Genovis社　IgGプロテアーゼ「FabULOUS^®(SpeB)」

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  • IgGヒンジ領域上部を特異的に切断
  • 幅広い生物種のIgGに適用(右表)
  • IgG切断反応が約60分で完了
  • Fabフラグメント精製用のマウスL鎖-Kappa特異的カラムを含むキットもラインアップ
  
  

  

• FabULOUS^®　反応性と切断部位(還元状態)

  動物種及びサブクラス	切断部位
  Human IgG1	..KTHT / CPPCPAPA..※1
  Human IgG2	+ (部位未特定)
  Human IgG3	+ (部位未特定)
  Human IgG4	ー
  Mouse IgG1	..KPCIC / TVPEVS..
  Mouse IgG2a	+ (部位未特定)
  Mouse IgG2b	+ (部位未特定)
  Mouse IgG3	+ (部位未特定)
  Rat IgG2b	+ (複数部位)
  Rhesus Monkey	未特定
  Rabbit	..KPT / CPPPE..※1

  ※1　主な切断部位

FabULUOS^® (SpeB)はHisタグを含んでいますので、抗体消化反応後にニッケルキレートレジンで除去できます。
FabULUOS^® (SpeB)は凍結乾燥品です。プロトコールに記載されている量の滅菌水に溶解してご使用下さい。
ユニット定義 : 1ユニットのFabULOUS^®は説明書に記載の通りの条件で1 μgのIgGを切断します。
由来： FabULUOS^® (SpeB)はStreptococcus pyogenes由来で、E. coliで発現しています。

• 表1. pH毎のFabULOUS^®による切断の互換性が確認された緩衝液

  互換性のある緩衝液	pH
  リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)	6.5 – 8.0
  Tris	7.0 – 8.0
  酢酸ナトリウム	6.5※

  ※pH6.5以下では、IgGを効率よく切断するため酵素の濃度を高くする必要があります。

• 表2. FabULOUS^®で使用が確認された還元剤

  還元剤	濃度 (mM)	pH
  DTT	1-5	6.5 - 8.0
  TCEP	1-5	6.5 - 8.0
  システイン	50-100	6.5 - 8.0
  システアミン	50-100	6.5 - 8.0
  2-メルカプトエタノール	50-100	6.5 - 8.0

IgGプロテアーゼはいくつかの動物種及びサブクラスのIgGをサブユニットへ切断する酵素で、Genovis社では切断部位に応じてFabRICATOR^® (IdeS), FabALACTICA™ (IgdE), FabRICATOR ^® Z (IdeZ), FabULOUS ^® (SpeB) and GingisKHAN^® (Kgp)と名付けた、各種IgGプロテアーゼを取り扱っています。

IgGプロテアーゼ製品の比較一覧