単層膜形成用の無血清培地
オリエンタル酵母 Caco-2細胞単層膜形成用培地
ヒト結腸癌由来細胞(Caco-2)は、過密培養により腸管上皮様に分化することが知られており、小腸における腸管機能を再現した細胞モデルとして、創薬研究分野などで広く利用されています。
本製品はCaco-2細胞の単層膜形成用の無血清培地で、これまで約3週間要していた単層膜形成期間を約5日に短縮可能です。毒劇物非該当品のため、管理・取扱いが容易です。
*本品はCaco-2細胞の播種(プレーティング)・増殖にはご使用頂けませんので、カルチャーインサート等への細胞播種には増殖用培地をお使い下さい。
基礎データ(参考培養例)
Caco-2細胞を24ウェルプレートのカルチャーインサートに2x105 cellsで播種し(day0)翌日(day1)、本製品(単層膜形成培地)に培地交換した。
以降、本製品で1~2日に1回培地交換を行い、膜抵抗値の変化を測定した。
腸管吸収試験
本製品にて形成させた単層膜を用いてインサートA側から薬剤の吸収試験を行い、B側培地をHPLC分析することで吸収を評価した。透過係数は以下の式にて算出した。
薬剤 | 用途 | 透過係数(cm/s) | FDAによる透過性評価 |
---|---|---|---|
Propranolol | 不整脈、高血圧、心筋梗塞、緑内障、片頭痛の治療薬 | 8.7 × 10-6 | High |
Ketoprofen | 経皮鎮痛消炎剤 | 5.6 × 10-6 | High |
Atenolol | 狭心症治療 | 3.0 × 10-7 | Low |
※ 本製品にて形成された単層膜にてトランスポーター(P-gp、BCRP)発現をRT-PCRで確認しております。
※ 本製品にて形成された単層膜は Lucifer Yellow が透過しないことを確認しております。
必要な試薬・器具・機器
- Caco-2細胞単層膜形成用培地(#47338000)
- Caco-2 細胞
- Caco-2 細胞増殖用培地(EMEM + 10% FCS + 100 U/mL ペニシリン + 100 μg/mL ストレプトマイシン 等)
- フラスコ(75 cm2 フラスコ等)
- 細胞剥離剤(トリプシン/EDTA等)
- PBS(-)
- CO2 インキュベーター(温度:37℃、CO2 濃度:5%)
- 電気抵抗値測定器
- セルカルチャーインサート
- マルチウェルプレート
参考文献
- Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 2022 Sep, Article ID 4139812, 9 pages
- J Basic Clin Pharm. 2010 Mar;1(2):63-9.
- Br J Pharmacol. 2012 Apr;165(8):2598-610.
製品一覧
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
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