同仁化学 抗体標識キット(Labeling Kit/Ab-10 Rapid Labeling Kit)
Labeling Kit シリーズはお手持ちの一次抗体に直接蛍光色素やビオチン、酵素を標識できるキットです。
少量の抗体(10 μg)を30分で標識できる「Ab-10 Rapid Labeling Kit シリーズ」と限外濾過膜を用いて50 μg-200 μg, 1 mgの抗体・タンパク質を標識できる「Labeling Kit シリーズ」をご用意しております。
一次抗体法の利点
- 二次抗体を使わないので特にイメージングやELISA 実験時の操作を簡略化できます。
- 抗体種を気にしなくていいので、希少抗体も気軽に実験できます。
- 共免疫沈降に使用した抗体との交差性や分子量を気にせずに検出できます。
実験に応じてキットタイプを選択
| 実験・お困りごと | オススメの製品 | 標識対象 | 標識部位※1 | 操作時間 | 精製工程 | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| まずは | 少量の抗体ですぐに試したい | Ab-10 Rapid Labeling Kit シリーズ | 10 µg抗体 | アミノ基 | 30分間 | 無 |
| さらに | 低分子の不要物を除きたい スケールアップしたい アミノ基標識では上手くいかない |
Labeling Kit シリーズ | 50-200 µg, 1 mg 抗体・タンパク質 (1 mgはBiotin、Peroxidaseのみ) |
アミノ基 チオール |
1.5-3時間 | 有(限外ろ過) |
| Biotinylation Kit (Sulfo-OSu) | 1-5 mg 抗体・タンパク質 (Biotin標識のみ) |
アミノ基 | 4時間 | 有(ゲルろ過) |
まずは 少量抗体を 30 分で標識 Ab-10 Rapid Labeling Kit シリーズ
アミノ基標識の注意点
※1 標識操作により、抗体中のアミノ基に標識体が結合します。そのため抗体によっては抗原認識能が失われる場合がございます。※2 抗体溶液中の添加剤によっては標識に影響を与えることがあります。
特長
- 30分以内に抗体を標識可能
- 少量の抗体(10 μg)でも標識可能
- 操作は簡単！ 抗体と標識剤を混ぜるだけ
- 標識物
蛍光色素(Fluorescein, HiLyte Fluor™ 555/647)
蛍光タンパク質(R-Phycoerythrin)
ビオチン
ペルオキシダーゼ
さらに 限外ろ過膜でバッファー交換後に反応 Labeling Kit シリーズ
特長
- 3時間以内に抗体を標識可能
- 50〜200 μgの抗体が標識可能
- ゲルろ過や透析と比較して標識体の回収率が高い
- 分子量 50,000以上の高分子のラベル化が可能
- 標識物
蛍光色素(Fluorescein, HiLyte Fluor™ 555/647/750,ICG)
蛍光タンパク質(Allophycocyanin, R-Phycoerythrin)
ビオチン
アルカリフォスフォターゼ
ペルオキシダーゼ
ラインアップ
| ビオチン | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 容量 | 製品コード | メーカーコード | 解析方法 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ビオチン | 10 μg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit ※ | 3 samples | 348-92021 | LK37 |  |
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Biotin Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 347-90891 | LK03 | ||
| -SH | Biotin Labeling Kit -SH | 3 samples | 348-90941 | LK10 | |||
| 1 mg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Biotin Labeling Kit -NH2(for 1mg) | 1 sample | 344-91141 | LK55 | ||
| 1-5 mg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Biotinylation Kit (Sulfo-OSu)※ | 1 set (4 回) | 346-90621 | BK01 | ||
| 蛍光色素 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 容量 | 製品コード | メーカーコード | 解析方法 |
| Fluorescein | 10 µg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid Fluorescein Labeling Kit ※ | 3 samples | 343-91851 | LK32 |  |
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Fluorescein Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 347-90911 | LK01 | ||
| HiLyte Fluor™ | 10 µg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 347-91991 | LK35 | |
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 348-91041 | LK14 | ||
| 10 µg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 344-92001 | LK36 | ||
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 345-91051 | LK15 | ||
| ICG | 1-5 mg 抗体・タンパク質 | -NH2 | ICG Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 345-91431 | LK31 | |
| 蛍光タンパク質 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 容量 | 製品コード | メーカーコード | 解析方法 |
| R-Phycoerythrin | 10 µg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid R-Phycoerythrin Labeling Kit ※ | 3 samples | 347-91871 | LK34 | |
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | R-Phycoerythrin Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 347-91011 | LK23 | ||
| -SH | R-Phycoerythrin Labeling Kit -SH | 3 samples | 344-91021 | LK26 | |||
| Allophycocyanin | 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Allophycocyanin Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 349-90971 | LK21 | |
| -SH | Allophycocyanin Labeling Kit -SH | 3 samples | 346-90981 | LK24 | |||
| 酵素 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 容量 | 製品コード | メーカーコード | 解析方法 |
| Peroxidase | 10 µg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit ※ | 3 samples | 340-91861 | LK33 |  |
| 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Peroxidase Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 348-90821 | LK11 | ||
| -SH | Peroxidase Labeling Kit -SH | 3 samples | 345-90831 | LK09 | |||
| 1 mg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Peroxidase Labeling Kit -NH2(for 1mg)※ | 1 sample | 340-91121 | LK51 | ||
| Alkaline Phosphatase | 50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Alkaline Phosphatase Labeling Kit -NH2 ※ | 3 samples | 343-90871 | LK12 | |
| -SH | Alkaline Phosphatase Labeling Kit -SH | 3 samples | 346-90861 | LK13 | |||
- 標識操作により、抗体中のアミノ基に標識体が結合します。そのため抗体によっては抗原認識能が失われる場合があります。
ビオチン標識キット
ラインアップ
| Ab10 Rapid Labering kit (少量抗体用) |
Labeling Kit (限外ろ過膜チューブ同梱) |
Labeling Kit (for 1 mg) (限外ろ過膜チューブ同梱) |
Biotinylation Kit (ゲルろ過カラム同梱) |
||
| サンプル量 | 10 µg 抗体 | 50-200 µg 抗体またはタンパク質 | 1 mg 抗体またはタンパク質 | 1-5 mg 抗体またはタンパク質 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 標識部位 | アミノ基 | アミノ基 | チオール | アミノ基 | アミノ基 |
| Biotin | LK37 | LK03 | LK10 | LK55 | BK01 |
なぜビオチン化抗体がよく使用されているのか？
ビオチンはストレプトアビジンと特異的に結合し、また結合力も強い(Ka=10-16M)ことから、この特長を利用した様々なアプリケーションが汎用されています。特に抗体の検出や精製において汎用されている技術です。蛍光色素や酵素、ビーズを標識したストレプトアビジンが多数市販されていることも汎用されている理由の一つであり、一度抗体にビオチンを標識した後は実験毎で必要なストレプトアビジン標識体を選択することが可能です。
実験例
免疫染色
使用製品：Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit (メーカーコード: LK37)
HeLa細胞にてBiotin 標識抗ミトコンドリア抗体を用いて免疫反応後、Peroxidase 標識ストレプトアビジン及びDAB (メーカーコード: D006) 添加により染色した。
使用製品：Biotin Labeling Kit-NH2 (メーカーコード: LK03)
ラット肺動脈凍結切片にて、Biotin 標識抗ニトログアノシン抗体を用いて免疫反応後、Peroxidase 標識ストレプトアビジン及びDAB (メーカーコード: D006) 添加により染色した。
(画像提供：北里大学医療衛生学部 微生物学教室 北里英郎先生)
蛍光色素・蛍光タンパク質標識キット
ラインアップ
| Ab-10 Rapid Labering kit (少量抗体用) | Labeling Kit (限外ろ過膜チューブ同梱) | ||||
| サンプル量 | 10 µg 抗体 | 50-200 μg 抗体またはタンパク質 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 標識部位 | アミノ基 | アミノ基 | チオール | ||
| 低分子色素 | Fluorescein | [ λex：500 nm / λem：525 nm ] | LK32 | LK01 | － |
| HiLyte Fluor™ 555 | [ λex：555 nm / λem：570 nm ] | LK35 | LK14 | － | |
| HiLyte Fluor™ 647 | [ λex：655 nm / λem：670 nm ] | LK36 | LK15 | － | |
| ICG | [ λex：774 nm / λem：805 nm ] | － | LK31 | － | |
| 蛍光タンパク質 | Allophycocyanin | [ λex：650 nm / λem：660 nm ] | － | LK21 | LK24 |
| R-Phycoerythrin | [ λex：564 nm / λem：575 nm ] | LK34 | LK23 | LK26 | |
HiLyte Fluor™と Alexa Fluor® の励起光照射時の蛍光強度変化
実験例
-
組織免疫染色
使用製品：Fluorescein Labeling Kit-NH2
(メーカーコード: LK01)
ラット下顎骨凍結切片にて、Fluorescein 標識した抗ラットI-A 抗原抗体を用いて免疫染色した。
画像提供：東京医科歯科大学 大学院 医歯学総合研究科 歯髄生物学分野楊光艶先生、川島伸之先生
-
多重免疫染色
使用製品：Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 555/647 Labeling Kit
(メーカーコード: LK35, LK36)
HeLa細胞にて、波長の異なる蛍光色素を抗ミトコンドリア抗体および抗アクチン抗体に標識後、免疫染色した。
ミトコンドリア(赤)：HiLyte Fluor™ 647 標識抗体
アクチン(黄)： HiLyte Fluor™ 555 標識抗体
核（青）：DAPI
-
組織免疫染色
使用製品：Ab-10 Rapid R-Phycoerythrin Labeling Kit
(メーカーコード: LK34)
HL60細胞にて、 R-Phycoerythrin 標識抗CD13 抗体を用いて免疫染色し、フローサイトメーターにて検出した。
フィルター： Ex 488 nm、Em 564-606 nm
-
in vivoイメージング
使用製品：ICG Labeling Kit-NH2
(メーカーコード: LK31)
ICG標識抗インテグリンα2抗体を用い、マウス皮下腫瘍の蛍光観察した。
投与法：尾静注により ICG ラベル抗体 50 μg 投与し48 時間後に測定
装置：in vivo 光イメージング装置 (Clairvivo OPT; 島津製作所)
マウス ： BALB/c nu/nu (雌 11 週齢)
腫瘍細胞：HeLa (右腋皮下移植 , 移植後 4 週)
フィルター： Ex 785 nm、Em 845/55 nm
酵素標識キット
ラインアップ
| Ab10 Rapid Labering kit (少量抗体用) |
Labeling Kit (限外ろ過膜チューブ同梱) |
Labeling Kit (for 1 mg) (限外ろ過膜チューブ同梱) |
||
| サンプル量 | 10 µg 抗体 | 50-200 µg 抗体またはタンパク質 | 1 mg 抗体またはタンパク質 | |
| 標識部位 | アミノ基 | アミノ基 | チオール | アミノ基 |
| Alkaline Phosphatase | － | LK12 | LK13 | － |
| Peroxidase | LK33 | LK11 | LK09 | LK51 |
実験例
免疫染色
使用製品：Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit (メーカーコード: LK33)
HeLa 細胞にて、 Peroxidase 標識抗ミトコンドリア抗体を用いて免疫反応後、DAB (メーカーコード: D006) 添加により染色した。
ウエスタンブロット
使用製品：Peroxidase Labeling Kit-NH2 (メーカーコード: LK11)
リン酸化チロシン BSA を SDS-PAGE で泳動した後、ニトロセルロース膜に転写し、一次抗体法および二次抗体法にて免疫反応を行った。その後、一次抗体または二次抗体に標識したPeroxidase とTMB による発色反応により検出した。
使用製品：Alkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2 (メーカーコード: LK12)
抗原タンパク質をSDS-PAGE で泳動した後、ニトロセルロース膜に転写しAlkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2 で作製した標識抗体を用いて検出した。
Jackson社の2次抗体も取り扱っております。詳細はこちら
製品一覧
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Labeling Kit (ビオチン)
Labeling Kit (蛍光色素・蛍光タンパク質)
Labeling Kit (酵素)
Ab-10 Rapid Labeling Kit (ビオチン)
Ab-10 Rapid Labeling Kit (蛍光色素・蛍光タンパク質)
Ab-10 Rapid Labeling Kit (酵素)
Biotinylation Kit (ビオチン)
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
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