Biotium社 アポトーシス＆ネクローシス細胞染色キット
Biotium社のアポトーシス＆ネクローシス細胞測定キットはアポトーシス細胞(Apoptotic Cell)を緑色で、ネクローシス細胞(Necrotic Cell)を赤色で染色することができる製品です。緑色蛍光はFITCの他にBiotium社が独自に開発し、蛍光輝度と安定性が高い『CF®Dye』製品もラインアップしています。
アポトーシスとネクローシス
アポトーシスとネクローシスは細胞が死滅する際のプロセスの呼称です。
アポトーシス
遺伝的に制御された内部からの細胞分解です。アポトーシスの間、ホスファチジルセリン（PS)は細胞膜の外側に移動し、貪食細胞に認識されます。ヒトの抗凝固剤であるアネキシンV（Annexin V）はCa2+依存性のリン脂質結合タンパク質でPSに対して高い親和性を持っています。本製品ではFITCまたはBiotium社が開発した独自の蛍光物質である『CF®Dye 488A』を結合したAnnexin Vによりアポトーシス細胞を緑色蛍光で染色します。
ネクローシス
重度の細胞損害から生じる細胞分解です。細胞小器官と細胞膜の両方の完全性が失われることで細胞内容物が周囲の環境に放出されます。Ethidium homodimer III (EthD-III)は正電荷を強く帯びた核酸プローブであり、生細胞に対して膜浸透性はありませんが細胞膜が欠落している細胞を赤色蛍光で染色します。本製品に含まれるEthD-IIIはヨウ化プロピジウムやEthidium homodimer I (EthD-I)と比べてDNAに対する親和性が高く、蛍光量の収率も高いです。
製品概要
Biotium社『Apoptotic, Necrotic, Quantification Kit』はアポトーシス細胞とネクローシス細胞を蛍光顕微鏡で同時観察を可能にする製品です。アポトーシス細胞を緑、ネクローシス細胞を赤で染色します。
特長
- 同時にアポトーシス細胞とネクローシス細胞の染色が可能
- 一部の製品はHoechst 33342で全体細胞を青で染色可能
- 15-30分の操作時間
- ネクローシス細胞を検出するEthidium Homodimer IIIはPIやEthidium HomodimerⅠより高感度
構成品
| メーカーコード | 品名 | 蛍光検出 | バッファー | ||
|---|---|---|---|---|---|
| アポトーシス細胞（緑色） | ネクローシス細胞（赤色） | 全細胞（青色） | |||
| 30017 | Apoptosis and Necrosis Quantification Kit |
FITC-Annexin V （大腸菌由来ヒト組換え体） |
Ethidium Homodimer III | - | 5X Annexin Binding Buffer |
| 30018 | Apoptotic, Necrotic, and Healthy Cells Quantification Kit |
Hoechst33342 | |||
| 30065 | Apoptosis and Necrosis Quantitation Kit Plus |
CF®Dye488*1-Annexin V （大腸菌由来ヒト組換え体） |
- | ||
| 30066 | Apoptotic, Necrotic and Healthy Cells Quantitation Kit Plus |
Hoechst33342 | |||
*1 CF®Dyeの詳細はコチラ
各種プロトコル
データ例
Jurkat細胞でのアポトーシス細胞とネクローシス細胞の検出
Jurkat細胞に1µMスタウロスポリン(staurosporine)を4時間処理してアポトーシスを誘導した(右)。左はスタウロスポリン未処理。その後、Apoptotic, Necrotic and Healthy Cells Plus Kit(#30066)で染色した。
アポトーシス細胞は緑、ネクローシス細胞は青と赤の重なりでピンク色で染色された。
製品一覧
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Apoptosis and Necrosis Quantification Kit
Apoptosis and Necrosis Quantitation Kit Plus
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