GCリンフォテック　iMediam for T

• T 細胞の無血清培養が可能
• 異種成分を含みません(Chemically-defined medium)
• 厚生労働省に材料適格性承認申請済み

1. OKT3 抗体を PBS で5-10 μg/mL に希釈し、フラスコの底に塗布する(225 cm² フラスを用いた場合の濃度は 10 μg/mL)。
2. 3-5 x 10⁷ 個の PBMC を30-50 mL の iMediam for T に懸濁させる。
3. 細胞増殖状態に応じて適切な量の iMediam for T を添加する。
4. 培養 5-7 日後、細胞懸濁液をガス透過性の培養バッグに移し、適切な量の iMediam for T を追加し、さらに 2-3 週間培養する。培養状況に応じて適切に培養バッグの数を増やす。

血清入り培地と iMediam for T との性能比較(培養14日目)

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  インフォームドコンセントの得られた健常人 9 名の血液より末梢血単核球(PMBC)を分離し、血清入り培地とiMediam for T(無血清)で培養比較を行った。培養 5 日まではOKT3抗体個相化フラスコで培養し、その後はガス透明性培養バックに移し、計 14 日間培養した。最終的な液量は 2,000 mLとした。

• プロトコル

  容器：OKT3抗体個相化フラスコ225 細胞：健常人 PMBC 2 x 107 cells/Flask (50 mL IL-2:700 U/mL)

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  Day 5 ガス透明性培養バッグに細胞を移す　計1,000 mL

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  Day 8 ガス透明性培養バッグに細胞を増やす　計2,000mL

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  Day 14 細胞数測定　表面抗原解析

表面抗原解析

インフォームドコンセントの得られた健常人 3 名の PMBC を iMediam for T (無血清)で 14 日間培養した後、Tリンパ球の指標であるCD3陽性細胞の割合をフローサイトメーターで測定した。
3 検体ともCD3の割合が98 %以上であり、Tリンパ球が選択的に増殖していることがわかる。