抗体医薬品、ペプチドの分析に

Genovis社 IgGプロテアーゼ「FabULOUS®(SpeB)」

Genovis社は、抗体医薬研究用のバイオ医薬プロセス酵素SmartEnzymes™を開発・製造しているスウェーデン(ルンド)のメーカーで、モノクローナル抗体、ADCs(antibody drug conjugates)、Fc融合タンパク質、バイオシミラー等のバイオ医薬品の研究開発に使用できるユニークな酵素(プロテアーゼ、グリコシラーゼ)、試薬キットをラインアップしています。

FabULOUS®は様々な種類のIgGのヒンジ領域上部を認識し切断するプロテアーゼです。

特長


    • IgGヒンジ領域上部を特異的に切断
    • 幅広い生物種のIgGに適用(右表)
    • IgG切断反応が約60分で完了
    • Fabフラグメント精製用のマウスL鎖-Kappa特異的カラムを含むキットもラインアップ

  • FabULOUS® 反応性と切断部位(還元状態)
    動物種及びサブクラス 切断部位
    Human IgG1 ..KTHT / CPPCPAPA..※1
    Human IgG2 + (部位未特定)
    Human IgG3 + (部位未特定)
    Human IgG4
    Mouse IgG1 ..KPCIC / TVPEVS..
    Mouse IgG2a + (部位未特定)
    Mouse IgG2b + (部位未特定)
    Mouse IgG3 + (部位未特定)
    Rat IgG2b + (複数部位)
    Rhesus Monkey 未特定
    Rabbit ..KPT / CPPPE..※1

    ※1 主な切断部位

アプリケーションデータ

  • 図1. FabULOUS® Fab Kit (メーカーコード:A1-PFK-020)を用いたマウスモノクローナルIgG1抗体のMS分析
    A) インタクトなマウスモノクローナルIgG1抗体
    B) FabULOUS® Fab kit で処理後の断片解析結果
    C) CaptureSelectTM LC-Kappa column から溶出されたFab断片
  • 図2. FabULOUS® Fab kitを使用したマウスモノクローナルIgG1の精製Fab断片の非還元SDS-PAGE
    レーン1:インタクトなマウスIgG1
    レーン2:切断されたマウスIgG1
    レーン3: CaptureSelect™ カラムの通過画分
    レーン4:溶出されたFab断片
    レーン5:分子量マーカー

製品選択ガイド

品名 メーカーコード 容量
FabULOUS® Enzyme A0-PU1-020 2,000 Units
FabULOUS® Fab kit
FabULOUS® (SpeB)とFabフラグメント精製用のマウスL鎖-Kappa特異的カラムを含むキット
A1-PFK-020 2,000 Units

FabULUOS® (SpeB)はHisタグを含んでいますので、抗体消化反応後にニッケルキレートレジンで除去できます。
FabULUOS® (SpeB)は凍結乾燥品です。プロトコールに記載されている量の滅菌水に溶解してご使用下さい。
ユニット定義 : 1ユニットのFabULOUS®は説明書に記載の通りの条件で1 μgのIgGを切断します。
由来: FabULUOS® (SpeB)はStreptococcus pyogenes由来で、E. coliで発現しています。

緩衝液の互換性

  • 表1. pH毎のFabULOUS®による切断の互換性が確認された緩衝液
    互換性のある緩衝液 pH
    リン酸緩衝生理食塩水 (PBS) 6.5 – 8.0
    Tris 7.0 – 8.0
    酢酸ナトリウム 6.5

    ※pH6.5以下では、IgGを効率よく切断するため酵素の濃度を高くする必要があります。

  • 表2. FabULOUS®で使用が確認された還元剤
    還元剤 濃度 (mM) pH
    DTT 1-5 6.5 - 8.0
    TCEP 1-5 6.5 - 8.0
    システイン 50-100 6.5 - 8.0
    システアミン 50-100 6.5 - 8.0
    2-メルカプトエタノール 50-100 6.5 - 8.0

その他 IgGプロテアーゼ製品一覧

IgGプロテアーゼ製品のHuman IgGにおける切断部位

IgGプロテアーゼはいくつかの動物種及びサブクラスのIgGをサブユニットへ切断する酵素で、Genovis社では切断部位に応じてFabRICATOR® (IdeS), FabALACTICA™ (IgdE), FabRICATOR ® Z (IdeZ), FabULOUS ® (SpeB) and GingisKHAN® (Kgp)と名付けた、各種IgGプロテアーゼを取り扱っています。

IgGプロテアーゼ製品の比較一覧

製品一覧

  • 項目をすべて開く
  • 項目をすべて閉じる

関連製品一覧

  • 項目をすべて開く
  • 項目をすべて閉じる

FabRICATOR®

FabRICATOR® Z

GingisKHAN®

FabALACTICA™

  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。