Genovis社 IgG糖転移キット「TransGLYCIT Remodeling」「TransGLYCIT Remodeling Afucosylated」
Genovis社は、抗体医薬研究用のバイオ医薬プロセス酵素SmartEnzymes™を開発・製造しているスウェーデン(ルンド)のメーカーで、モノクローナル抗体、ADCs(antibody drug conjugates)、Fc融合タンパク質、バイオシミラー等のバイオ医薬品の研究開発に使用できるユニークな酵素(プロテアーゼ、グリコシラーゼ)、試薬キットをラインアップしています。
TransGLYCIT Remodelingは、糖転移酵素を用いて3時間で特異的に最大1mgのIgGの糖鎖リモデリングを可能にするキットです。G0、G1、G2、またはG2S2を持つIgGを調製できる製品をラインアップしております。 TransGLYCIT Remodeling Afucosylatedでは、FucosEXO™16酵素を併用することで、コアフコースの有無に関わらずIgGを直接比較するための脱フコシル化抗体を調製できます。 治療用抗体の構造分析と機能分析に有用です。
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特長
- 約3時間でG0、G1、G2、またはG2S2のいずれかを持つIgGを調製
- 糖転移と同時にIgGを脱フコシル化(TransGLYCIT Remodeling Afucosylatedのみ)
- ヒト IgG1, IgG2, IgG4に使用可能
- 治療用抗体の構造分析と機能分析に有用
TransGLYCIT Remodelingによる糖転移のワークフロー
1. Deglycosylation(脱グリコシル化)
アガロースビーズに固相化されたGlycINATOR酵素がIgGのFc部位にあるN型糖鎖を加水分解します(コアGlcNAcが残ります)。
※TransGLYCIT Remodeling Afucosylatedでは、IgGの脱フコシル化もします。
2. Transglycosylation(糖転移)
TransINATOR酵素が、キットに添付された糖鎖(G0、G1、G2、またはG2S2)のコアGlcNAcへの結合を触媒します。
3. 精製
N型糖鎖リモデリング抗体を精製し、アフィニティークロマトグラフィーで過剰な試薬を除去します。
【TransGLYCIT Remodeling Afucosylatedの例】
キット内容
① Immobilized GlycINATOR (TransGLYCIT Remodeling) または Immobilized GlycINATOR & FucosEXO 16 (TransGLYCIT Remodeling Afucosylated)
② TransINATOR enzyme
③ Oxazoline glycoform (G0, G1, G2 または G2S2)
④ CaptureSelect™ spin column
使用例 ~G0糖鎖抗体の調製~
ネイティブIgGをTransGLYCIT Remodeling G0 (#T1-G0F-010)および、TransGLYCIT Remodeling Afucosylated G0 (#T1-G0A-010)を用いて調製し、逆相LC-MSで分析した。
TransGLYCIT Remodeling G0 により、IgGのFc部位の糖鎖がG0に置き換わった。また、TransGLYCIT Remodeling Afucosylated G0 ではG0への置き換えに加え、脱フコシル化した。
Q＆A
| Q. | TransGLYCIT RemodelingはすべてのヒトIgGサブクラスで機能しますか？ |
| A. | はい、糖転移反応はヒトIgGのすべてのサブクラスで起こります。 IgG2での反応はやや遅く、95％以上の糖転移にはより長いインキュベーション時間が必要になる場合があります。 |
| Q. | ネイティブIgGにFucosEXO16酵素を使用して、コアフコースを除去できますか？ |
| A. | いいえ、GlyclNATOR酵素を使用してFc糖鎖をトリミングする必要があります。 |
| Q. | GlycINATOR酵素の基質特異性は何ですか？ |
| A. | GlycINATOR酵素は、IgGの保存されたFc部位で複合体、ハイブリッド、および高マンノン型グリカンを加水分解するIgG特異的エンドグリコシダーゼです。 |
| Q. | TransGLYCIT Remodelingでどのような抗体で糖転移が可能ですか？ |
| A. | ヒトIgGです。 |
| Q. | TransGLYCIT Remodelingは糖タンパク質にも使用できますか？ |
| A. | いいえ、TransGLYCIT RemodelingはIgG特異的に作用します。 |
製品一覧
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TransGLYCIT Remodeling
TransGLYCIT Remodeling Afucosylated
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