抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA DyeTM 594結合 Anti Rabbit IgG, Goat, SPICA DyeTM 594 Conjugated

抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 594結合はヤギ由来の抗ウサギIgG抗体に富士フイルムで開発した新規高耐光性蛍光色素であるSPICA Dye™ 594を標識した二次抗体です。従来の蛍光色素と比較して、光褪色しにくいことが特長です。免疫組織染色や免疫細胞染色に使用することができます。

抗体情報

抗体種	ポリクローナル抗体
抗原	ウサギ IgG
免疫動物	ヤギ
組成	PBS、0.05% アジ化ナトリウム
標識	SPICA Dye™ 594
交差性	ウサギ
アプリケーション	免疫組織染色 (凍結切片)　1:500-1,000 免疫細胞染色　1:500-1,000

励起波長・蛍光波長

SPICA Dye™ 594

(Excitation=575 nm, Emission=611 nm)

プロトコル (例)

抗Iba1抗体および抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 594結合によるマウス脳凍結切片の免疫染色

1.灌流固定

0.1%くえん酸ナトリウムPBSによる脱血後、4%PFA灌流

2.後固定

4% PFA (24時間)

3.スクロース置換

30% スクロースPBS (4 ℃、一晩-2日程度)

4.凍結切片作製

スクロース除去後、凍結包埋ブロックを作製し、クライオスタットによる30 μm厚スライス作製

5.ブロッキング

5%BSA、2%正常ロバ血清、0.3% TritonX-100/PBS (室温、2時間)

6.一次抗体

抗Iba1, ウサギ (免疫細胞化学用) (コードNo. 019-19741) 1:1,000 (4 °C, 一晩)

7.洗浄

0.3% TritonX-100/PBS (5分 x 3回)

8.二次抗体

抗ウサギIgG, ヤギ, SPICA Dye™ 594結合 (本製品) 1:500、 0.3% TritonX-100/PBS (室温, 2時間)

9.洗浄

0.3% TritonX-100/PBS (5分 x 3回)

10.封入

マウント剤 (例: Invitrogen™ ProLong Glass) にて封入し、4 ℃、暗所保存

性能データ

キセノン耐光試験機を用いた従来色素との耐光性評価

500Wキセノンランプとガラスフィルターを設置したXe耐光試験機を用いて、 SPICA Dye™ 594もしくはAlexa Fluor^® 594を標識した抗ウサギIgG, ヤギ抗体 (Jackson ImmunoResearch社、コードNo. 566-71221) のPBS溶液に連続的にキセノン光を照射した。吸収極大ピークの吸光度変化をプロットし、両色素の耐光性比較を行った。

[結果]
SPICA Dye™ 594標識抗体は他社蛍光色素より高い耐光性を示した。