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アイソスピン リキッド サンプル マイクロRNA ISOSPIN Liquid Sample miRNA

製造元 :
(株)ニッポンジーン
保存条件 :
冷凍 (ドライアイス輸送)
適用法令 :
安衛法57条・有害物表示対象物質 労57-2 危4-ア(水溶性)-II
GHS :
  • 構造式
  • ラベル
  • 荷姿
比較
製品コード
容量
価格
在庫
販売元
318-09191
製造元
318-09191
JAN
4987481641488
50回
希望納入価格
45,000 円

ドキュメント

スペクトルデータ
検査成績書
校正証明書

キットコンポーネント

50回用

LR Extraction Buffer 18 ml×1 本
LR Wash1 Buffer 60 ml×1 本
LR Wash2 Buffer 60 ml×1 本
Proteinase K 1 ml×1 本
ddWater 1 ml×5 本
Spin Column Blue 50 本×1 袋
Spin Column 50 本×1 袋

製品概要

本品は、 液体試料から microRNA (miRNA) などの small RNA をスピンカラムを用いて効率良く精製するためのキットです。 ゲノム DNA の除去にもスピンカラムを使用しているため、 DNase 処理等で生じる短鎖 DNA の混入が少なく、高純度の small RNA を約 1.5 時間で抽出できます。

抽出実績(液体試料)

血漿、血清、 全血、唾液、尿、細胞懸濁液、培養細胞上清、核酸溶液

特長

  • 液体試料から small RNA を効率よく精製
  • フェノールやクロロホルム等の毒劇物を使用しない
  • DNaseを使用せず、ゲノムDNAを除去可能

プロトコール

small RNA精製のプロトコール

※血漿、血清などLarge RNAが含まれない試料の場合、Step 2(Large RNAの除去)を省略できます。

【実験例】 全血からのsmall RNA精製

電気泳動図
各 10μLアプライ
1% Agarose S in TAE
(EtBr 染色)

本品を用いて全血180 μl からsmall RNA を精製した。また、各精製工程(Step1-3) における核酸溶液をアガロースゲル電気泳動に供した。

Lane ① : Step1 のカラムへ吸着させたDNA (一部large RNA を含む)
Lane ② : Step2 の遠心分離前のlarge RNA を含むsmall RNA 溶液
Lane ③ : Step3 で最終的に得られたsmall RNA 溶液

結果: 全血からDNA, Large RNAを除去し、small RNAを選択的に精製できた。

アプリケーションデータ

実験例①:血漿からの抽出したmiRNAの検出(リアルタイムPCR)

本品を用いて180 μl と350 μl の血漿からsmall RNA を抽出した。また、他社品を用いて300 μl の血漿からsmall RNA を抽出した(プロトコールに従いDNase 処理を実施)。各溶出液から3.57 μl のsmall RNA を鋳型にTemplate Switching 逆転写反応でcDNA を合成し、Intercalation 法によるリアルタイムPCR でマイクロRNA のmiR-16 とLet-7a を検出した。

【結果】
本品を用いて180 μL の血漿から抽出した方が、他社キットで300 μL の血漿から抽出した場合より、高感度にマイクロRNA を検出することができた。

実験例②:尿から抽出した miRNA の検出(リアルタイム PCR)

ISOSPIN Liquid Sample miRNAを用いて180 μl と350 μl の尿からsmall RNA を抽出した。各溶出液から3.57 µlの small RNA を鋳型にTemplate Switching逆転写反応で cDNA を合成し、Intercalation 法によるリアルタイムPCR でマイクロRNA のmiR-16 とLet-7a を検出した。

【結果】
本品を用いて180 μl および350 μl の尿からマイクロRNA を検出することができた。

FAQ

RNA収量が少ない。
  • 抽出以前に、試料中の RNA が分解しているおそれがあります。新鮮な試料を用いて、凍結・融解を繰り返した試料は RNA 抽出に使用しないでください。
  • RNA がチューブに吸着しないよう、RNA溶液は核酸低吸着チューブに回収してください。
  • RNaseフリーの器具と試薬を使用してください。
  • スケールアップや濃縮プロトコールをお試しください。
    ※ オプションプロトコールは、マニュアルをご覧ください。
    URL:https://www.nippongene.com/siyaku/product/extraction/tds/tds_isospin-ls-mirna-manual.pdf
キット以外に必要なものはありますか?
以下の機器、器具、試薬が別途必要になります。
【機器】 ボルテックスミキサー、ヒートブロック(37℃)、卓上遠心機、遠心分離機
【器具】 マイクロピペット、ピペットチップ、1.5 ml マイクロチューブ、2.0 ml マイクロチューブ(スケールアッププロトコールの場合)
【試薬】 エタノール(96~100%)

物性情報

「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。

製造元情報

別名一覧

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  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
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