動物を用いない皮膚感作性評価試験に

ADRA キット

ADRA(Amino acid Derivative Reactivity Assay)は、N-(2-(1-naphthyl)acetyl)-L-cysteine【NAC】と、α-N-(2-(1-naphthyl)acetyl)-L-lysine【NAL】を用いた、化学物質の皮膚感作性評価試験の動物実験代替試験法です。
本製品は、ADRA を簡便に実施できる試薬キットです。

原理

ADRAは被験物質とNAC、NALを25℃ で 24 時間反応させ、反応液中に残存するNACとNALそれぞれの濃度を定量し、皮膚感作性の有無を評価します。

キット構成

  • 試薬名 容量 梱包数
    NAC 10 mL用 2 本
    NAL 10 mL用 2 本
    NAC Buffer (pH 8.0)プレミックス 300 mL用 2 本
    NAL Buffer (pH 10.2)プレミックス 300 mL用 2 本
    0.01 mol/L EDTA溶液 1 mL 2 本

使用法

Buffer プレミックスを水で溶解し、調製した後、NAC・NAL を溶解し、96 well プレート上で被験化合物と24 時間反応させ、HPLC で分析します。

Buffer プレミックス、NAC、NAL は反応に必要な量が小分けされており、溶解するだけで ADRA に使用できます。

その他必要な試薬・器具

試薬

製品コード 製品名 規格 容量
204-02743 トリフルオロ酢酸 和光特級 25 mL
015-08633 アセトニトリル 高速液体クロマトグラフ用 3 L
217-01031 超純水 * 超微量分析用 1 L
016-00346 アセトン ** 試薬特級 500 mL
043-07216 ジメチルスルホキシド ** 試薬特級 500 mL

* 蒸留水またはそれ以上のグレードの水(ADRAでは金属含有量が少ない水をご使用ください。)
** 被験物質を水またはアセトニトリルに溶解する場合は使用しません。
※ 陽性対照化合物として、Phenylacetaldehyde (CAS RN® 122-78-1) が必要です。

器具類

  • 電子天秤…0.1 mgまで表示されるもの
  • マイクロピペット…2~10 µL、10~100 µL、100~1000 µLを分取できる 3 種類
  • 12連ピペット…50~150 µL分取可能なもの
  • HPLCシステム…流速 0.3 mL/min で送液可能な 96 well 用遮光オートサンプラー付き
  • UV検出器…フォトダイオードアレイ検出器(PDA検出器)または吸光度検出器(281 nm)
  • HPLCカラム…CAPCELL CORE C18 column (2.7 µm, 3.0 × 150 mm) [Catalog # 51112] または同等品
  • pH計…±0.01 pH単位まで読むことが可能で、校正用緩衝液付きであること
  • インキュベーター…25℃設定が可能なもの
  • 96 wellプレート
  • 500 mL ポリボトル
  • 試験管ミキサー
  • プレートシール…島津ジーエルシー レジスタントエンボスシール [Catalog # 568-RES001] または同等品(密封性、耐溶剤性の高いもの)
  • プレートシェイカー
  • プレート遠心機

※ ADRA に使用する容器や器具類(HPLC 構成部品を除く)はすべて PP または PE 製のディスポ―サブル品を使用してください。
 金属イオンが混入すると NAC が二量体化し、評価を正しく行うことができません。

製品一覧

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※本製品は、富士フイルム株式会社よりライセンスを受け製造・販売を行っています。
  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。