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S100A4研究に新たな選択肢

ペルセウスプロテオミクス　抗S100A4タンパク質抗体

ppmx ロゴ

S100A4は、細胞の運動性・浸潤・血管新生に関与するカルシウム結合タンパク質です。
炎症性サイトカインの産生や炎症性細胞の遊走にも関与すると考えられており、疾患研究・創薬研究で注目されています。疾患活動性や治療反応性を評価するバイオマーカーとしても検討されています。

特長

  • ウェスタンブロッティング (WB) および抗原固相ELISAで高い特異性
  • 極微量のS100A4も正確に測定できる高感度検出が可能

抗S100A4タンパク質抗体 一覧

【該当略語一覧】

Application：
EELISA WBWestern Blotting NWBNon-reducing Western Blotting
IHCImmunohistochemistry ChIPChromatin Immunoprecipitation Assay
SSuper Shift Assay IPImmunoPrecipitation
Host / Species cross reactivity：
HHuman MMouse RRat
Product No. Manufacturer No. Product Name Package size
635-63171 PP-2E10-0C Anti human S100A4 mouse monoclonal antibody / 2E10 100 μL
Antibody Information
Antigen S100A4 Subclass IgG1 Host M
Immunogen human S100A4 Species cross reactivity H Clone No. 2E10
Antigen synonyms - Application E / WB
Specificity 〇:human S100A4
×: human S100 family proteins (S100A1–A16,S100B, S100G, S100P, S100Z)
Date Sheet https://www.ppmx.com/Portals/0/images/business/products/antibody/SpecSeet_E/PP-2E10-0C_E.pdf
Reference -
Product No. Manufacturer No. Product Name Package size
632-63181 PP-2H4-0C HRP conjugated Anti human S100A4 mouse monoclonal antibody / 2H4 50μL
Antibody Information
Antigen S100A4 Subclass IgG1 Host M
Immunogen human S100A4 Species cross reactivity H Clone No. 2H4
Antigen synonyms - Application E
Specificity 〇:human S100A4
×: human S100 family proteins (S100A1–A16,S100B, S100G, S100P, S100Z)
Date Sheet https://www.ppmx.com/Portals/0/images/business/products/antibody/SpecSeet_E/PP-2H4-0C_E.pdf
Reference -

PP-2E10-0Cを固相抗体として使用したELISA汎用プロトコル

  1. 5 µg/mLになるようDPBSで希釈したPP-2E10-0Cを、100 µLずつ96ウェルプレートに分注
    1. 4℃で一晩静置
  2. プレートをPBSTで5回洗浄 (400 µL/well)
    1. ブロッキング溶液を200 µLずつ分注
    2. 室温で1時間以上静置
  3. プレートをPBSTで5回洗浄 (400 µL/well)
    1. 適宜TBSで希釈したS100A4抗原サンプルを100 µLずつプレートに分注
    2. 室温で750 rpm・1時間反応
  4. プレートをPBSTで5回洗浄 (400 µL/well)
    1. 約0.1 µg/mL (5,000倍希釈) になるよう希釈したHRP標識S100A4抗体 (PP-2H4-0C) を100 µLずつプレートに分注
    2. 室温で750 rpm・1時間反応
  5. プレートをPBSTで5回洗浄 (400 µL/well)
    1. 発色液を100 µLずつプレートに分注
    2. 室温・暗所で静置
  6. 発色を確認
    1. 停止液 (1 mol/L塩酸) を100 µLずつプレートに分注
    2. 室温で600 rpm・1分攪拌
  7. プレートリーダーで測定 (主波長450 nm、副波長620 nm)

【注意点】

  • 上記プロトコルに記載した固相濃度及び標識抗体濃度については、お客様の実験条件に合わせて適宜至適化をお願いいたします。
  • 精製ヒトS100A4タンパク質の他、ヒト血清中S100A4濃度測定が可能です。その場合、血清はサンプル希釈液で10倍に希釈してご使用をお願いたします。
  • 固相濃度を5 µg/mLとしてPP-2E10-0Cを使用する場合、100 µL分注品では96ウェルプレート2枚分です。
  • PP-2H4-0C (HRP標識抗体) を0.1 µg/mLで使用する場合、50 µL分注品では96ウェルプレート25枚分です。
プロトコル詳細はこちら

アプリケーションデータ

HRP標識抗体を固相抗体と標識抗体のセットとして使用した感度比較

ウェルを抗ヒトS100A4マウスモノクローナル抗体 (PP-2E10-0C) で0.5 μg/ウェル、4℃で一晩コーティング。
その後1時間、室温 (RT) で脱脂粉乳によりブロッキングした後、洗浄し、段階希釈したヒトS100A4溶液を各ウェルに添加して室温でインキュベートした。
プレートを洗浄し、HRP結合抗ヒトS100A4抗体 (PP-2H4-0C、0.1 μg/mL) と室温で反応させ、再度洗浄した後、TMB試薬で発色させた。

結果

結果 グラフ
PPMX A社 ELISA Kit
検量線範囲 0.19-25 ng/mL 0.378-24 ng/mL
最低検出感度 0.24 ng/mL 0.282 ng/mL
発色時間 30 min 10-20 min
添加回収試験 91～102% 84～113%

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