コージンバイオ 脂肪由来幹細胞培養用培地 KBM ADSC-1 & 2
本製品は、脂肪由来幹細胞の未分化性を維持したまま増殖させるのに適した培地です。未分化性の維持は、本培地で培養した細胞が脂肪、骨、軟骨へ分化すること及び 表面マーカーで確認しています。
特長
- KBM ADSC-1 は 5%FBS を含む Ready-to-Use の培地
- KBM ADSC-1 から FBS を除いた KBM ADSC-2 も販売中
ADSC-2 使用時に血清を5%添加してご使用ください - FBS の代わりにヒト血清を用いても培養が可能
使用例1（KBM ADSC-1）
| (%) | P5 | P6 | P7 |
|---|---|---|---|
| CD29 | 100 | 100 | 100 |
| CD44 | 100 | 100 | 100 |
| CD73 | 100 | 100 | 100 |
| CD90 | 99.6 | 99.5 | 99.2 |
| CD105 | 99.5 | 99.5 | 97.3 |
[培養条件]
細胞：ヒト脂肪由来幹細胞（ADSC）
培地：KBM ADSC-1
容器：細胞培養用6穴プレート（Corning 5316）
培養：4.75×104 cells/wellで播種し、
37℃・5% 炭酸ガス環境下で静置培養、3日間隔で継代
分析：各継代時にフローサイトメトリー法により表面マーカーを解析
使用例2（KBM ADSC-1で培養した細胞の分化誘導試験）
[培養条件]
細胞：ヒト脂肪由来幹細胞を KBM ADSC-1 で 2～4 継代培養した細胞
容器：細胞培養用24穴プレート（Corning 353047）
培養：脂肪 6.25×104 cells/wellで播種／培養用培地（D-MEM(H)＋10% FBS＋1 mMピルビン酸ナトリウム）
培養1日目にDMEM(H)をベースとした脂肪分化誘導培地に置換し、その後2～3日ごとに培地交換
骨 6.25×104 cells/wellで播種／培養用培地（D-MEM(H)＋10% FBS）
培養1日目にDMEM(H)をベースとした骨分化誘導培地に置換し、その後2～3日ごとに培地交換
軟骨 6.25×104 cells/wellで播種／培養用培地（D-MEM(H)＋10% FBS）
培養1日目にDMEM(H)をベースとした軟骨分化誘導培地に置換し、その後3～4日ごとに培地交換
染色：脂肪 培養7日目にOil Red Oで染色
骨 培養21日目にAlizarin Red Sで染色
軟骨 培養28日目にAlcian Blueで染色
使用例 3（FBSとHSの比較試験）
| (%) | Medium | P3 | P4 | P5 | P7 | P8 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| CD29 | FBS | 99.9 | 99.2 | 98.9 | 99.9 | 99.6 |
| HS | 99.7 | 97.9 | 99.2 | 99.7 | 99.9 | |
| CD44 | FBS | 99.8 | 100 | 100 | 100 | 99.9 |
| HS | 100 | 99.9 | 100 | 100 | 99.9 | |
| CD73 | FBS | 99.9 | 99.8 | 99.9 | 99.9 | 100 |
| HS | 99.8 | 99.7 | 99.5 | 99.9 | 99.7 | |
| CD90 | FBS | 100 | 99.9 | 99.6 | 99 | 99.9 |
| HS | 99.8 | 99.6 | 99.7 | 99.7 | 99.9 | |
| CD105 | FBS | 99.8 | 99.6 | 99.8 | 99.8 | 99.3 |
| HS | 99.9 | 99.7 | 99.1 | 99.4 | 99.4 |
[培養条件]
細胞：ヒト脂肪由来幹細胞（ADSC）
培地：KBM ADSC-2＋5% FBS
または5% HS
容器：細胞培養用6穴プレート（Corning 5316）
培養：4.75×104 cells/wellで播種し、
37℃・5% 炭酸ガス環境下で静置培養3日間隔で継代
分析：各継代時にフローサイトメトリー法により表面マーカーを解析
使用例 4（KBM ADSC-2＋5% HSで培養した細胞の分化誘導試験）
[培養条件]
細胞：ヒト脂肪由来幹細胞をKBM ADSC-2＋5% FBSまたはKBM ADSC-2＋5% HSで1～5継代培養した細胞
容器：細胞培養用24穴プレート（Corning 353047）
培養：脂肪 6.25×104 cells/wellで播種／培養用培地（D-MEM(H)＋10% FBS）
培養1日目にDMEM(H)をベースとした脂肪分化誘導培地に置換し、その後2～3日ごとに培地交換
骨 6.25×104 cells/wellで播種／培養用培地（D-MEM(H)＋10% FBS）
培養1日目にDMEM(H)をベースとした骨分化誘導培地に置換し、その後2～3日ごとに培地交換
染色：脂肪 培養7日目にOil Red Oで染色
骨 培養21日目にAlizarin Red Sで染色
製品一覧
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