SRV™ iPSC Vector

SRV™は染⾊体への挿⼊が無く細胞質で安定に発現

iPS細胞へのリプログラミング後、SRV™を短期間で消去することが可能

ヒト、マウスなど幅広い宿主域の細胞の分裂細胞・⾮分裂細胞に関わらず遺伝⼦を導⼊

ウイルスエンベロープ膜融合により、遺伝子導入操作が不要

単⼀RNA上に全ての転写因⼦が搭載され、⾼効率でのリプログラミングを実現

EGFP搭載で遺伝⼦導⼊の効率や消去の様⼦がすぐに判る

フィーダー細胞不要

遺伝⼦導⼊ステップはBSL2で扱うが、それ以降の過程はBSL1で扱うことが可能

SRV™は4個の初期遺伝子を搭載したベクターと6個の初期化遺伝子を搭載したベクターがあります。いずれ の製品においても、ひとつのベクター上にすべての初期化遺伝子が搭載されているため、細胞への目的遺伝 子の導入効率が高く、高い初期化効率を示します。

4個の初期化遺伝子を搭載（Oct3/4, KLF4, SOX2, c-MYC)
SRV™ iPSC-1 Vector : siRNA導⼊でベクター除去
SRV™ iPSC-2 Vector : 初期化に伴い⾃動的にベクター消去

6個の初期化遺伝子を搭載（Oct3/4, KLF4, SOX2, c-MYC, NANOG, LIN28)
SRV™ iPSC-3 Vector : siRNA導⼊でベクター除去
SRV™ iPSC-4 Vector : 初期化に伴い⾃動的にベクター消去

* 作製効率はときわバイオ社にて取得された、本製品の実験プロトコルを用いたFeeder-free条件下でのデータになります。
他の細胞をiPS細胞誘導の親細胞として用いる場合は、プロトコルの最適化を検討していただく必要があります。

使用文献

1. Masaya, T. et al. : Regenerative Therapy., 39-47 27 (2024)
2. Yoshiki, N. et al. : Regenerative Biomaterials., 9 rbac060 (2022)

SRV™ iPSC-1 Vector、iPSC-3 VectorはsiRNAの導入により任意のタイミングでステルス型RNAベクターを除去することができます。
下図はSRV™ iPSC-1 Vectorを使用して線維芽細胞からiPS細胞を誘導した実施例になります。遺伝子導入14日後にはEGFP陽性のコロニーが出現しています。siRNA導入後にはEGFP陽性コロニーが大幅に減少し、継代を繰り返すことによりEGFP陽性細胞はなくなる様子が確認できます。

SRV™ iPSC-2 Vector、iPSC-4 VectorはmiR-302の発現に応答してステルス型RNAベクターが自動的に消去されます。
下図はSRV™ iPSC-2 Vectorを使用して血球細胞（単球）からiPS細胞を誘導した実施例になります。2週間培養するとP1（Day16）でEGFPのシグナルが減少し、iPS細胞のクローンが出現します。そこから2回継代して約1カ月経過すると 、きれいなiPS細胞のクローンができてEGFPが完全にネガティブになります。ベクターは培地交換するだけで自動的に除去できます。

ニッポンジーンにて、SRV™消去用siRNA “siTB1”特注合成のご注文を承りす。“siTB1”をご希望の場合は、以下の専用フォームに必要事項をご記入いただき、オリゴオーダー専用アドレス：oligo-order@nippongene.comまでご送付ください。

siTB1合成サービス申請フォーム

SRV製品は、iPS アカデミアジャパン株式会社、FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. ならびにときわバイオ株式会社との間で締結されたiPS細胞技術に関する特許の⾮独占的なライセンス契約に基づき販売されています（製品により異なります）。お客様が製品の開発・販売あるいはサービスの提供等の営利目的でSRV製品を使用される場合には、別途iPSアカデミアジャパン株式会社、FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. およびときわバイオ株式会社とお客様との間で技術利用に関するライセンス契約を締結いただく必要がございます。なお、⾮営利団体による学術、教育目的での使用は営利目的とはみなされません。 詳細は下記連絡先までお問い合わせください。