プロインスリン ELISAキット

• 検量線範囲：0.156～10 pmol/mL(1.47～94.3 pg/mL)
  ※検体量 10 μLの時：0.78～50 pmol/mL(7.35～471.5 pg/mL)
• 反応時間：約5時間
• 微量な検体(標準操作法は10 μL)で測定可能
• 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能
• サンプル量：標準操作法で10 μL
• 測定波長：主波長450 nm, 副波長620 nm

(A) 抗体固相化ウエルプレート(そのまま使用)：60 wells(6×10)/1 枚
(B) 標準プロインスリン溶液(200 pmol/L)(希釈後使用)：100 μL/1 本
(C) 緩衝液(そのまま使用)： 60 mL/1 本
(D) ビオチン結合抗プロインスリン抗体(希釈後使用)：100 μL/1 本
(E) ペルオキシダーゼ・アビジン結合物(希釈後使用)：100 μL/1 本
(F) 発色液(TMB)(そのまま使用)：12 mL/1 本
(H) 反応停止液(1M H₂SO₄)(そのまま使用)：12 mL/1 本
(I) 濃縮洗浄液(10×)(希釈後使用)：100 mL/1 本
・プレートシール：4枚
・取扱説明書：1 枚

• 交差率は、1060 pmol/mL 濃度時
• ＋：交差反応性あり、　－：検出感度未満

• 操作法

  

• 標準曲線例

  

• ラット検体プロインスリン測定結果

  レビス^® プロインスリン-マウス／ラット 使用

  検体	mean	SD	N	備考
  GK, 16W, オス	3.13	1.47	8	血清, 2重測定
  CD(SD), 12W, メス	3.27	1.97	3	血清, 不断給餌, 2重測定

  単位：pmol/L　　　　　

• マウス検体プロインスリン測定結果

  レビス^® プロインスリン-マウス／ラット 使用

  

  マウス：BALB/c, メス, 8W, 5匹
  糖負荷：トレーランG50, 0.5 mg/g体重, 経口投与
  採血　：血清(pre,糖負荷後15 min, 30 min, 120 min)
  絶食　：12時間(pre)

• 精度試験(アッセイ内変動)

  検体	A	B
  1	4.76	0.550
  2	4.52	0.558
  3	4.81	0.545
  4	4.44	0.585
  5	4.65	0.559
  mean	4.63	0.559
  SD	0.159	0.015
  CV(％)	3.42	2.76

  単位：pmol/mL

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  測定日/検体	C	D	E
  0日目	5.02	1.26	0.626
  1日目	4.99	1.25	0.622
  2日目	5.12	1.26	0.616
  3日目	5.09	1.28	0.633
  mean	5.06	1.26	0.624
  SD	0.060	0.013	0.007
  CV(％)	1.19	1.00	1.14

  単位：pmol/mL n=2

添加回収試験

• 検体F

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	0.231	-	-
  0.206	0.432	0.201	97.6
  0.537	0.784	0.553	103
  1.59	1.70	1.47	92.5

  単位：pmol/mL n=2

• 検体G

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	5.85	-	-
  1.76	7.76	1.91	109
  2.64	8.49	2.65	100
  3.08	8.93	3.17	103

  単位：pmol/mL n=2

希釈直線性試験

2血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、直線回帰のR²は0.9990から0.9994でした。