同仁化学 pH センサーラベル化キット
pH センサーラベル化キット（A558）は、目的物質のエンドサイトーシスによる取り込みを可視化することができるオールインワンのキットです。
キットに同梱の NH2-Reactive AcidSensor （蛍光プローブ）は、分子内に活性エステル基を持ち、アミノ基を有する目的物質（タンパク質）と混合するだけで安定な共有結合を形成します。AcidSensor 標識体は 633 nm で励起可能であるため、緑色や赤色蛍光との多重染色ができます（図1）。
またAcidSensor 標識体は中性では蛍光をほとんど示さず、エンドサイトーシスによって取り込まれた細胞内で酸性化されると蛍光を発します（図2）。
- エンドサイトーシス検出色素：ECGreen （製品コード: E296）とは異なり、本キットは、細胞内に入る目的物質を染色します。
- 分子量が 50,000 以上で、反応性のアミノ基を有するサンプルへ標識することができます。
- 試料溶液中に標識対象以外の分子量 10,000 以上の物質が含まれる場合は、標識反応を阻害する恐れがあります。
- あらかじめ試料溶液を精製してご使用ください。
製品特長
初めてでも迷わない実験操作
本キットは、未反応の色素を除くために必要なフィルトレーションチューブを同梱しており、標識から精製操作までを行うことができます。※
また、取扱説明書に沿って実験していただくことで、初めての方でも容易にAcidSensor を標識することが可能です。
他社製品との比較
| メーカー | 同仁化学研究所 | T社 | C社 |
|---|---|---|---|
| 製品名 | AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay | A色素 | C色素 |
| 染色対象 | 抗体・タンパク質等 | 抗体やタンパク質等 | 抗体やタンパク質等 |
| 標識プロトコル | あり | なし | なし |
| 同梱品 | 色素、Buffer、精製用チューブ ※ 抗体やタンパク質は含まれません。 |
色素 | 色素 |
実験例
ラベル化 IgG の細胞内取り込みの経時観察
本キットを用いて染色した AcidSensor 標識マウス IgG と小社エンドサイトーシス検出色素（ メーカーコード : E296, ECGreen –Endocytosis Detection）をHeLa 細胞に添加し、10 分、20 分、180 分後のAcidSensor 標識体（紫）とエンドソーム膜を同時に観察しました。
その結果、AcidSensor 標識マウスIgG が経時的に細胞内に取り込まれ、その蛍光輝点がエンドソームと共局在していることから、IgG がエンドサイトーシス経路で細胞内に取り込まれたことが確認されました。
＜検出条件＞
緑：ECGreen
Ex = 405 nm, Em = 500-550 nm
紫：AcidSensor
Ex = 633 nm, Em = 650-700 nm
製品一覧
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