴ核酸濃度」で算出

2. オリゴ核酸の許容負荷量(Sample Capacity)

Sample Load vs Recovery of oligonucleotide [%]

Presep® DNA/RNA Type A は
高い担体保持力!

オリゴ核酸の担体に対する負荷量の比率 9.7 まで高めると、 他社品(A, B, C)の回収率が 65% を下回っているのに対して、 Wako 品は回収率 75% 以上を維持することを確認しています。

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溶出液

HPLC 用溶媒

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