SCALEVIEW-S4

透明化可能組織

スフェロイド、オルガノイド、ニューロスフェア

透明化に必要なもの

★スフェロイド培養にはスリットウェルプレートが便利です。

試薬

1. SCALEVIEW-S4^※
2. deScale Solution (製品コード：041-34425)
3. パラホルムアルデヒド (製品コード：160-16061)

器具

1. 観察用プレート (底面がカバーガラスのものを推奨)
2. SCALEVIEW-S4 透明化標本向け蛍光顕微鏡と推奨対物レンズ^※※

• スフェロイドはSCALEVIEW-S4中では浮遊しやすくなっているため、SCALEVIEW-S0とSCALEVIEW-A2を併せての使用を推奨しています (下記プロトコル参照)
• ※屈折率 (RI=1.49) に合った対物レンズをご用意ください。データ取得前にお手持ちの顕微鏡メーカーに確認することを推奨いたします。

• スフェロイドの簡易透明化プロトコル
• スフェロイドの免疫組織染色プロトコル (AbScale法)

スフェロイドの簡易透明化プロトコル

操作手順イメージ ⁴⁾

*透明化後、1.5% (wt/vol) アガロースを用いて包埋し、不動化することで観察が容易になります。

スフェロイドの免疫組織染色プロトコル (AbScale法)

• T47D細胞スフェロイド観察例
• ニューロスフェア3次元免疫染色
• F-POD^®透明化アプリケーション
• iCell^® Hepatocytes2.0透明化

T47D細胞スフェロイド観察例

Data by Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).

ニューロスフェア3次元免疫染色

F-POD^®透明化アプリケーション

サンプル　RLUN14：上皮内腺がん、細気管支肺胞上皮がん

サンプル　RLUN20

抗体 色素 顕微鏡 対物レンズ

：ZO-1-Alexa488 conjugate ：Actistain670 (ファロイジン) ：DAPI ：FV3000 ：UPLSAPO30×S

データ提供元：福島県立医科大学　高木　基樹先生、協力：エビデント株式会社

iCell^® Hepatocytes2.0透明化

詳しいプロトコルはこちら

1. Hama,H.et al. : Nature Neuroscience, 14, 1481(2011).
2. Hama,H.et al. : Nature Neuroscience, 18, 1518(2015).
3. Hama H, et al. : Protocol Exchange (2016), doi:10.1038/protex.2016.019
4. Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).
5. Takahashi N, et al. : Cells, 8, 481 (2019).