タンパク発現

昆虫細胞・バキュロウイルス発現系によるタンパク発現

富士フイルム和光純薬株式会社

富士フイルム和光純薬では昆虫細胞・バキュロウイルスによるタンパク質発現受託サービスを提供しています。少量培養から大量培養まで一定条件でのスケールアップが可能です。また、発現コンストラクトの作製から生産・精製まで、組換えタンパク発現に関わる全てのステップに対応可能です。日本国内で400件以上の発現の実績がございます。本技術は、米国プロテインサイエンス社(Protein Sciences Corporation : PSC)と業務提携・技術導入したものであり、AcNPVを用いた組換えタンパク質の発現受託サービスとなります。

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当社サービスの特長

  • タンパク質を高発現するexpresSF細胞を使用
    ※他の昆虫細胞も使用可能です。
  • 日本国内で400件以上の実績 (受託サービスとして300件以上)
  • まずはお試し簡易発現「Bac Xpress EZ」コースを用意 (195,000円、税別)
  • ベクター構築から生産・精製までトータルサポート (各ステップのみの受託も承ります)

まずはご相談ください。お客様とお打ち合わせの上、最適な試験計画を立案させていただきます。

過去の生産事例

  • ①発現成功率 (ウェスタンブロッティングによる発現確認)

    Protein Type Projects 成功率(%)
    分泌型タンパク質 (Secreted) 104/105 99.0
    膜タンパク質 (Trans-membrane) 66/67 98.5
    細胞内タンパク質 (Cytoplasmic) 62/62 100
    核タンパク質 (Nuclear) 28/29 96.6
    ウイルス由来タンパク質 (virus origin) 73/73 100
    その他/局在不明 (unknown location) 13/13 100
    Total success rate: 346/349 99.1

    Cell line: expresSF cell (Sf9 cell由来)
    発現確認方法: W.B.イムノスター® ゼータ、他

    ※2008年4月~2020年3月受託生産分

  • ②生産量と純度

    ※1step purification by His or FLAG tag system

バキュロウィルスとは?

バキュロウイルス(Baculovirus)は、昆虫を主な宿主として感染する核多角体病ウイルス(Nucleopolyhedrovirus:NPV)であり、増殖過程で感染細胞の核内にポリヘドリン(Polyhedrin,多角体)と呼ばれる結晶構造のタンパク質を形成します。ウイルスの増殖や複製に関与しないこのタンパク質は、細胞の総タンパク質の約50%を占めるほどに発現し、バキュロウイルスを包み込んで自然界から守る働きをします。このポリヘドリン遺伝子を発現する強力なプロモーターの下流に発現目的遺伝子を導入し、この組換えウイルスを昆虫細胞に感染させることでタンパク質を大量に発現させます。

バキュロウィルスによるタンパク発現システム

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  • 大量発現
    ポリヘドリン遺伝子を発現する強力なプロモーターの下流で目的 とするタンパク質を発現させるため、大量の発現タンパク質を得ることができます。
  • 無血清培養・CO2不要
    培養に血清およびCO2が不要なため取り扱いが容易です。また、 培養温度域は23~28℃と大腸菌やほ乳類細胞と比べると低温培養ができます。
  • タンパク質の翻訳後修飾
    糖鎖や脂肪酸の付加、りん酸化修飾を受け、天然型に近い、活性を保持したタンパク質が得られます。

BAC Xpress EZ(簡易発現コース)

昆虫細胞およびバキュロウイルスを用いた組換えタンパク質の簡易的な発現受託サービスです。 組換えタンパク質を2週間でお手元にお届けいたします。「低コストで発現チェックを行いたい方」にオススメのサービスです。

サービスの流れ

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納品物

培養上清、細胞ペレット、ウイルス液(コトランスフェクション液)、 試験報告書
注) 本サービスの納品物は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ法)」使用規制対象となりますので、ご使用に際しては規制に則し、適切にお取り扱いください。

発現例

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価格

サービス項目 希望納入価格(円) 納期
Bac Xpress EZ 195,000 2週間

■オプション

サービス項目 希望納入価格(円) 納期
発現ベクターの作製 100,000 3週間
人工遺伝子合成 45~/bp 2週間~

※お客様ご提供の遺伝子を使用する場合、希望納入価格:200,000円(税別)となります。

BAC Xpress (通常コース)

昆虫細胞およびバキュロウイルスを用いた組換えタンパク質を発現条件最適化から大量生産まで提供する網羅的サービスです。発現コンストラクトの作製からタンパク質の大量生産まで行います。

サービスの流れ

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納品物

培養上清、細胞ペレット、ウイルス液(コトランスフェクション液)、 試験報告書
注) 本サービスの納品物は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ法)」使用規制対象となりますので、ご使用に際しては規制に則し、適切にお取り扱いください。

価格

項目No. サービス項目 希望納入価格(円) 納期
1 プラークアッセイ 200,000 2週間
2 組換えウイルス液の増幅 200,000 2週間
3 タイター測定 150,000 2週間
4 感染用ウイルス液の作製 100,000 1週間
5 発現条件検討試験(6区) 350,000 2週間
発現条件検討試験(9区) 500,000 2週間
6 生産(1L) 150,000 1週間
生産(2L) 300,000 2週間
生産(5L) 600,000 2週間
生産(10L) 1000,000 3週間
7 発現確認 100,000 1週間
8 アフィニティー精製 400,000~ 2週間

お見積り・ご注文について

ご依頼方法

「事前調査表」に必要事項をご記入の上、当社販売代理店へお渡しいただくか、下記へご連絡ください。

依頼書

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  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。

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