アルブミン

マウスアルブミン、ラットアルブミンを定量的に測定するためのサンドイッチ酵素免疫測定法によるELISAキットです。

特長

• 短時間(全反応時間：2時間20分)で測定可能
• 測定範囲：50～1000 ng/mL (検量線範囲)
• 検体：マウス or ラットの血清・血漿または尿　5 μL/ウェル(希釈検体)
  
  • 血漿採血はヘパリン採血を推奨
  • 検体は付属の緩衝液を用いて測定範囲に入るように希釈
  • 正常検体の希釈目安は血清または血漿検体が1万～5万倍、尿検体が50～100倍です
• 微量な検体(標準操作法は5 μL)で測定可能
• 環境に優しい防腐剤を使用
• 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能
• 高い測定精度と再現性

キット構成

構成品	状態	容量
(A) 抗体固相化 96 ウェルプレート	洗浄後使用	96 wells (8 x 12) / 1 枚
(B) アルブミン標準溶液(マウス or ラット) (10 μg/mL)	希釈後使用	150 μL / 1 本
(C) 緩衝液	そのまま使用	60 mL / 1本
(D) ペルオキシダーゼ標識抗体	希釈後使用	100 µL / 1本
(F) 発色液 (TMB)	そのまま使用	12 mL / 1本
(H) 反応停止液 (1 M H2SO4) ※取扱注意	そのまま使用	12 mL / 1本
( I ) 濃縮洗浄液(10x)	希釈後使用	100 mL / 1本
プレートシール		3 枚
取扱説明書		1 部

• アルブミン-マウス交差性

  ※交差性は、10,000 ng/mL濃度時のデータ(FCSは除く)

  動物種	項目	交差性
  Rat	Albumin	5 %未満 (50 ng/mL未満)
  Human	Albumin	検出感度以下
  Porcine	Albumin	検出感度以下
  Bovine	Albumin	検出感度以下
  	10 % FCS	検出感度以下

• アルブミン-ラット交差性

  ※交差性は、10,000 ng/mL濃度時のデータ(FCSは除く)

  動物種	項目	交差性
  Mouse	Albumin	5 %未満 (50 ng/mL未満)
  Human	Albumin	検出感度以下
  Porcine	Albumin	検出感度以下
  Bovine	Albumin	検出感度以下
  	10 % FCS	検出感度以下

• 操作法(共通)

  抗体固相化96ウェルプレート
  　↓　洗浄3回^※
  緩衝液　50 µL
  　↓　攪拌^※※
  検体または希釈標準溶液　5 µL
  　↓　攪拌^※※、室温、1時間静置反応、洗浄3回^※
  ペルオキシダーゼ標識抗体　50 µL
  　↓　攪拌^※※、室温、1時間静置反応、洗浄3回^※
  発色液 (TMB)　50 µL
  　↓　攪拌^※※、室温、20分間静置反応
  反応停止液 (1M H₂SO₄)　50 µL
  　↓　攪拌^※※
  吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)
  室温：20～25 ℃

  ※洗浄液量目安：300 µL/well x 3回
  ※※攪拌目安：800 rpm-10秒間 x 3回

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バリデーションデータ

• アルブミン-マウス精度試験(アッセイ内変動)

  検体	A	B	C
  1	63.3	448	2318
  2	65.0	449	2272
  3	62.5	460	2318
  4	65.0	468	2254
  5	65.8	469	2355
  mean	64.3	459	2303
  SD	1.39	10.0	40.4
  CV (%)	2.17	2.18	1.75

  単位：ng/mL

• アルブミン-マウス再現性試験(アッセイ間変動)

  測定日 / 検体	D	E	F
  0日目	38.9	534	2812
  1日目	38.8	512	3022
  2日目	40.1	538	2799
  mean	39.3	528	2878
  SD	0.739	13.9	125
  CV (%)	1.88	2.62	4.35

  単位：ng/mL, n=3

• アルブミン-マウス添加回収試験

  検体G

  添加量	実測値	回収量	回収率(%)
  0	214	-	-
  175	379	165	94.3
  350	577	329	104
  620	840	626	101

  単位：ng/mL, n=3

• アルブミン-マウス希釈直線性試験

  2血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、直線回帰のR²は0.998でした。

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• アルブミン-ラット精度試験(アッセイ内変動)

  検体	H	I	J
  1	31.8	515	2911
  2	32.8	521	2957
  3	31.6	520	2812
  4	32.0	509	2844
  5	32.2	508	3052
  mean	32.1	515	2915
  SD	0.461	6.22	94.9
  CV (%)	1.44	1.21	3.25

  単位：ng/mL

• アルブミン-ラット再現性試験(アッセイ間変動)

  測定日 / 検体	K	L	M
  0日目	32.1	482	2942
  1日目	33.4	474	2915
  2日目	33.8	490	3010
  mean	33.1	482	2956
  SD	0.895	7.70	49.1
  CV (%)	2.71	1.60	1.66

  単位：ng/mL, n=3

• アルブミン-ラット添加回収試験

  検体N

  検体	添加量	実測値	回収量	回収率(%)
  1-1	0	194	-	-
  1-2	175	358	164	93.7
  1-3	350	539	345	98.6
  1-4	620	807	613	98.9
  1-5	740	900	706	95.4

  単位：ng/mL, n=3

• アルブミン-ラット希釈直線性試験

  2血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、直線回帰のR2は0.9951から0.9984でした。