蛍光タンパク質観察用・油浸レンズ対応マウント剤
Super Clear Mount
Super Clear Mount (RI:1.52)は、屈折率(RI)を浸漬オイル(RI:1.52)およびカバラーガラス(RI:1.52)と完全に同じに調整した製品です。従来のマウント剤と比較すると、深部での分解能が向上するため、より高解像な解析に使用することが可能です。また、油浸レンズで観察した場合、深部でも明るさが一定、分解能（特に z 分解能）が一定であり、超解像のアプリケーションにも使用することが可能です。
また、蛍光タンパク質の蛍光が非常に安定に保持される特長があります。組織透明化サンプルの観察用のマウンティング剤に限らず、細胞生物学用の組織切片サンプルのマウンティング剤として広くご使用ください。
データ提供元：国立研究開発法人理化学研究所 柯孟岑先生、今井猛先生（現九州大学医学研究院）
特長・原理・性能表
- 蛍光タンパク質の褪色防止に極めて優れたマウンティング剤
- 屈折率(RI)を1.52に調整しており、油浸レンズでの観察に最適
- 非組織透明化サンプルのマウンティング剤としても使用可能
| Super Clear Mount | |
|---|---|
| 封入後の硬化性 | 非硬化性*で、長期保存可能(最大1年) |
| 屈折率 | 1.52 |
| 対応するサンプルの厚さ | 0 ～ 200 µm |
| 蛍光タンパク質の褪色防止 | +++ ** |
| 保管温度 | 室温 |
| * | Super Clear Mount は非硬化性ですが、空気に接した箇所は硬化します。そのため、Super Clear Mount を多めに滴下することで余剰分でカバーガラス、サンプルおよびスライドガラスを硬化することが可能です。 |
| ** | 他市販品と比較した場合、+++ ：ベスト 。 |
特長 (深部高分解能、高輝度)
| (A) | 共焦点顕微鏡(pinhole size, 1AU)と油浸対物レンズ(100 ×:NA 1.40;WD 0.13 mm)を用いて蛍光マイクロスフェア(diameter, 100 nm)の PSF 解析 |
| (B) | lateral および axial FWHM（分解能）データ 深部にて高い分解能を維持します。 |
| (C) | ローダミン色素を用いた共焦点 axial scans データ 深部にて高い輝度を維持します。 |
蛍光タンパク質の褪色防止効果
広範囲のスペクトルにおいてシグナル保持および褪色防止効果を発揮
| (A) | 蛍光タンパク質(EGFP)光褪色曲線例 HEK293 細胞に蛍光タンパク質を発現させた後、Super Clear Mount、PBS、他社市販(蛍光タンパク質対応)でマウント。 水銀ランプで照射し続けながら蛍光輝度変化を測定した。対物レンズは 20×ドライ(NA 0.4)。照射開始時の蛍光輝度を 1 としている。 |
| (B) | 各蛍光タンパク質の蛍光輝度安定性 |
超解像度顕微鏡を用いたアプリケーション例
超解像度顕微鏡を用いて、深部超解像イメージングを実現
| (A) | 細胞膜からのフィロポディア伸展を超解像度顕微鏡を用いて観察 HEK293T 細胞の細胞膜に EGFP を発現させた後、核染色試薬、ミトコンドリア染色試薬を用いて観察。 細胞膜からのフィロポディア伸展を超解像顕微鏡で取得。 |
| (B) | ショウジョウバエ脳を超解像度顕微鏡を用いて観察 ショウジョウバエ脳のメダラ神経節にある神経細胞：Mi1 を蛍光タンパク質(GFP)で標識し、超解像度 j 観察(深さ約 100 µm)。 深部超解像イメージングを実現。 |
蛍光タンパク質の蛍光安定性
Data by Ke, M.T. et al. : Cell Reports, 14(11), 2718-32 (2016) / Adapted.
図5. Super Clear Mountを用いた蛍光タンパク質の蛍光安定性データ
Super Clear Mountはほとんど蛍光輝度が変化せず、光褪色も極めて起こりにくい。
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