ニッポンジーン Rapid Indel Detection Kit

Rapid Indel Detection Kitは、ゲノム編集による変異導入を迅速に確認できるキットです。

本製品は、簡易DNA抽出試薬、高正確性PCR酵素、Indel (挿入または欠失)変異によりミスマッチした二本鎖を切断するT7 Endonuclease Iで構成されています。

特長

  • 細胞から約15分で簡単にDNAを抽出可能
  • PCRと電気泳動で簡単に変異の有無を検出可能
  • 変異導入クローンのスクリーニングが可能

変異検出の原理

実験例

本キットを用いて、F2世代のゲノム編集マウスについて、ホモ (または野生型)、ヘテロの個体識別を行った。

マウス尾または指から抽出したゲノムDNAを鋳型に、標的部位を含む領域をPCRで増幅した。PCR産物を熱変性によりかい離させ、再アニールを行うことで用意した二本鎖DNAを基質に、T7 Endonuclease I reaction Mix で反応させた後、アガロースゲル電気泳動を行った。また、同時にシークエンス解析を行い、ホモ (または野生型)、ヘテロの判定を行った。

図: 本キットを用いたゲノム編集マウスのホモ (または野生型)、ヘテロの個体識別結果

結果

本キットを用いた判定とシークエンス解析結果が一致したことから、本キットがヘテロのマウス個体を正しく検出できることを確認できた。

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