レビス® インスリン-マウス (Hタイプ) LBIS Mouse Insulin ELISA Kit (H-type)

本キットはマウス⾎清または⾎漿、培養上清、細胞抽出液中のインスリンを定量的に測定するためのサンドイッチELISAキットです。
Hタイプは高濃度検体の測定用のタイプで、培養液・抗インスリン血症検体等の測定に最適です。

特長

• 緩衝液に色（青色）がついており、分注済みウエルの確認が容易。
• 短時間（全反応時間：3時間）で測定可能。
• 微量な検体（標準操作法は 10 μL）で測定可能。
• 環境に優しい防腐剤を使用。
• 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。
• 高い測定精度と再現性。
• 簡便な操作で特別な前処理は不要

製品情報

■検体
マウスの血清・血漿・培養液

■標準曲線範囲
0.5～100 ng/mL

• 操作法

  抗体固相化96ウェルプレート
  　↓　
  洗浄 4 回　
  　↓　
  ビオチン結合抗インスリン抗体　　　　　　　　　100 µL
  　↓　
  攪拌
  　↓　
  検体または標準溶液　　　　　　　　　　　　　　10 μL
  　↓　
  攪拌、室温、2時間静置反応
  　↓　
  洗浄 4 回　
  　↓　
  ペルオキシダーゼ・アビジン結合物　　　　　　　100 μL
  　↓　
  攪拌、室温、30分間静置反応
  　↓　
  洗浄 4 回　
  　↓　
  発色液(TMB)　　　　　　　　　　　　　　　　　100 μL
  　↓　
  攪拌、室温、30 分間静置反応
  　↓　
  反応停止液(1M H₂SO₄) 　　　　　　　　　　　 　100 μL
  　↓　
  攪拌
  　↓　
  吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)
  　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　室温：20～25 ℃

• 標準曲線(例)

  

• 精度試験（アッセイ内変動）

  検体	A	B	C
  1	0.749	10.6	81.9
  2	0.749	10.7	80.9
  3	0.749	10.6	82.3
  4	0.711	10.8	82.9
  5	0.711	10.8	81.9
  mean	0.734	10.7	82.0
  SD	0.021	0.11	0.72
  CV(%)	2.8	1.0	0.88

  単位：ng/mL

• 再現性試験（アッセイ間変動）

  測定日/検体	F	G	H
  0日目	5.61	37.3	78.9
  1日目	5.85	37.9	77.9
  2日目	5.65	37.6	78.2
  mean	5.70	37.6	78.3
  SD	0.126	0.287	0.544
  CV(%)	2.2	0.8	0.7

  単位：ng/mL n=2

添加回収試験

• 検体 D

  添加量	実測値	回収量	回収率(%)
  0	1.10	−	−
  1.0	2.16	1.06	106
  2.5	3.60	2.50	100
  5.1	6.06	4.96	97.3

  単位：単位：ng/mL n=2

• 検体 E

  添加量	実測値	回収量	回収率(%)
  0	31.5	−	−
  20	51.5	20.0	100
  40	73.1	41.6	104
  60	95.1	63.6	106

  単位：ng/mL n=2