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R&D Systems社　Luminex® Assay 試薬キット

R&D Systems社では、Luminex®テクノロジー(xMAP®)を用いた多項目同時測定システムのための試薬キットをご提供しています。

  • Luminex®、xMAP®はLuminex社の登録商標です。

受託による解析も承っております。詳細はこちらご覧ください。

Luminex®テクノロジー(xMAP®)の原理

500種類に色分けされた専用蛍光ビーズの表面に抗体をコーティングし、各種蛍光ビーズを混合して使用することでタンパク質の多項目測定を可能にしています。
アッセイは2種類あり、両アッセイともに専用機器で測定が必要です。

STEP 1

各種補足抗体と結合させた蛍光ビーズとサンプルを混合させます。

STEP 2

ビオチン標識した検出用抗体を加え抗原を抗体でサンドイッチします。
さらにストレプトアビジン-PEを加えます。

STEP 3

蛍光ビーズは、フローサイトメトリーと同様の技術を利用し、デュアルレーザーで検出されます。1つ目のレーザーでビーズを特定し、2つ目のレーザーでPE強度を測定します。

専用装置
  • Luminex 200™(Bio-Rad社Bio-Plex200)・・・ポリスチレンビーズ・磁気ビーズ共用
  • FLEXMAP 3D®(Bio-Plex 3D)・・・ポリスチレンビーズ・磁気ビーズ共用
  • Luminex MAGPIX®(Bio-Plex MAGPIX)・・・磁気ビーズ専用

Luminex® Assay試薬

R&D Systemsでは2種類のLuminex® Assay 試薬をラインアップしています。

Luminex® Discovery Assay Luminex® High Performance Assay
特長 ・フレキシブル
　測定項目をパネルの制約なく、自由に選択可能
・低価格		 ・高性能
・Quantikine ELISA Kitと高い相関性
測定可能な動物種 ヒト マウス ラット ブタ ヒト マウス 霊長類
項目数 348 105 18 19 119 45 37
同時測定数 最大50項目 最大46項目
測定項目の選択 動物種ごとに設定された
ラインアップから自由に選択可能		 パネル内から選択（custom, fixed）
測定時間 3 - 3.5時間 2.5 - 5時間
製品形態* "Premixed " "Premixed ", "User Mixed"
使用可能サンプル 細胞培養上清、血清、EDTA血漿、ヘパリン血漿、
組織溶解液 (マウス検体のみ)		 細胞培養上清、血清、EDTA血漿、ヘパリン血漿
特定のパネルについては：唾液、尿、母乳
コントロールの付属 なし あり
注文形態 カスタムオーダーのみ カスタムオーダーおよび既存包装品

*Premixedタイプは、必要な試薬が全てセットになったキットです。選択した全測定項目のビーズ抗体および検出抗体が、それぞれ1本のカクテルとして納品されます。
*User Mixedタイプでは、測定したい項目のビーズセットとベースキットを個別にご購入いただけます。ビーズおよび検出抗体は測定項目ごとに納品されますので、使用時に混合が必要です。

測定可能な項目

Luminex® Assay

キット内容

Human Magnetic Luminex® Assay の例　※保存条件：2 - 8℃

    • Standard Cocktail(s) *
    • Human Magnetic Premixed Microparticle Cocktail
    • Human Premixed Biotin-Ab Cocktail
    • Streptavidin-PE Concentrate
    • Diluent RD2-1
    • Calibrator Diluent RD6-52
    • Wash Buffer Concentrate
    • Microplate
    • Certificate of Analysis
    • Mixing Bottles
    • Plate Sealers

*Standard Cocktail A-Z,1-7の計34種のうち、選択した測定対象を含むすべて(各2本)

Luminex® Assay 測定項目・測定範囲一覧

下記メーカーHPをご参照ください。

https://www.rndsystems.com/products/luminex-assays

Luminex® High Performance Assay

キット内容

Luminex® Performance Human Cytokine Magnetic Panel Aの例

  • ベースキット　　※ 保存条件：2 - 8℃
    • Standard Cocktail(s)
    • Bead Diluent
    • Biotin Antibody Diluent
    • Calibrator Diluent(s)
    • Streptavidin-PE
    • Wash Buffer Concentrate
    • Mixing Bottles
    • Round-bottom Microplate
    • Foil Plate Sealers
  • ビーズセット　　※ 保存条件：2 - 8℃
    • Antibody-coated magnetic beads
    • Biotinylated detection antibody

  • Premixed (We Mix) タイプには、ベースキットとビーズセットが含まれます。
    選択した全測定項目のビーズ及び検出抗体は、それぞれ混合された状態で納品されます。
    (ベースキット ＋ Premixed Beads Cocktail ＋ Premixed detection Ab Cocktail)
  • User Mixed (You Mix) タイプをご希望の場合は、ベースキットと必要なビーズセットを個別にご注文下さい。
    使用時にそれぞれのビーズ及び検出抗体を混合する必要があります。

Luminex® High Performance Assay と Quantikine® ELISA Kit の相関

Luminex® Performance Cardiac Panel AとQuantikine® ELISA Kit を用いて、CD40 LigandおよびGDF-15の濃度を測定した。

Luminex® High Performance Assay 測定項目一覧

下記メーカーHPをご参照下さい。

https://www.rndsystems.com/products/luminex-high-performance-assays

Q&A

Q.1:カルタヘナ法該当ですか

Luminex Assay® はすべてカルタヘナ該当です。 Luminex® High Performance Assay はパネルにより異なります。お問い合わせください。

Q.2:納期はどの程度ですか

Premixed 品はおよそ 3 - 4週間です。 User Mixed 品はおよそ 2週間です。一部国内在庫品もございます。

Q.3:開封後のキットの使用期限はどれくらいですか

2 - 8℃保存で1ヶ月です。

Q.4:1キットを数回に分けて使用することは可能ですか

スタンダードカクテルは1キットにつき 2セット添付されているため、2回に分けて測定することが可能です。プレートは1キットにつき1枚のみですので、別途ご用意ください。

  • 磁気ビーズ用プレート：グライナー社 #655096

Q.5:推奨希釈倍率を変更することは可能ですか

希釈倍率を上げることは可能です(例．1:2⇒1：3)。ただし感度は低下します。 一方で、希釈倍率を下げることはできません(例．1：50⇒1：2)。

Q.6:血清/血漿サンプルでは項目によって推奨希釈倍率が異なるが、これらを同時に測定することは可能ですか

可能ですが、測定できるサンプル数が減ります。

例．血清サンプルでの Human Luminex Assay 2 plex (Angiopoietin-1, Angiopoietin-2)の場合

  • Angiopoietin-1⇒1：50
  • Angiopoietin-2⇒1：2
  1. 血清サンプルを 50倍希釈と 2 倍希釈のそれぞれ用意し、測定する。
  2. Angiopoietin-1 は 50倍希釈したサンプルのデータを、Angiopoietin-2 は 2倍希釈したサンプルのデータを採用する(サンプルに使えるウェル数は通常の半分になる)。

Q.7:Luminex® Assay では10 xの濃度に各スタンダードカクテルを調製・混合するが、スタンダードカクテルが11本以上添付されている場合はどうすればいいですか

11 - 14本の場合は高濃度に調製することで、検量線を増やす必要はありません(検量線のために消費するウェル数は増えません)。(例．13本の場合：各スタンダードカクテルを13 xに調製)

滅多にない例ですが、15本以上の場合は検量線を別途作成する必要があります。

Q.8:同一ロットのキットを用いて、同時に測定してもプレートごとに検量線を作成する必要がありますか

はい、検量線はプレートごとに作製する必要があります。

Q.9:Luminex® Assay の検量線作成はブランク(希釈バッファー)+スタンダードカクテルの6段階希釈系列(Standard 1-6)の計7点だが、ポイントを増やすことは可能ですか

低濃度の方向に1つ希釈系列を増やすことは可能です (Standard 7)。Standard 8は要検討、Standard 9以上は推奨しません。

Q.10:磁気ビーズのメリットはなんですか

(Washの際の) 操作性が良い、MAGPIX でも使用可能、再現性が良い、ばらつきが少ない、といったメリットがあります。

Q.11:細胞培養上清、血清、血漿以外のサンプル種でも測定可能ですか

カタログに記載しているサンプル種は R&D Systems 社でバリデーションしているサンプル種のみです。

その他のサンプル種も測定可能で、推奨希釈倍率は1:2です (羊水、脳脊髄液、気管支肺胞洗浄などのサンプルで実績があります)。Luminex® High Performance Assay はキットによっては唾液、尿、母乳といったサンプルをバリデーションしています。

Q.12:受託解析は可能ですか

ジェネティックラボ社にて R&D Systems 社の Luminex 試薬を使用した受託解析を承っております。詳細はこちらご覧ください。

ご注文・お見積り依頼方法

Luminex® Assayの場合

すべてカスタムオーダーとなります。下記いずれかの方法でご希望の測定項目をご指定いただき、お問合せ下さい。

  1. パンフレット中の見積依頼書の希望測定項目にチェックを入れる。
  2. R&D Systems社オーダリングツールにて測定項目を選択し、Luminex Code.を取得する。
    http://www.rndsystems.com/ordering_tool.aspx

Luminex® High Performance Assayの場合

Premixed(We Mix)をご希望される場合は、カスタムオーダーとなります。下記いずれかの方法で、ご希望の測定項目をご指定いただき、お問合せ下さい。

  1. パンフレット中の見積依頼書の希望測定項目にチェックを入れる。
  2. R&D Systems社オーダリングツールにて測定項目を選択し、Luminex Code.を取得する。
    http://www.rndsystems.com/ordering_tool.aspx

User Mixed (You Mix) タイプ、プレミックスキットをご希望の場合は、既存包装品となります。

カタログNo.にて当社販売代理店にご注文下さい。

  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
    【医薬品原料】
    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
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