RNA抽出・精製試薬

ニッポンジーン small RNA抽出試薬

ニッポンジーンでは、様々な核酸抽出試薬をラインアップしております。
small RNA抽出に関しても、お客様の用途に合わせた製品を取り揃えております。

small RNA 検体選択チャート

対象試料 製品名 所要時間 概要
動物組織/培養細胞 ISOGEN II 1時間 動物細胞および動物組織からのRNA抽出試薬
【特長】
1. RNA の単離にクロロホルムを不使用
2. 従来法の試薬(ISOGEN など)よりもsmall RNA の抽出効率が高い
3. 高分子RNA(> 200 bases)と、small RNA(< 200 bases)の分画が可能(分画しない方法も有)
4. DNA の混入が少なく、抽出したRNA はそのままRT-PCR や定量RT-PCR に使用可能
5. 約1 時間でRNA が抽出可能
血漿/血清/全血/唾液/尿/細胞懸濁液
/培養細胞上清/核酸溶液
ISOSPIN Liquid Sample miRNA 1.5時間 液体試料からの small RNA 精製キット
【特長】
1. スピンカラムタイプ
2. 液体試料からsmall RNAを効率よく精製
3. 抽出困難な「全血」「尿」「唾液」からもsmall RNAを選択的に抽出可能
4. フェノールやクロロホルム等の毒劇物を使用しない
5. DNaseを使用せず、ゲノムDNAを除去可能

ISOGEN Ⅱ

概要

本品は、フェノールとグアニジンを含む均一な液体であり、細胞成分との相互作用により、シングルステップでRNA を単離できます。
従来法の試薬(ISOGEN やISOGEN-LS)のようにクロロホルムを用いた液相分離の必要がありません。試料にISOGEN II を加えて溶解またはホモジナイズした後、水を添加すると、DNA、タンパク質、ポリサッカライド等は沈殿(不溶化)するため、遠心分離によって除去できます(右図)。上清をエタノール沈殿、洗浄、溶解すると、高純度なRNA が単離できます。 なお、ISOGENOMEと組み合わせて使用しますと、ISOGENのように同一サンプルからDNAも抽出することができます。

プロトコール

  • 本品以外にRNaseフリー水、エタノール、イソプロパノール、必要に応じて p-bromoanisole を用意する。
  • チューブは透明なポリプロピレン製を用いるとよい。使用前に、遠心分離の強度(12K x g)とISOGEN II (フェノール)に対する耐性があるか確認しておく。
  • 全ての操作は室温で行えるが、遠心は4~28°Cで行うことを勧める。

ISOSPIN Liquid Sample miRNA

概要

本品は、 液体試料から microRNA (miRNA) などの small RNA をスピンカラムを用いて効率良く精製するためのキットです。 ゲノム DNA の除去にもスピンカラムを使用しているため、 DNase 処理等で生じる短鎖 DNA の混入が少なく、高純度の small RNA を約 1.5 時間で抽出できます。

small RNA精製のプロトコール

※血漿、血清などlarge RNAが含まれない試料の場合、Step 2(large RNAの除去)を省略できます。

【実験例】 全血からのsmall RNA精製

本品を用いて全血180 μl からsmall RNA を精製した。また、各精製工程(Step1-3)における核酸溶液をアガロースゲル電気泳動に供した。

Lane ① : Step1 のカラムへ吸着させたDNA (一部large RNA を含む)
Lane ② : Step2 の遠心分離前のlarge RNA を含むsmall RNA 溶液
Lane ③ : Step3 で最終的に得られたsmall RNA 溶液

結果: 全血からDNA, Large RNAを除去し、small RNAを選択的に精製できた。

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    【試薬】
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