2D・3D培養に使用できる基底膜

Cultrex UltiMatrix Reduced Growth Factor (RGF) Basement Membrane Extract (BME)

Cultrex UltiMatrix RGF BME はEngelbreth-Holm-Swarm (EHS)マウス肉腫から精製された可溶型の基底膜です。タンパク質濃度の向上によりオルガノイド細胞培養、iPS細胞の増殖と分化、スフェロイド形成およびその他の2Dおよび3D培養アプリケーションで有効性が証明された理想的なハイドロゲルマトリックスです。

サンプル申し込み

Ultimatrix RGF BMEのサンプルを提供しています。

下記の注意事項を必ずお読みいただき、サンプル申込みボタンよりお申込みください。

お申込みのご注意事項
  • 提供製品は1mL包装(BME001-01)となります。
  • お申し込みは1部署・1研究室1点までとなります。
  • 販売代理店は当社販売代理店よりお選びください。納品の際に必要となります。

製品概要

特長

  • 製造ロット間の一貫性
  • オルガノイドおよび多能性幹細胞の培養に最適なデザイン
  • 3Dアプリケーションに最適化された引張強度(弾性率)

製品仕様

  • タンパク質濃度 10-12mg/mL
  • 無菌試験    USP <71> ガイドライン準じた無菌試験を実施
  • ウイルス試験  マイコプラズマやLDEVを含む 32種の生物種およびウイルスについてPCRによる陰性を確認
  • エンドトキシン ≦ 7EU/mL (LAL法による)
  • ドーム形成能  7日間ドーム形成を維持(タンパク質濃度8mg/mL時)
  • ゲル化能    37℃で30分以下でゲル化培養培地中で37℃ 12日間ゲル化を維持
  • プレートの底でドームを形成する様子

プロトコール

データ

1. ヒト下行結腸オルガノイドの杯細胞

ヒト下行結腸オルガノイド杯細胞の免疫染色像
ヒト下行結腸から単離された成体幹細胞をCultrex Ultimatrix RGF BMEへ埋め、増殖用培地で30日間培養した。オルガノイドを固定し免疫染色を行った。MUC2により腸胚細胞を確認した。緑:MUC2(Novus, メーカーコード:NBP2-44431), 赤:E-Cadherin(R&D Systems, メーカーコード:AF748), 青:DAPⅠ(Tocris, メーカーコード: 5748)

2.細胞外マトリックスの製造ロット間の一貫性

A: ロット間の細胞外マトリックス(ECM)の組成
Cultrex UltiMatrix RGF BMEと他社競合品のECM の2ロット間における、Entactin、 Laminin 1、Collagen IVのシンプルウエスタン解析の結果。 本製品は他社競合品と比較して、一貫したEntactinの発現を示した。
B: ロット間のゲル化率と引張強度(弾性率)
Cultrex UltiMatrix RGF BMEと他社競合品の細胞外マトリックス (ECM) の2ロット間における、ゲル化速度と引張強度のダイナミクス。温度を上げて、各ロットの引張強度をゲル化率を確認した。本製品は他社競合品と比較して一貫したゲル化率と高い引張強度(Storage modulus)を示した。

3.iPS細胞における高い増殖能

A: iPS細胞の増殖能の比較
Cultrex UltiMatrix RGF BME (紫)または他社競合品の細胞外マトリックス (グレー) を用いてヒトiPS細胞を6ウェルプレート (7.5 x 105 cells / wellで播種)で継代培養した。各継代で細胞を採取し、血球計算盤にて細胞数を計測した。他社競合品と比較してCultrex UltiMatrix RGF BMEを用いた場合、より高い細胞増殖能を示した。
B: iPS細胞コロニーの免疫染色像
Cultrex UltiMatrix RGF BMEを用いて培養されたヒトiPS細胞コロニーを免疫染色した。赤:Oct3/4(R&D Systems, メーカーコード:AF1759)、緑:F-actin、青:DAPI(Tocris, メーカーコード:5748)。

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