ラボアッセイ (TM) トリグリセライド LabAssay (TM) Triglyceride

トリグリセライドは1分子のグリセロールに3分子の脂肪酸がエステル結合した中性脂肪です。血中にはトリグリセライド、コレステロール、りん脂質、遊離脂肪酸や脂溶性ビタミンが脂溶性物質として存在しています。

本製品はN-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム (DAOS) を利用した青色発色系の酵素法試薬です。マイクロプレート法により、マウス血清中のトリグリセライド量の測定に用いることができます。用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中のトリグリセライドの測定を行うこともできます。

キット性能

測定対象検体	ヒト 血清/血漿 マウス 血清/血漿 ラット 血清/血漿 イヌ 血清/血漿 ネコ 血清/血漿
検量線範囲	100-888 mg/dL
必要検体量	2 μL
測定時間	約10分
測定波長	600 nm (副波長 700 nm)

検量線例

測定原理

検体中のトリグリセライドは、リポプロテインリパーゼ (LPL) の作用によりグリセリンと脂肪酸に分解されます。生成したグリセリンは、ATP存在下でグリセロールキナーゼ (GK) の作用によりグリセロール-3- りん酸になります。生成したグリセロール-3-りん酸は、グリセロール-3-りん酸オキシダーゼ (GPO) の作用を受けて酸化され、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ (POD) の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンとを定量的に酸化縮合させ、青色の色素を生成させます。この青色色素の吸光度を測定することにより検体中のトリグリセライド濃度を求めます。

GPO・DAOS法を用いたトリグリセライドの測定原理

測定操作法

• 2波長測定の場合、主波長600 nm ／副波長700 nm。

同時再現性試験

本製品で各2濃度のヒト、マウス、ラットの血清について6重測定を実施し、精度を確認した。

[結果]
ヒト血清のCV(%)は、1.0-2.5%、マウス血清のCV(%)は、2.5-3.1%、ラット血清のCV(%)は、2.0-4.5%と良好であった。

日差再現性試験

本製品で各3濃度のヒト、マウス、ラットの血清について、4日間測定を実施し、精度を確認した。

[結果]
ヒト血清のCV(%)は、0.8-2.5%、マウス血清のCV(%)は、3.5-6.0%、ラット血清のCV(%)は、1.0-3.5%と良好であった。

希釈直線性試験

生理食塩水を用いて、ヒト、マウス、ラットの検体を倍々希釈後、2重測定を実施し、直線性を確認した。

[結果]
いずれも測定範囲内で良好な直線性を示した。

添加回収試験

ヒト、マウス、ラットの血清/血漿 (EDTA、ヘパリン) に4濃度のスタンダードを添加し、2重測定を実施した。

[結果]
いずれも良好な回収率であった。

検体測定例

1. YAMAMOTO, H. et al.: Japanese Journal of Medical Technology., 2, 65 (2015).
   Comparative analysis of the total glyceride measurement method with the glycerol-blanked triglyceride measurement method: Toward the global standardization of triglyceride measurement.