SeeDB2 Trial Kit

透明化可能組織

マウス脳組織ブロック、ハエ全脳、オルガノイド/スフェロイド

SeeDB2 Trial Kit キット構成

1. SeeDB2G Solution　50 mL x 1本
2. SeeDB2S Solution　50 mL x 1本
3. PBS（-）　50 mL x 1本
4. Saponin　5 g x 1本

SeeDB2S：油浸レンズ用浸漬液の屈折率 (1.52) に合わせてあり、油浸レンズでの観察時にマウント剤として使用可能。高解像度イメージング向け。
SeeDB2G：グリセリン浸レンズ用浸漬液の屈折率 (1.46) に合わせてあり、グリセリン浸レンズでの観察時にマウント剤として使用可能。大きめの組織サンプル観察向け。

透明化に必要なもの (詳細は添付文書をご覧下さい)

試薬

1. SeeDB2 Trial Kit
2. パラホルムアルデヒド (製品コード：160-16061)
3. 1 x PBS (製品コード：164-25511)
4. レンズ浸漬液

器具

1. リングピンセットもしくは絵筆
2. チューブローテーター
3. 滅菌フィルター
4. ビブラトーム
5. 透明化サンプル観察容器 (See Through Chamber)
6. スライドガラスおよびカバーガラス (See Through Chamberを用いる場合は不要)
7. SeeDB2透明化標本向け蛍光顕微鏡^※と推奨対物レンズ^※※

※共焦点顕微鏡、2光子顕微鏡、超解像度顕微鏡
※※屈折率 (RI=1.46もしくは1.52) に合った対物レンズをご用意ください。データ取得前にお手持ちの顕微鏡メーカーに確認することを推奨いたします。

マウス脳0.5-2 mm厚スライスの場合

• Permeabilization Solution：2% saponinを含むPBS溶液
• Clearing Solution 1：20％ saponinを含む水溶液とSeeDB2Gを2:1の割合で混合したもの
• Clearing Solution 2：20% saponinを含む水溶液とSeeDB2Gを1:1の割合で混合したもの
• Clearing Solution３：2% saponinを含むSeeDB2G
• Clearing Solution 4：2% saponinを含むSeeDB2S

• 共焦点顕微鏡観察例
• 超解像度顕微鏡観察例
• 神経細胞の多色蛍光イメージング

マウス脳スライスの共焦点顕微鏡観察例

超解像度顕微鏡観察例

SeeDB2S/Super Clear Mount (製品コード：190-18661) を使用し透明化およびマウンティングしたものを超解像度顕微鏡で観察 (図3、4)。

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神経細胞の多色蛍光イメージング

1. Ke et al.,: Cell Reports 14, 2718(2016)
2. SeeDB Resources (https://sites.google.com/site/seedbresources/): updated information and technical TIPs from the authors.
3. Sakaguchi et al.,: eLife 7, e40350(2018).