ホット スタート ジーン レッド ピーシーアール ミックス Hot-Start Gene RED PCR Mix

Hot-Start Gene RED PCR Mix は、従来品のGene RED PCR Mix Plusを抗体法によりホットスタート化した2 xプレミックスタイプのPCR試薬で、鋳型DNAとプライマーを加えるだけでPCRができます。

特長

2色のDye入りプレミックスタイプ試薬、シンプルでスピーディーな使用方法

プレミックスタイプ試薬ですので、鋳型とプライマーを加えるだけでPCRができます。色素と比重調整剤もプレミックスされているため、PCR後の反応液もそのままアガロースゲルにアプライ可能です。

Hot Start PCR法により非特異的増幅を抑制

最初の熱処理（94℃、2 min.）によって抗Taq抗体が変性するまで、ポリメラーゼ活性が抑制されます。

十分な増幅量を確保しつつ、幅広い実験に対応

高速PCR（伸長時間10秒/kb）にも対応できるようバッファー組成を最適化しています。比較的GCリッチな配列（69%程度）や長鎖（10kb）も増幅できます。

用途

• コロニーPCR
• インサート確認等のルーチンに
• 得られたPCR産物はTAクローニングに使用可能

https://www.nippongene.com/siyaku/product/pcr/hotstart-gene-red/hotstart-gene-red-pcr-mix.html

使用回数

包装単位は50 µl反応系で25 µl使用する場合の使用回数です。

Gene RED PCR Mix Plus （960回用）

構成品	容量	保存	備考
Hot-Start Gene RED PCR Mix （2X）	[1.2 ml x 2] x 10	-20°C	袋の中に、96回用の製品が10個入っています。

Hot-Start Gene RED PCR Mix （96回用）

構成品	容量	保存	備考
Hot-Start Gene RED PCR Mix （2X）	1.2 ml x 2	-20°C

使用例

反応液組成

Hot-Start Gene RED PCR Mix (2 x)	25 µl
Primer-forward （10 µM）	0.6 µl
Primer-reverse （10 µM）	0.6 µl
Template	10 pg - 100 ng
d.d.Water	up to 50 µl

λ-DNAを鋳型とした0.5-10 kbpフラグメント増幅の場合

PCR条件*1

94°C	2分
94°C	20秒	25サイクル
60°C	20秒
72°C	10秒/kbp （1 kbp未満は5秒）
72°C	7分

5 µl 電気泳動*1 PrimerのデザインやTemplate等により反応の至適条件が変わることがあります。

比較1 非特異増幅が生じやすいプライマーを用いたPCR

非特異増幅が生じやすいプライマーを用いて約600 bpの領域を増幅した。 アニーリング温度はそれぞれ65℃、68℃、69℃、72℃でPCRを行った。

従来品のGene RED PCR Mix Plusと比べて、本品を用いた場合、いずれのアニーリング温度でも非特異的な増幅が抑制された。

比較2 プライマーダイマーが生じやすいプライマーを用いたPCR

プライマーダイマーが生じやすいプライマーを用いて約6 kbpの領域を増幅した。 持ち込む鋳型DNA量をそれぞれ5 ng、1 ng、500 pgでPCRを行った。

従来品のGene RED PCR Mix Plus と比べて、本品を用いた場合、プライマーダイマーの形成が抑制され、目的領域の増幅が増大した。

https://www.nippongene.com/siyaku/product/pcr/hotstart-gene-red/hotstart-gene-red-pcr-mix.html