抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA DyeTM 647結合
Anti Rabbit IgG, Goat, SPICA DyeTM 647 Conjugated
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比較
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製品コード
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容量
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価格
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在庫
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500μL
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19 |
ドキュメント
製品概要
抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 647結合はヤギ由来の抗ウサギIgG抗体に富士フイルムで開発した新規高耐光性蛍光色素であるSPICA Dye™ 647を標識した二次抗体です。従来の蛍光色素と比較して、光褪色しにくいことが特長です。免疫組織染色や免疫細胞染色に使用することができます。
抗体情報
| 抗体種 | ポリクローナル抗体 |
|---|---|
| 抗原 | ウサギ IgG |
| 免疫動物 | ヤギ |
| 組成 | PBS、0.05% アジ化ナトリウム |
| 標識 | SPICA Dye™ 647 |
| 交差性 | ウサギ |
| アプリケーション | 免疫組織染色 (凍結切片) 1:500-1,000 免疫細胞染色 1:500-1,000 |
励起波長・蛍光波長
SPICA Dye™ 647
プロトコル (例)
抗Iba1抗体および抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 647結合によるマウス脳凍結切片の免疫染色
- 1.灌流固定
- 0.1% くえん酸ナトリウムPBSによる脱血後、4%PFA灌流
- 2.後固定
- 4% PFA (24時間)
- 3.スクロース置換
- 30% スクロースPBS (4 ℃、一晩-2日程度)
- 4.凍結切片作製
- スクロース除去後、凍結包埋ブロックを作製し、クライオスタットによる30 μm厚スライス作製
- 5.ブロッキング
- 5% BSA、2% 正常ロバ血清、0.3% TritonX-100/PBS (室温、2時間)
- 6.一次抗体
- 抗Iba1, ウサギ (免疫細胞化学用) (コードNo. 019-19741) 1:1,000 (4 °C、一晩)
- 7.洗浄
- 0.3% TritonX-100/PBS (5分 x 3回)
- 8.二次抗体
- 抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 647結合 (本製品) 1:500、 0.3% TritonX-100/PBS (室温、2時間)
- 9.洗浄
- 0.3% TritonX-100/PBS (5分 x 3回)
- 10.封入
- マウント剤 (例: Invitrogen™ ProLong Glass)にて封入し、4 ℃、暗所保存
データ
性能データ
キセノン耐光試験機を用いた従来色素との耐光性評価
500Wキセノンランプとガラスフィルターを設置したXe耐光試験機を用いて、 SPICA Dye™ 647もしくはAlexa Fluor® 647を標識した抗ウサギIgG, ヤギ抗体 (Jackson ImmunoResearch社、コードNo. 566-71221) のPBS溶液に連続的にキセノン光を照射した。吸収極大ピークの吸光度変化をプロットし、両色素の耐光性比較を行った。
[結果]
SPICA Dye™ 647標識抗体は他社蛍光色素より高い耐光性を示した。
ワイドフィールド顕微鏡を用いた耐光性評価<データ提供> 国立研究開発法人理化学研究所脳神経科学研究センター 細胞機能探索技術研究チーム 宮脇先生
Photobleaching of near infrared fluorescent dyes for immunostaining Ki-67 in HeLa cells (widefield illumination).
(A) Representative images. Scale bar, 50 μm.
(B) Photobleaching curves.
(Alexa647_1-6); Goat anti-rabbit IgG (from Fuji*), Donkey anti-rabbit IgG (Jackson, 711-605-152), Goat anti-rabbit IgG (Thermo, A21244), Donkey anti-rabbit IgG (Thermo, A31573), Goat anti-rabit IgG (abcam, ab150083), Donkey anti-rabbit IgG (abcam, ab150075)
Microscope: IX83 P2ZF
Objective lens: UPLXAPO 40X/0.95 (NA=0.95) (Evident)
Ex/Em cube: Cy5-A-Basic (Semrock)
* Fuji: FUJIFILM Corp.
共焦点顕微鏡を用いた耐光性評価 <データ提供> 国立研究開発法人理化学研究所脳神経科学研究センター 細胞機能探索技術研究チーム 宮脇先生
Photobleaching of near infrared fluorescent dyes for immunostaining Ki-67 in HeLa cells by confocal microscopy.
(A) Representative images.
Microscope: FV1200 CLSM
Objective lens: XLFLUOR 4X/340 (NA=0.28)
Illumination: 635 nm laser (0.81 W/cm2)
Scan Speed: 4.0 ms/pixel
Zoom: x 4.0
(B) Photobleaching curves.
Microscope: FV3000 CLSM (Evident)
Objective lens: UPLSAPO 40X(NA=0.95) (Evident)
Illumination: 640 nm laser (3.24 W/cm2)
Scan Speed: 2.0 ms/pixel
Zoom: x 2
※ Alexa Fluor®はインビトロジェン株式会社の登録商標です。
FAQ
抗体について
- 抗体はどのように精製していますか。
- 本製品は抗血清を抗原アフィニティークロマトグラフィーにより精製しています。
- 抗体の濃度はどれくらいですか。
- 1.4-1.6 mg/mL (タンパク質濃度) です。実際の濃度は製品のラベルに記載しています。
概要・使用例
| 概要 | 二次抗体は汎用性が高く、免疫染色をはじめとするさまざまな検出システムで使用できます。抗ウサギIgG二次抗体は、ウサギIgGに対する特異性が特徴の親和性精製抗体であり、標的の検出や選別に有用です。 抗ウサギIgG、ヤギ、SPICA DyeTM 647結合体は、最適条件下でSPICA DyeTM 647蛍光色素と結合しています。本製品はポリクローナル抗体であり、1つの一次抗体に複数の二次抗体を結合させることができるため、シグナル増幅も期待できます。 SPICA DyeTM 647（Excititation/Emission＝651/670 nm）は、従来の蛍光色素に比べ耐光性に優れ、透過型や超解像顕微鏡などの実験にも有用です。 クラス：ヤギIgG 種交差性:ウサギ 実験適応：免疫細胞染色 1:500～1,000 免疫組織染色 1:500～1,000 |
|---|---|
| 使用例 | ＜マウス脳凍結切片の免疫染色例＞ 灌流固定 ：0.1%クエン酸ナトリウムPBSによる脱血後、4%PFA灌流 後固定 ：4%PFA（24時間） スクロース置換：30%スクロースPBS（4 ℃, 一晩～2日程度） 凍結切片作製 ：スクロース除去後、凍結包埋ブロックを作製し、クライオスタットによる30 μm厚スライス作製 ブロッキング ：5%BSA, 2%正常ロバ血清, 0.3% TritonX-100/PBS（RT, 2時間） 一次抗体 ：抗Iba1, ウサギ (免疫細胞化学用) 1：1,000（4 ℃, 一晩） 洗浄 ：0.3% TritonX-100/PBS（5分×3回） 二次抗体 ：Anti Rabbit IgG, Goat, SPICA DyeTM 647 Conjugated（1:500）, 0.3%TritonX-100/PBS（RT, 2時間） 洗浄 ：0.3% TritonX-100/PBS（5分×3回） 封入 ：Prolong Glass （4 ℃, 暗所保存） |
物性情報
| 外観 | 液体 |
|---|---|
| 濃度 | ラベルに記載 たん白濃度 : 1.4～1.6mg/mL |
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
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