G-Rex シリーズ

労力・コスト・場所を削減

• 撹拌、機器不要 ⇒ インキュベーターに入れるだけ、新規の設備投資不要
• 培地交換の頻度を低減 ⇒ 例. 交換不要/10日間培養、2回/12日間培養
• 培地が大量に入り、ムダな空間が少ない ⇒ インキュベーター内の場所を取らない

高収量

• 底面からガスが安定供給 ⇒ 高密度な培養が可能
• 大量の培地が入る ⇒ 培地交換の頻度を低減 ⇒ 細胞増殖が速く短期間で回収

フラスコ製品

コードNo.	メーカーコード	品名	容量	培地量	ガス交換膜 面積	細胞増殖能 (x106個)	培養日数/培地交換
-	80055	G-Rex® 5	3個	50 mL	5 cm2	2.5 → 100～200	約10日/不要
554-41431	RU80055	G-Rex® 5, RUO	3個
557-21923	80040S	G-Rex® 10	12個	40 mL	10 cm2	5 → 200～400	約12日/2回
-	80110	G-Rex® 10M	３個	100 mL			約10日/不要
557-30193	80110S	G-Rex® 10M, RUO	３個
-	80110-CS	G-Rex® 10M-CS	3個
553-34953	80110S-CS	G-Rex® 10M-CS, RUO	3個
-	RU80550	G-Rex® 50M, RUO	3個	500 mL	50 cm2	25 → 1,000～2,000	約10日/不要
-	RU80550-CS	G-Rex® 50M-CS, RUO	3個
-	RU80550-TF	G-Rex® 50M-TF, RUO	2個
552-36721	80500	G-Rex® 100	3個	450 mL	100 cm2	50 → 2,000～4,000	約12日/2回
551-34753	81100	G-Rex® 100M	3個	1,000 mL			約10日/不要
551-41441	RU81100	G-Rex® 100M, RUO	3個
559-33693	81100-CS	G-Rex® 100M-CS	3個
558-41451	RU81100-CS	G-Rex® 100MｰCS, RUO	3個
553-41401	G285500	G-Rex® 500M	2個	5,000 mL	500 cm2	250 → 10,000～20,000	約10日/不要
557-41421	G285500-RU	G-Rex® 500M, RUO	2個
550-41411	G285500-CS	G-Rex® 500M-CS	2個
555-41461	RUO5500-CS	G-Rex® 500M-CS, RUO	2個
-	G285500-TF	G-Rex® 500M-TF	2個
-	RU85500-TF	G-Rex® 500M-TF, RUO	2個

マルチウェルプレート製品

コードNo.	メーカーコード	品名	容量	培地量	ガス交換膜 面積	細胞増殖能 (x106個)	培養日数/培地交換
554-30201	80192M	G-Rex® 24Well Plate	1個	8 mL	2 cm2	1 → 40～80	約12日/2回
551-30211	80240M	G-Rex® 6Well Plate	1個	40 mL	10 cm2	5 →200～400	約12日/2回
559-36731	80660M	G-Rex® 6M Well Plate	1個	100 mL			約10日/不要
-	80120M	G-Rex® 6M-2cm2Well Plate	1個	20 mL	2 cm2	1 → 60～80	約10日/不要
-	80300M	G-Rex® 6M-5cm2Well Plate	1個	50 mL	5 cm2	2.5→ 150～200	約10日/不要

培養の途中で細胞数を確認するにはどうすればよいですか？

1. 培地の大半(～75%、最大90%)を抜き、G-Rex容器を回して細胞を懸濁してから細胞数を測定してください。
2. 培地中のグルコース/乳酸の濃度を測定してください。

キャップを締めるべきですか？

いいえ、ガスの移動はG-Rex容器の底部(ガス透過膜)通じて行われるため、キャップを緩めたままにする必要はありません。

通常の培養容器とは異なる注意点はありますか？

1. フラスコと異なり、培地の色はすぐには変化しないため、目視だけではpHを判定できません。
   プロトコルに従って検討することでpHが常に許容範囲内にあることが保証されます。
2. ピペットの先端でG-Rex容器の底部を傷つけないようご注意ください。細胞回収時は、G-Rex容器を回して懸濁してください。

再利用や再滅菌はできますか？

いずれもできません。G-Rex容器はディスポーザブルです。

“M”シリーズ、"M-CS"シリーズの利点は何ですか？

Mシリーズ：高い細胞密度、培地使用量・労働力の削減、および培養期間の短縮です。 培地の体積と表面積の10mL/cm²比の最適化によります。
M-CSシリーズ：セミオート・閉鎖系で操作を行うことが可能です(ポンプ使用)。

① G-Rex 使用時のK562細胞の細胞密度と使用培地量

• a：培地量を変えた場合の最大細胞密度(個/cm²)

  • 培養開始時は1.25 x 10⁵個/cm²、培地の交換なし

  →10 mL/cm²までは使用量と最大細胞密度は 相関関係にあった

• b：培地交換回数を変えた場合のそれぞれの細胞密度変化(個/cm²)

  • いずれも培養開始時は1.25 x 10⁵個/cm²、培地量は10 mL/cm²
  • 培地交換回数：0回[▲]、1回(5 mL/cm² x 2, day0,12) [■] 、3回(2.5 mL/cm² x 4, day0,6,12,18) [■]

  →培地交換回数が少ないほど早く細胞密度が高くなった

② K562細胞密度の変化(G-Rex と通常プレートの比較)

初期細胞密度はいずれも1 x 10⁶個/cm²、毎日培地全量の半分を交換した

a：従来型プレート[▲]による培養に比べ、G-Rex [■]では高密度な培養状態を保った
b：14日間培養した結果、G-Rexにより10倍以上の細胞密度となった

①, ②とも下記参考文献より抜粋：

Optimizing the production of suspension cells using the G-Rex “M” series
　Authors: Pradip Bajgain, et al
　Publication: Molecular Therapy - Methods & Clinical Development
　Published Date: 11/1/2014

その他参考文献：

CAR-T & TCR

Go-CART: an animal-free system for the assessment of CAR T cell function
　Authors: Pradip Bajgain, et al
　Publication: Journal of Immunotherapy of Cancer
　Published Date: 11/4/2015

CTL&VST

Manufacture of GMP-compliant functional adenovirus-specificT-cell therapy for treatment of post-transplant infectious complications
　Authors: CLAIRE HORLOCK, et al
　Publication: Cytotherapy
　Published Date : 6/1/2016

NK, Treg, HSC & Others

Large-Scale Culture and Genetic Modification of Human Natural Killer Cells for Cellular Therapy
　Authors: Natalia Lapteva, et al
　Publication: Methods in Molecular Biology
　Published Date : 1/1/2016